3种血小板计数方法的比较研究

目的观察鞘流电阻抗、荧光染色与手工计数3种血小板计数方法之间的差异。方法收集血小板高值(>500×109/L)85例、中值(100×109/L^300×109/L)211例、低值(<50×109/L)161例,分别在Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪CBC+DIFF模式(鞘流电阻抗法)及CBC+RET(荧光染色法)下计数血小板,同时使用改良牛鲍计数板进行传统的血小板手工计数,比较3种方法所得结果的差异。结果观察所有标本在CBC+DIFF模式下,血小板直方图以及相关的仪器报警,阳性者手工推片,染色镜检血小板形态。结论鞘流电阻抗法对低值和高值血小板的识别能力不如荧光染色法及手工计数,必要时需用荧光染色法或手工法复检,血小板的直方图以及相关的仪器报警阳性时,应推片镜检血小板形态。

抗3-硝基酪氨酸单克隆抗体的制备及免疫学特性分析

目的制备抗3-硝基酪氨酸(3-NT)单克隆抗体并鉴定其免疫学特性。方法用化学合成方法将3-NT与OVA用戊二醛偶联合成的人工抗原3硝基酪氨酸-戊二醛-鸡卵白蛋白(3NT-G-OVA)作为免疫原,皮下注射免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,扩大培养并对抗体进行免疫学鉴定与分析。结果获得1株稳定分泌抗3-硝基酪氨酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗亚型为Ig G2a;纯化后的抗体效价为1∶(6.14×106);单抗亲和力常数为7.81×107(L·mol-1);Western blot检测证明该单抗与含有3-硝基酪氨酸的蛋白能特异地结合。结论制备了1株具有较高免疫学活性和特异性的抗3-NT单克隆抗体,并可用于Western blot检测病人样本中的蛋白硝基化水平。

肺弹性蛋白降解肽段人工抗原的合成与鉴定

目的制备和鉴定肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,为进一步研制慢性阻塞性肺疾病(COPD)免疫检测试剂盒打下良好基础。方法以Sulfo-SMCC为偶联剂,钥孔血蓝蛋白(KLH)为载体蛋白制备免疫原;经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)电泳鉴定偶联情况;以免疫原免疫Balb/c小鼠制备特异性抗体,间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)法评价抗血清效价及特异性。结果紫外扫描和SDS-PAGE电泳确认了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原合成成功,其蛋白浓度为1.181mg/mL,抗血清效价高于1∶64 000,IC50为13.7ng/mL,抗血清与无关肽段无交叉反应。结论本实验成功制备了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,其具有较好的免疫原性,为建立快速准确检测COPD免疫检测方法奠定基础。

(2S,3S)-1,2-环氧-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-苯丁烷的合成及表征

以Boc-L苯丙氨酸和苯酚为原料,由DMAP-DCC催化生成苯酯,再制备β-酮硫叶立德化合物,然后得到α-氯酮中间体,再经还原、环合最终合成目标化合物(2S,3S)-1,2-环氧-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-苯丁烷,总收率约为49%(以Boc-L苯丙氨酸计)。目标产物的结构经IR,MS和1H NMR表征。

血清RBP、ADPN、NGAL、CysC、α_1-MG与胰岛素抵抗及2型糖尿病肾病的相关性

目的探讨血清视黄醇结合蛋白(RBP)、脂联素(ADPN)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、α_1-微球蛋白(α_1-MG)、胱抑素C(Cys C)与胰岛素抵抗及2型糖尿病肾病的相关性。方法选择2014年2月至2016年9月确诊为2型糖尿病的60例患者作为糖尿病组(G2组),选择同期确诊为2型糖尿病合并早期肾病的60例患者作为G3组,选择同期确诊为2型糖尿病合并晚期肾病的60例患者作为G4组,选择同期健康体检者60例作为健康对照组(G1组)。同时检测4组研究对象的血清RBP、ADPN、NGAL、α_1-MG、Cys C、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)水平并进行比较。结果 G3组和G4组患者血清RBP、NGAL、α_1-MG、Cys C水平和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均明显高于G1组和G2组(P<0.05);G4组患者的血清RBP、NGAL、α_1-MG、Cys C水平和HOMA-IR均明显高于G3组(P<0.05);G2组、G3组、G4组患者ADPN水平均明显低于G1组(P<0.05);G2组、G3组、G4组患者ADPN水平差异均有统计学意义(P<0.05)。G3组和G4组患者血清RBP、ADPN、NGAL、α_1-MG、Cys C指标灵敏度均超过80.00%,联合检测灵敏度均超过95.00%;G3组联合检测明显高于各单项指标检测结果,差异有统计意义(P<0.05),但G4组差异无统计学意义(P>0.05)。G3联合检测的特异度为88.33%(53/60)。结论血清RBP、ADPN、NGAL、α_1-MG、Cys C与胰岛素抵抗及2型糖尿病肾病具有一定的相关性,血清RBP、ADPN、NGAL、α_1-MG、Cys C联合检测能提高2型糖尿病肾病早期患者的检出率,其指标变化对2型糖尿病肾病的早期诊断、治疗监测、预后判断均具有较好的临床价值。

后腹腔镜根治术治疗肾癌效果及对促肾上腺皮质激素、皮质醇、β-内啡肽的影响

目的探讨后腹腔镜根治术治疗肾癌的效果及对促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)、β-内啡肽的影响。方法选取重庆市永川区中医院2013年7月—2016年6月收治的108例肾癌作为研究对象,依据手术方法不同分为观察组和对照组,每组54例。观察组行后腹腔镜肾癌根治术,对照组行开放性肾癌根治术,比较两组手术疗效以及治疗前后ACTH、Cor、β-内啡肽水平变化。结果两组手术时间比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组术中出血量、下床活动时间、住院时间、切口感染率均显著少于对照组(P<0.05);两组术后1 d ACTH、Cor、β-内啡肽水平均较术前显著上升(P<0.05),术后3、5 d逐渐下降,观察组术后5 d均恢复至术前水平,对照组仅ACTH术后5 d恢复至术前水平,Cor、β-内啡肽水平仍显著高于术前(P<0.05)。观察组ACTH、β-内啡肽水平术后1、3 d均明显低于同时点对照组(P<0.01),Cor水平术后1、3、5 d均明显低于同时点对照组(P<0.01)。结论后腹腔镜根治术治疗肾癌相对于开放性根治术能有效减少手术创伤、促进术后恢复,同时还可缓解因手术创伤引起的炎症应激反应。

生化指标项目用于肝硬化疾病诊断中的价值分析

目的分析血清生化指标直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(TBIL)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、胆汁酸(TBA)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)诊断肝硬化价值。方法选取该院在2015年2月至2016年3月收治肝硬化患者为研究对象,依照患者疾病类型分为急性肝炎肝硬化组45例、慢性肝炎肝硬化组48例和其他肝硬化组50例,另外选取健康人员50例作为对照组,测定血清生化指标,并比较分析。结果肝硬化组和肝炎肝硬化组DBIL、TBIL、TBA等生化指标均高于对照组(P<0.05)。急性肝炎肝硬化组、其他肝硬化组联合检测阳性率均为100.0%,慢性肝炎肝硬化联合检测阳性率为92.0%。将阳性率前5位生化指标与对照组比较,变化幅度较大指标包括ALT、AST、TBA、GGT等。结论肝硬化疾病诊断中多项生化指标联合检测能够提高诊断阳性率,对疾病治疗和预后有重要价值。

联合检测血清PGR、HIF-1α和CEA在胃癌诊断中的价值

目的检测血清胃蛋白酶原比值(PGR)、血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和癌胚抗原(CEA)在胃癌中的表达水平,并探讨其单独或联合检测在胃癌中的诊断价值。方法采用回顾性研究方法,抽取2015年1月至2016年4月在该院收治的100例胃癌患者为观察组,选择同期体检的100例健康者为对照组,分别抽取两组对象的空腹静脉血,采用酶联免疫吸附试验检测PGR和HIF-1α,采用化学发光法检测CEA的表达水平。结果观察组PGR水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),观察组HIF-1α及CEA水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PGR和HIF-1α诊断胃癌的灵敏度较高,两者均显著高于CEA,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α和CEA诊断特异度较高,均明显高于PGR,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α的诊断准确度高于PGR和CEA,但各指标间差异无统计学意义(P>0.05)。PGR、CEA和HIF-1α3项标志物联合检测的灵敏度最高,差异均有统计学意义(P<0.05);PGR、CEA和HIF-1α3项标志物联合检测的特异度最高,其明显高于PGR+CEA、HIF-1α+PGR,差异有统计学意义(P<0.05),但与CEA+HIF-1α相比差异无统计学意义(P>0.05);PGR、CEA和HIF-1α3项标志物联合检测的准确度最高,与各组合间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测PGR、HIF-1α和CEA具有高敏感度、特异度和准确度的特点,能有效提高胃癌的诊断效率,有助于胃癌的筛查和早期诊断。

血清胱抑素C与视黄醇结合蛋白在糖尿病肾病诊断中的意义

目的探讨分析血清胱抑素C(Cys C)与视黄醇结合蛋白(RBP)的检测在临床诊断糖尿病肾病的意义。方法选取2015年5月至2016年3月在该院就诊的84例糖尿病肾病患者(研究组)与同期体检健康者65例(对照组)作为研究对象,分别对其Cys C与RBP水平进行检测,并对其与糖尿病肾病之间的关系进行分析。结果研究组患者血清Cys C[(2.20±1.07)mg/dL]与RBP水平[(96.58±16.87)mg/dL]均显著高于对照组[(0.79±0.18)、(34.6±3.06)mg/dL],差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者的血清Cys C与RBP的阳性率分别是55.95%和69.04%,二者联合检测的阳性率是92.86%,明显高于二者单独检测的结果。结论血清Cys C与RBP的联合检测在糖尿病肾病的临床诊断中有着较高的应用价值,值得临床推广。

同型半胱氨酸检测方法性能评价研究

目的对比高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、循环酶法与酶比色法在同型半胱氨酸检测中的性能,了解和评价同型半胱氨酸检测方法。方法对HPLC、ELISA、循环酶法与酶比色法4种检测方法的线性范围、准确度、精密度以及抗干扰能力等指标进行分析。结果 HPLC回归方程为Y=1.21×10~5 X-7.00×10~4,R^2=0.999 8;ELISA回归方程为Y=0.991 X+0.603 1,R^2=0.999 6;循环酶法回归方程为Y=0.998 X+0.605 5,R^2=0.996;酶比色法回归方程为Y=0.993 X+0.605 7,R^2=0.999 4。HPLC、ELISA、循环酶法、酶比色法试剂实际测试精密度变异较小。胆红素(200mg/L)、乳糜微粒(0.5%)、血红蛋白(1.5g/L)、抗坏血酸(300mg/L)均不会对HPLC、ELISA、循环酶法与酶比色法造成干扰。HPLC平均回收率为91.4%;ELISA平均回收率为86.0%;循环酶法平均回收率为89.9%;酶比色法平均回收率为80.2%。4种方法测定结果具有较好一致性。结论在同型半胱氨酸检测中,4种方法线性范围有所不同,精密度较佳,回收率较高,且有着较强的抗干扰能力。

不同诱导方案对成人急性髓系白血病的应用效果及安全性研究

目的探讨不同诱导方案对成人急性髓系白血病的应用效果及安全性。方法选取2014年1月至2018年12月于该院就诊的82例急性髓系白血病患者作为研究对象,将患者按不同诱导方案分为观察组与对照组,观察组(n=42)采用去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗,对照组(n=40)采用柔红霉素联合阿糖胞苷治疗,分析两组患者的缓解率、总有效率和不良反应情况。结果观察组总有效率为83.33%,对照组总有效率为62.50%,观察组总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后血小板计数、血红蛋白4级患者均稍少于2~3级患者,中性粒细胞4级患者均稍低于2~3级患者,但观察组与对照组比较,血液学不良反应率差异无统计学意义(P>0.05);观察组心律失常、肝肾功能损伤、感染及发热、出血发生率稍低于对照组,但两组非血液学不良反应率差异无统计学意义(P>0.05)。结论去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷对成人急性髓系白血病患者,与柔红霉素联合阿糖胞苷治疗相比疗效更好,治疗后并无明显血液、非血液不良反应增加,安全性较好。

尿液同型半胱氨酸、视黄醇结合蛋白检测在肾功能早期损伤中的诊断价值

目的研究尿液同型半胱氨酸(Hcy)、视黄醇结合蛋白(RBP)检测在肾功能早期损伤中的诊断价值。方法选取2015年5月至2016年2月于该院接受诊疗的肾功能早期损伤患者80例作为观察组,另取同期80例健康体检者作为对照组,检测2组研究对象尿液Hcy、RBP水平,并进行比较。同时,比较Hcy、RBP单独及两者联合检测在观察组患者中的阳性率。此外,根据尿微量蛋白(mAlb)/肌酐(Cr)值不同将观察组患者分为正常蛋白尿组(39例)、微量蛋白尿组(22例)及大量蛋白尿组(19例),分别对比3组的Hcy、RBP水平,并做Pearson相关性分析。结果观察组尿液Hcy、RBP水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Hcy联合RBP检测肾功能早期损伤的阳性率为78.75%(63/80),明显高于单独Hcy与单独RBP检测的56.25%(45/80)、43.75%(35/80),差异均有统计学意义(P<0.05)。大量蛋白尿组患者尿液Hcy、RBP水平均明显高于正常蛋白尿组与微量蛋白尿组,而微量蛋白尿组又明显高于正常蛋白尿组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示蛋白尿与尿液Hcy、RBP水平均呈显著正相关。结论检测尿液Hcy、RBP水平可有效评价患者肾功能早期损伤情况,具有较高的临床诊断价值。

原发性高血压患者同型半胱氨酸检测的临床意义

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)检测在原发性高血压患者的临床意义。方法选取2015年6月至2016年4月在该院进行诊治的124例原发性高血压患者作为研究组,另选同期60例体检健康者作为健康对照组,比较2组研究对象的血清Hcy、叶酸、维生素B_(12)水平。结果研究组患者血清Hcy水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而叶酸和维生素B_(12)水平则显著低于健康对照组(P<0.05);研究组患者高同型半胱氨酸血症检出率(46.77%)明显高于健康对照组(8.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性高血压患者血清Hcy上升,叶酸、维生素B_(12)降低,说明高Hcy是原发性高血压的重要危险因子,其检测对疾病的预防、诊断和治疗有重要的临床意义。

血与尿中β_2-微球蛋白在糖尿病肾病中的诊断价值

目的探讨血、尿β2微球蛋白在诊断糖尿病肾病患者早期肾损伤中的临床价值。方法将糖尿病患者根据症状分为糖尿病肾损害组35例和非损害组33例,另取同期健康体检者78例作为对照组。测定各组血、尿β2微球蛋白的水平,同时测定各组的血清肌酐(Scr)、尿素(Urea)、肌酐清除率(Ccr)。结果糖尿病患者组血、尿β2微球蛋白均有升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);糖尿病肾损害组和非损害组比较,血β2微球蛋白差异有统计学意义(P<0.05),而尿β2微球蛋白差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过检测糖尿病肾病患者血、尿β2微球蛋白水平,对病情观测有一定临床价值,肾脏受损越严重,血、尿β2微球蛋白检测值越高。

成年患者人型支原体脑膜炎1例并文献复习

目的分析人型支原体导致成年人中枢神经系统感染的临床特征、诊断及治疗,以期提高对此类感染的认识。方法总结分析重庆市垫江县中医院收治的1例成年患者神经外科手术后继发人型支原体脑膜炎的诊疗经过,并以“Mycoplasma hominis”和“meningitis”或“encephalitis”或“nervous”或“neuraxitis”或“brain”为关键词,在PubMed检索英文文献,在万方、中国期刊网全文数据库以“人型支原体”和“脑膜炎”或“神经系统”为关键词检索中文文献,检索时限为1980年1月1日—2020年12月31日,纳入有完整临床资料的病例15例。结果包括本例的16例患者中,11例脑脓肿和5例脑膜炎患者感染部位均有创伤史或手术史,10例(62.5%)留置导尿;几乎所有病例都存在诊断滞后(12~36 d,平均20.5 d);药物治疗以莫西沙星和多西环素为主;总预后良好,治愈率较高。结论人型支原体中枢神经系统感染缺乏特异的临床表现,诊断相对比较困难;治疗上目前较多推荐多西环素或莫西沙星,最佳治疗方案还有待进一步研究。对有易感因素的人群,需警惕人型支原体在非泌尿生殖部位的致病力。

IFN-γ诱导A549细胞表达PD-L1的机制研究

目的探讨IFN-γ诱导非小细胞肺癌A549细胞表达PD-L1的分子机制。方法IFN-γ刺激体外培养的非小细胞肺癌A549细胞,或加入信号通路抑制剂预先孵育1 h后再行刺激,流式细胞术检测PD-L1的表达水平。分选CD+3 T细胞与A549细胞共培养,检测CD+3 T细胞的增殖情况。结果与未刺激组A549细胞表达的PD-L1水平[(39.6±5.8)%]比较,IFN-γ刺激的A549细胞显著上调PD-L1的蛋白水平[(94.3±4.9)%],二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。加入STAT1抑制剂后,IFN-γ上调PD-L1的效果受到显著抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。而STAT3抑制剂、STAT5抑制剂、STAT6抑制剂和NF-κB抑制剂无明显影响。与未刺激组比较,IFN-γ刺激组A549细胞能够显著抑制CD+3 T细胞的增殖能力。结论IFN-γ可通过STAT1信号诱导A549细胞上调PD-L1的表达,从而促进肺癌的免疫逃逸。

血清同型半胱氨酸、神经元特异性烯醇化酶水平与2型糖尿病颈动脉内中膜增厚的关系

目的探讨血清同型半胱氨酸(HCY)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与2型糖尿病(T2DM)颈动脉内中膜增厚的关系。方法我院确诊的T2DM住院患者168例。根据颈部血管超声CIMT值分为颈动脉内中膜正常组与增厚组。检测患者血清HCY、NSE及常规生化指标,分析血清HCY、NSE水平与T2DM颈动脉内中膜增厚的关系。结果增厚组血清HCY、NSE水平高于正常组,且重度增厚组高于轻度增厚组(P<0. 05)。高水平血清HCY和NSE是T2DM颈动脉内中膜增厚的危险因素(P<0. 05)。结论 T2DM颈动脉内中膜增厚可能与血清HCY、NSE水平密切关系,高水平血清HCY和NSE可增加T2DM颈动脉内中膜增厚的风险。

临床化学分析系统试剂携带污染检测方法及处理措施

目的探讨临床化学分析系统试剂携带污染的检测方法及有效的处理措施。方法采用全部12个检测组合逐一配对的方法检测各项目在不同检测申请时的总试剂携带污染;对受污染影响严重的项目,采取单一影响因素检测方法查找污染的主要来源,并采用增加冲洗量、调整检测顺序等处理措施。结果有2个项目总试剂携带污染严重:(1)Mg总试剂携带污染率31.3%;(2)总胆汁酸(TBA)总试剂携带污染率9.68%;经过增加纯水冲洗量处理后,TBA总试剂携带污染率明显下降,Mg处理效果不明显;调整检测顺序后Mg总试剂携带污染率明显下降。结论临床化学分析系统试剂携带污染可以实验检测;采用增加冲洗量、调整检测顺序等处理措施可有效地降低试剂携带污染。

某院2009～2012年临床常见细菌分布及耐药性分析

目的探讨细菌耐药原因及药敏检测情况,为临床正确诊断、合理应用抗菌药物提供理论依据。方法将本院2009年3月至2011年3月垫江县中医院门诊及住院患者取得1 056例血液样本。细菌及真菌用VITEK 2Compact鉴定系统进行鉴定,药敏试验运用MIC法。结果 1 056例血培养中,阳性标本287例,阳性率为27.18%。其中革兰阳性球菌189株(65.85%),革兰阴性杆菌83株(28.92%),真菌9株(3.14%),革兰阳性杆菌3株(1.05%)。结论临床医师应根据血培养的药敏结果合理使用抗菌药物。

反复呼吸道感染患儿家庭养育情况和血清微量元素的相关性研究

目的探讨反复呼吸道感染(RRI)患儿家庭养育情况和血清微量元素的相关性。方法选取2018年3月到2019年12月该院收治的40例RRI患儿作为观察组,同时选取40例健康儿童作为对照组。比较2组血清锌(Zn)、钙(Ca)、铁(Fe)、铜(Cu)、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM、CD4、CD4/CD8、CD8、CD3水平,并分析血清微量元素与Ig及T细胞亚群的相关性。结果观察组Zn、IgG、IgA、CD4、CD4/CD8水平明显低于对照组,而CD8水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RRI患儿Zn水平与IgG、IgA、CD4/CD8水平呈正相关(P<0.05)。结论RRI患儿家庭养育情况和血清微量元素呈正相关,即家庭养育情况越好,血清微量元素水平越高,反之则越低。因此,家长需要对患儿提供良好的家庭养育环境,以便能够提升其机体免疫力,为其补充足够的微量元素,最终可降低RRI发生率。