PEG胁迫对不同椰枣品种耐旱生理的影响

为了评价‘Sewi’‘Helali’‘Khadrawy’3个椰枣品种的耐受干旱胁迫能力,本研究采用不同浓度的聚乙二醇(PEG)进行胁迫处理,探讨不同品种椰枣种子、椰枣幼苗在聚乙二醇胁迫下生长指标和生理指标的变化特征。结果显示:在种子萌发阶段,‘Khadrawy’在高浓度PEG胁迫下种子萌发率最高,‘Sewi’次之;在幼苗期,3个品种在受到15%PEG和25%PEG胁迫时,‘Khadrawy’鲜株重和根长均最大,其耐受渗透胁迫能力最强,叶片中生理指标脯氨酸含量较高,丙二醛含量较低,因此‘Khadrawy’在高浓度PEG胁迫下生长量大,渗透调节能力最强,‘Sewi’耐胁迫能力次之,‘Helali’较差。综上结果,‘Khadrawy’品种可能更适合干旱地区种植,比如海南的乐东、东方、三沙市和三亚等常年干旱少雨地域,盐碱化地域种植,而‘Helali’可能更适合有一定降水量但降水量较少地域种植,比如海南昌江、陵水,云南元江等。

椰枣花粉离体萌发及花粉贮藏方法分析

本研究以椰枣雄株花粉为材料,采用L9(34)正交设计法筛选最佳观察椰枣花粉萌发时间和适宜椰枣花粉离体萌发培养基;研究椰枣花粉干燥时间、贮藏温度和贮藏时间对花粉萌发率的影响。结果表明,椰枣花粉萌发最佳观察时间段为2~4 h;处理1培养基50 g/L蔗糖+0.1 g/L硼酸+0.05 g/L氯化钙效果最佳,其中3因素对椰枣花粉萌发影响大小依次为硼酸、蔗糖、氯化钙;花粉在35℃中干燥8 h最适宜贮藏;当贮藏时间为10~50 d时,常温贮藏的花粉萌发率低甚至无萌发的现象,低于4℃条件下贮藏花粉萌发率均保持较高,无显著差异;当在4℃条件下,10、20、30 d花粉萌发率均无显著差异,当在-20℃,-80℃条件下,10、20、30、40 d花粉萌发率均无显著差异,花粉均保持较高的萌发率,在低温贮藏中随着贮藏时间的延长花粉萌发率逐渐下降。本研究可为椰枣花粉活力检测和贮藏提供技术支撑,同时为今后在椰枣引种推广中的花粉贮藏和人工授粉提供科学依据和实践意义。

外植体的种类及消毒方式对椰枣胚性愈伤组织诱导的影响

为了研究不同外植体及消毒方式对椰枣胚性愈伤组织诱导的影响,在MS培养基的基础上,以椰枣幼苗茎尖生长组织、幼嫩叶片、5年生大树的茎尖生长组织和种胚为外植体,对这4种材料分别用75%乙醇、2%次氯酸钠、2%山农一号(Ⅰ)型组合进行消毒。研究不同消毒方式对这4种典型取材部位的消毒效果及外植体后期的胚性愈伤诱导情况。结果表明:胚性愈伤组织诱导率,种胚>大树茎尖生长点>幼苗茎尖生长点>幼嫩叶片,其中种胚的诱导率最高,达到66.67%,幼嫩叶片的诱导率最低,为26.67%;最佳消毒方案是:75%乙醇+2%次氯酸钠+2%山农一号(Ⅰ)型,种胚、幼苗茎尖生长点、大树茎尖生长点、幼嫩叶片的成活率分别为86.67%、93.33%、83.33%、70.00%。愈伤组织最佳诱导培养基:MS+3.5 g/L植物凝胶+30 g/L蔗糖+1 g/L活性炭+150 mg/L谷氨酰胺+0.3 mg/L烟酸+0.5 mg/L盐酸吡哆醇+100 mg/L肌醇+0.7 g/L磷酸二氢钾+2 mg/L6-BA+3 mg/L NAA+5 mg/L 2,4-D+1 mg/L 2-ip。综上结果,种胚、茎尖生长点部位更适合作为胚性愈伤组织诱导的外植体。

椰枣愈伤组织对不同筛选剂的敏感性分析

为了筛选出合适的抗生素种类和浓度作为遗传转化体系的抗性筛选剂,本研究以卡那霉素、遗传霉素(G418)、潮霉素B、草甘膦作为筛选剂,对椰枣愈伤组织进行敏感性试验。以椰枣茎尖生长组织为外植体诱导出的愈伤组织为实验材料,分别设计卡那霉素、遗传霉素(G418)、潮霉素B、草甘膦4种筛选剂不同浓度梯度,研究负筛选剂卡那霉素、遗传霉素(G418)、潮霉素B、草甘膦对椰枣胚性愈伤组织的致死浓度、半致死浓度及时间,确定愈伤组织对筛选剂的敏感性,为建立椰枣负筛选系统的遗传转化体系提供基础。结果表明:(1)椰枣愈伤组织对筛选剂的敏感度:G418>潮霉素B>卡那霉素>草甘膦。(2)50 mg/L的G418浓度适合作为椰枣遗传转化体系中的抗性筛选剂。(3)50 mg/L的潮霉素B浓度适合作为椰枣遗传转化体系中的抗性筛选剂。(4)100 mg/L的卡那霉素浓度适合作为椰枣遗传转化体系中的抗性筛选剂。(5)椰枣对草甘膦不敏感,不适用作为遗传转化的抗性筛选剂。综上所述,G418和潮霉素B更适合作为椰枣遗传转化体系过程中的抗性筛选剂。