山莨菪硷及川芎嗪预防大鼠肺水肿的实验研究——肺血管壁通透性变化

山莨菪硷及川芎嗪对大鼠肺水肿有明显的预防作用,在肺水肿发生机理中,肺泡一毛细血管通透性增高是中心环节之一。静脉注射Evans蓝后,先注射肾上腺素造成肺水肿,用山莨菪硷或川芎嗪进行预防,应用本实验方法测定肺脏浸泡液中Evans蓝含量及肺泡支气管洗涤液中Evans蓝含量并算出通透指数。按正常组、肺水肿组、山莨菪硷组、川芎嗪组次序结果为:肺脏浸泡液中Evans蓝含量为6.3±2.6、23.6±7.5、11.3±9.3、15.8±11.0(pg/ml);支气管肺泡洗涤液中Evans蓝通透指数为0.26±0.06、19.1±3.8、1.46±0.56、1.66±1.40,肺水肿组与其他三组均有非常显著性差异,P<0.01。结果说明,肺水肿时肺—毛细血管及肺泡上皮通透性增高,山莨菪硷和川芎嗪能抑制这种增高。

全脑缺血预处理诱导大鼠海马缺血耐受的实验研究

目的和方法 :采用大鼠四血管闭塞全脑缺血模型 (4 vesselocclusion ,4VO)及组织病理学方法 ,观察预缺血的持续时间 ,和预缺血与其后的损伤性缺血之间的间隔时间对海马缺血耐受形成的影响。结果 :缺血 6min即可导致海马组织明显的神经元延迟性死亡 (delayedneurondeath ,DND) ,而缺血 3min不足以引起海马组织明显的DND。经过 3min缺血预处理 ,可对间隔 1d和 3d后 6min缺血引起的大鼠海马DND产生明显的保护作用 (P <0 .0 1)。但是 ,1min缺血预处理对间隔 1d后 6min缺血引起的DND不产生明显影响 ;5min缺血预处理对间隔 1d后 6min缺血 ,以及 3min缺血预处理对间隔 1h后 6min缺血引起的DND不但没有保护作用 ,反而有使海马组织损伤累积加重的趋势。结论 :在 4VO大鼠模型中 ,全脑缺血预处理确能诱导海马对缺血性损伤产生耐受 ,诱导海马缺血耐受所需缺血预处理的适宜期间为 3min左右 ,预缺血与后续损伤性缺血之间需要间隔足够的时间 ,适宜间隔在 1～3d左右。

蝮蛇毒抗栓酶的促纤溶和抗凝血作用的实验研究

本工作利用大鼠衄管灌流及异丙肾上腺素(ISP)性AMI模型,以体外纤维蛋白溶解活性、纤溶酶原激活剂(PA)活性,血浆纤溶酶(PL)活性、凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)等变化,观察蛇毒抗栓酶(SVATE)的促纤溶、抗凝血和心肌保护作用。结果表明,SVATE有缴活纤溶怍用,它能逆转ISP性AMI大鼠PL活性的降低,这种作用是由于激活PA导致PL生成增加。同时对内源凝血系统有一定抑制作用。此外保护心肌、降低死亡率。

纤溶系统激活的实验研究—儿茶酚胺对纤溶活性的影响

用不同浓度儿茶酚胺灌流大鼠下肢血管床,观察它们对血管内皮细胞释放纤溶酶原激活剂(PA)的作用。结果显示,同样浓度(25μM)儿茶酚胺所引起的PA释放效应以肾上腺素为最强,去甲肾上腺素次之,异丙基肾上腺素作用最弱,PA活性分别是0.202±0.038,0.117±0.006,0.097±0.007(U/ml,(?)±SE)。β肾上腺素能受体阻断剂心得安完全拮抗异丙基肾上腺素诱导PAL活性升高,部分抑制去甲肾上腺素、肾上腺素的作用。α、β肾上腺素能受体阻断剂(酚妥拉明+心得安)协同作用时,肾上腺素、去甲肾上腺素的这种PA活性升高效应基本抑制。本文还发现,剧烈运动产生应激反应时血浆去甲肾上腺素含量明显升高,为2.45±0.45(ng/ml,(?)±SE),与对照值(0.88±0.20)比P<0.01。与此同时伴随纤溶活性显著增加。实验结果提示:外源性儿茶酚胺诱导PA释放效应主要经由β肾上腺素能受体介导,α肾上腺素能受体涉及部分作用,内源性儿茶酚胺水平升高可引起纤溶活性增加。

缺氧性肺血管收缩机制的研究进展

一、钙离子与缺氧性肺血管收缩已有证据表明缺氧性肺血管收缩(HPVC)与血管平滑肌细胞的Ca^(2+)跨膜流入量增多有关。

用PCR技术研究缺氧时大鼠肺肾上腺素能β_2受体及其mRNA的变化

本文观察常压缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织β和β＿２受体以及β受体ｍＲＮＡ含量的变化。动物分对照组，缺氧２周及４周组。用放射性配基结合法测定β和β＿２受体，用反转录一聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和液体闪烁计数测定β＿２受体ｍＲＮＡ的变化。结果表明，缺氧２及４周大鼠肺组织β受体从对照组的２２４．９±２３．７ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白分别下降到１４７．０±１９．４和１４２．７±３．１ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，（均Ｐ＜０．００１）。β＿２受体从对照组的１７３．８±２１．４ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白分别降至６７，１±１１．８和３８．１±４．０ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，（与对照比及缺氧组间比均Ｐ＜０．００１）。缺氧２周时β＿２受体ｍＲＮＡ水平与对照相比无变化，缺氧４周时明显下降（为对照的４２％，Ｐ＜０．００１）。缺氧４周β＿２受体下降可能与此有关。揭示缺氧后肺β＿２受体下降的分子生物学基础。对肺动脉高压发生发展机制提供新的认识。

脑预缺血引起大鼠海马细胞膜腺苷受体数量和亲和力升高及其对神经元的保护作用

采用放射性配基结合法 ,测定大鼠全脑缺血后海马细胞膜腺苷 (adenosine,ADO)受体数量及亲和力的变化 ,以探讨其与脑缺血耐受形成之间的关系。发现缺血 6min即可导致海马组织明显的神经元延迟性死亡 (de layedneurondeath ,DND) ,缺血 3min不足以引起海马组织明显的DND ;而经过 3min预缺血处理 ,可明显减轻间隔1d后 6min缺血引起的海马DND (P <0 0 1)。与此相对应 ,缺血 3min再灌 1和 3d时 ,ADO受体数量及亲和力明显高于sham组 (P <0 0 5 ) ,而缺血 6min再灌 1和 3d时 ,ADO受体数量明显低于sham组 (P <0 0 5 ) ,但亲和力高于sham组 (P <0 0 5 )。与单纯 6min缺血再灌 4h、1和 3d时相比 ,3min预缺血 + 6min缺血 (间隔 1d)再灌后 ,ADO受体数量及亲和力均显著升高 (P <0 0 5 )。这些结果表明 ,脑预缺血处理可使大鼠海马细胞膜ADO受体数量增多 ,亲和力增强 ,并能对抗损伤性缺血引起的ADO受体数量减少 ,提示腺苷受体数量及亲和力的变化在脑缺血耐受形成过程中发挥了重要的作用。

大鼠肺纤维化形成中肺巨噬细胞增殖和凋亡的变化

目的:观察肺纤维化形成过程中,肺泡巨噬细胞数量、增殖和凋亡的变化。方法:气管内滴注平阳霉素(BLMA_5)(5mg/kg),观察注后14d和30d组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肺泡巨噬细胞数量、增殖和凋亡的变化以及细胞的MTT活力。结果:(1)BLMA_5 14d组和30d组大鼠BALF中巨噬细胞数分别多于sham 14d和30d组,(分别P<0.01,P<0.05);但BLMA_5 30d组的细胞数明显少于BLMA_5 14d组(P<0.05);(2)BLMA_5 14d组巨噬细胞增殖指数高于sham 14d组(P<0.05),而BLMA_5 30d组增殖指数低于sham 30d组(P<0.05);(3)BLMA_5 14d和30d组凋亡细胞数分别多于sham 14d和30d组(P<0.01),但BLMA_5 14d组少于BLMA_5 30d组(P<0.05);(4)BLMA_5 14d和30d组大鼠BALF中巨噬细胞数MTT活力分别高于sham 14d和30d组,分别P<0.01,P<0.05。结论:在肺纤维化形成过程中,肺巨噬细胞增殖能力先增强后减弱;而肺巨噬细胞凋亡始终增加,上述变化是导致肺巨噬细胞数量和功能变化的因素之一。

黄芩苷对博莱霉素诱导的肺纤维化的影响

目的:观察黄芩苷(Bai)对博莱霉素(BLM)诱导的肺纤维化的影响,并探讨了可能的机制。方法:68只雄性SD大鼠,随机分为以下4组:BLM+Bai组、BLM+生理盐水(NS)组、NS+Bai组和NS+NS组。气管内一次性滴注BLM(5 mg.kg-1bw)或等体积NS的当天腹腔注射Bai(12.5 mg.kg-1.d-1,×28 d)或等体积NS。检测肺羟脯氨酸含量、肺胶原纤维阳性面积、肺Ⅰ型前胶原[ColⅠ(α)]mRNA表达、肺间质肌成纤维细胞数量。结果:与对照大鼠相比,气管内滴注BLM后第28 d,大鼠的肺组织羟脯氨酸含量增高;肺间质胶原纤维阳性面积增大;肺内ColⅠ(α)mRNA含量增高;肺间质肌成纤维细胞数量增多(均P<0.01)。上述指标的异常变化均在腹腔注射Bai后有所改善(均P<0.05)。结论:Bai有阻止BLM诱导肺纤维化的作用;Bai的上述作用与其阻止肺内Ⅰ型胶原异常合成和阻止肺间质肌成纤维细胞数量增多有关。

山茛菪硷及川芎嗪对肺水肿大鼠的生存率、肺指数及形态学观察

静脉注射肾上腺素可造成大鼠剧烈的致死性肺水肿,动物于5分钟内全部死亡,类似于临床上中枢性肺水肿,属混合性肺水肿。用中药山茛菪硷及川芎嗪进行预防,效果十分明显。以正常组、肺水肿组、山茛菪组、川芎嗪组为序,存活率为100%、0%、96%、80%。生存时间为30分、4分5秒±27秒、28分43秒±4分36秒、25分12秒±9分36秒。((?)+SD,生存时间计算,正常组30分钟处死,预防组30分钟不死者亦处死,均算30分钟。)肺指数为0.48±0.06、1.70±0.47、0.74±0.39、0.83±0.55。上述指标各组与肺水肿组相比,均P<0.01。病理镜检见肺水肿组肺组织的正常结构破坏,间质及肺泡充满大片水肿液,充血、出血,间质增宽、两预防组均接近正常组。结果表明两种药对大鼠肺水肿有明显预防作用。

缺氧诱导因子-1α在缺氧预处理预防心肌细胞损伤中的作用

本工作旨在研究缺氧预处理(hypoxic preconditioning, HPC)对于心肌细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulatedprotein kinases, ERK)活性、缺氧诱导因子 -1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)表达的影响,及其在缺氧复氧诱导心肌细胞损伤中的作用。通过在培养的SD 乳鼠心肌细胞缺氧/ 复氧(H/R)模型上, 观察HPC 对于24 h 后H/R 诱导心肌细胞损伤的影响, 以台盼蓝排斥实验检测心肌细胞存活率、以 TUNEL 法检测细胞凋亡、并用荧光素染料 Hoechst33258 测定心肌细胞凋亡率; 制备心肌细胞蛋白提取物,以磷酸化的 ERK1/2 抗体测定 ERK1/2 活性, 以抗HIF-1α 抗体检测 HIF-1α 的表达,并观察ERKs 的上游激酶(MEK1/2)抑制剂PD98059 对于HPC 诱导的ERKs 磷酸化、HIF-1α 表达以及心肌细胞保护作用的影响,并分析细胞损伤与 ERK1/2 活性、HIF-1α 表达量之间的相互关系。结果显示缺氧复氧造成心肌细胞损伤, HPC 可以增加心肌细胞 H/R 后存活率,降低凋亡率,并激活 ERK1/2,诱导 HIF-1α 表达;细胞凋亡与 ERKs 活性、HIF-1α 表达量之间存在负相关,即 ERKs 活化、HIF-1α 表达与预防细胞损伤有关;而 ERKs 活性与 HIF-1α 表达量之间存在正相关,ERKs 的上游激酶MEK抑制剂PD98059 可以消除HPC

温筋通对糖尿病大鼠心血管组织糖基化终产物的形成及其受体和ICAM-1表达的影响

目的 :研究中药复方温筋通 (WJT)对糖尿病大鼠心血管糖基化终产物 (AGEs)的形成以及AGEs受体(RAGE)和细胞间粘附因子 - 1(ICAM - 1)表达的影响。方法 :用链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型。采用荧光法、RT-PCR和原位杂交的方法对心血管组织AGEs的沉积以及RAGE和ICAM - 1的表达进行检测。结果 :WJT治疗组AGEs形成量明显低于糖尿病模型组 (P <0 0 1) ,其治疗作用与AG相当 ;RAGE和ICAM - 1主要在内皮细胞表达 ,其表达量与AGEs的沉积量呈明显正相关 (P <0 0 1)。结论 :WJT可明显降低糖尿病大鼠主动脉和心肌组织AGEs的形成量以及RAGE和ICAM - 1的表达。

山茛菪碱与川芎嗪预防肺水肿时大鼠血气及红细胞超氧化物歧化酶的变化

肾上腺素所致肺水肿类似中枢性肺水肿,具有动力性及非动力性双重机制。此时,动脉血中PaO_2、O_2Sat明显下降、PaCO_2明显上升,pH下降,红细胞超氧化物歧化酶含量下降,654-2与川芎嚓能防止上述异常变化,并使之趋于正常。实验显示了654-2及川芎嗪对肺水肿防止作用的部分机理。

硝普钠促肺成纤维细胞增殖和凋亡的作用(英文)

用MTT测定、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术等方法 ,观察了一氧化氮供体硝普钠 (sodiumnitroprusside,SNP)对体外培养的肺成纤维细胞增殖和凋亡以及Bcl 2、Bax和p5 3蛋白含量的影响。结果发现 :MTT吸光度、细胞数和增殖指数 (proliferationindex ,PI)均较对照增加 ;凋亡细胞数也增加 ,但尚不足以出现明显的“梯形”凋亡电泳条带 ;同时 ,细胞内Bcl 2蛋白下调和Bax蛋白上调 ;而细胞内p5 3蛋白含量无明显变化。结果表明 ,外源性NO有增强肺成纤维细胞增殖和凋亡的双重作用 ,但以促细胞增殖为主 ;此作用的分子机制与Bcl 2蛋白下调和Bax蛋白上调有关。

吸入一氧化氮治疗胎粪吸入综合征的实验研究

目的 建立新生猪胎粪吸入综合征 (MAS)动物模型 ;评价吸入一氧化氮 (NO)的疗效及对机体的其他影响。方法 日龄 7d以内健康新生猪在机械通气条件下 ,吸入 2 0 %胎粪盐水 (MNS)4～ 6ml kg制成重症MAS模型。观察NO治疗前后血气、循环指标、高铁血红蛋白 (MHb)、肺组织匀浆丙二醛 (MDA)含量的变化及肺组织病理改变。结果 新生猪吸入胎粪后出现重症MAS的临床表现 :低氧血症 [动脉血氧分压 (PaO2 ) <6 0mmHg],动脉与肺泡氧分压之比 (a APO2 ) <0 .2 ]、酸中毒 (pH值<7.3)、肺动脉压升高 (≥ 2 5mmHg)。吸入 2 0× 10 - 6 或 40× 10 - 6 NO均可迅速纠正低氧血症、降低肺动脉压 [PaO2 分别由 (5 0± 7)、(4 6± 6 )mmHg上升至 (115± 34)、(85± 2 3)mmHg (P <0 .0 1) ;PAP分别由 (32± 6 )、(2 4± 3)mmHg下降至 (2 1± 3)、(17± 4)mmHg]。吸入不同浓度的NO两组间疗效差异无显著性 ,体循环稳定。短期 (2h)吸入NO治疗不会引起高铁血红蛋白血症、肺组织氧自由基升高等毒副作用 ;不能抑制肺组织炎症损伤。结论 短期 (≤ 2h)、低浓度 (≤ 40× 10 - 6 )吸入NO治疗MAS迅速、安全、有效。治疗重症MAS宜采用包括吸入NO在内的综合治疗措施。

常压缺氧对大鼠肺组织β和α_1肾上腺能受体数目的影响

本文观察常压缺氧性肺动脉高压对大鼠肺组织β和α_1受体的影响。动物分为对照组、缺氧1天和1、2、4周共5组,以观察不同缺氧时间大鼠肺β和α_1受体的动态变化规律。结果表明缺氧1天组大鼠肺β受体从对照组的299.7±23.4((?)±SD,下同)减少到234.4±73.9fmol/mg蛋白(P<0.05);缺氧1周时增至332.2±21.7(P<0.05);缺氧2、4周再次减少,分别为263.7±39.0,247.4±34.8(均P<0.05),β受体表现为减少、增加、再减少这样一种动态的变化。缺氧时α_1受体的变化与β受体不同。缺氧1天时α_1受体从对照组161.0±49.8增至277.2±24.2fmol/mg蛋白(P<0.01),缺氧1、2周分别为185.0±24.5,167.1±23.6,略高于正常对照组。缺氧4周时明显增加,为246.2±41.4(P<0.01)。α_1受体在缺氧时似乎都倾向于增加的趋势。无论是肺β还是α_1受体,缺氧前后亲和力(Kd)均无明显变化。β受体兴奋使肺血管舒张,α_1受体兴奋使肺血管收缩。缺氧时β受体的减少和α_1受体的增加都能促进肺血管的收缩,故这一变化在缺氧性肺动脉高压的发生、发展中可能具有一定的作用。

实验性糖尿病大鼠体内LPO水平、SOD和GSH-Px活性的变化

实验性糖尿病大鼠体内ＬＰＯ水平、ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性的变化段有金王晓颖董瑶由胜志冯兰飞王灏关于糖尿病的发病与氧自由基的关系，许多人已经证实：四氧嘧啶对胰岛细胞伤害可能与Ｈ２Ｏ２、超氧阴离子及羟自由基升高有密切关系［１，２］；四氧嘧啶使胰岛的活性氧...

内源性和外源性一氧化氮对正常和滴注博莱霉素大鼠肺泡巨噬细胞生存的调节(英文)

分别用一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和前体L-精氨酸(L-arginin,L-Arg)孵育来自正 常大鼠(alveolar macrophages from normal rats,normal AMs)和滴注博莱霉素大鼠的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages from BLM-treated rats,BLM AMs),以探讨NO对不同状态细胞生存的调节。用凋亡和细胞周期评价细胞生存,细胞内Bcl-2 和Bax蛋白含量探讨其分子机制。结果如下:(1)BLM AMs的凋亡多于normal AMs;G0／G1期BLM AMs数少于normal AMs:S+G2M期BLM AMs数与相应的normal AMs数间的差异无统计学意义;(2)与normal AMs相比,BLM AMs内 Bcl-2下凋,Bax上调;(3)与相应的对照比,SNP和L-Arg能诱导normal AMs和BLM AMs凋亡;L-Arg仅能增加S+G2M 期BLM AMs数:(4)SNP和L-Arg诱导normal AMs内Bcl-2下调和Bax上调,但不能使BLM AMs内的Bcl-2和Bax发生 上述变化:(5)L-Arg下调BLM AMs内的Bax。上述结果显示:NO能诱导BLM AMs和normal AMs凋亡;Bcl-2和Bax 与NO诱导的normal AMs凋亡有关,而与NO诱导的BLM AMs的凋亡无关,提示NO诱导normal AMs和BLM AMs分 子机制不同;内源性NO促进BLM AMs增殖,这可能与其下调Bax有关。

罗格列酮对肺纤维化大鼠肺动脉壁结缔组织生长因子表达的影响

目的:观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(RSG)对肺纤维化大鼠肺动脉壁结缔组织生长因子(CTGF)上调、Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积的影响。方法:48只雄性SD大鼠,随机分为以下4组:博莱霉素(BLM)+生理盐水(NS)组(n=21)、BLM+RSG组(n=9)、NS+NS组(n=9)和NS+RSG组(n=9)。气管内一次性滴注BLM(5mg/kgbw),RSG灌胃(3mg/(kg.d),14d)。整体实验,气管滴注后第14天观察;离体实验,气管滴注BLM后第14天,分离大鼠的肺动脉,并用RSG培养液和单纯培养液孵育(37℃,5%CO2,24h)。结果:在整体水平,与对照大鼠相比,BLM模型大鼠肺动脉壁的CTGF免疫阳性表达增强,CTGF蛋白含量、Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值均增高(均P<0.05);RSG能阻止上述指标的异常变化(均P<0.05);在离体水平,RSG能阻止BLM模型大鼠肺动脉壁CTGF的上调(P<0.05),但对Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积无明显影响(P>0.05)。结论:RSG能直接作用于肺动脉壁,阻止肺纤维化大鼠肺动脉壁CTGF的上调,这可能是其减轻动脉壁结构重塑的机制之一。