新疆卡拉库尔羊TNF-α原核表达及多克隆抗体的制备

【目的】克隆卡拉库尔羊TNF-α基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对TNF-α蛋白的抗原性进行分析。【方法】采用PCR技术扩增TNF-α基因核酸片段,并克隆入pET-28b表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)株中表达。用电洗脱法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。【结果】重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量约为49 KD的融合重组蛋白,原核表达质粒pET-28b-TNF-α表达的目的融合蛋白是以可溶的形式存在。用纯化的pET-28b-TNF-α免疫家兔,在免疫后的第45 d,Western-blotting和琼脂糖扩散试验分析表明,表达的pET-28b-TNF-α能被家兔的阳性血清所识别。【结论】表达蛋白pET-28b-TNF-α具有较好的反应原性和免疫原性。

新疆沙冬青抗冻蛋白基因保守区序列的克隆及其分析

【目的】从Genbank数据库中选择与新疆沙冬青(Ammopiptanthus nanus)亲缘关系最近的同属蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)抗冻蛋白(AFP)基因AY590122、AY843521、AY843522的mRNA序列,设计扩增新疆沙冬青AFP基因保守区引物。【方法】以新疆沙冬青为研究材料,提取其总RNA,利用RT-PCR技术克隆出新疆沙冬青AFP基因的保守区域。【结果】序列分析表明,新疆沙冬青与蒙古沙冬青的保守区域同源性达98.15%。【结论】得到新疆沙冬青的抗冻蛋白的保守区域。

结缕草种子发育过程中生理生化变化的研究

本研究旨在探明结缕草种子发育过程中生理生化变化,为种子生产提供科学的理论依据,在山东胶州,结缕草盛花期后每隔3-5 d取1次种子样品,对其发育过程中的生理生化变化进行研究。结果表明,结缕草种子发育过程中含水量是先升高,而后逐步降低,而种子干、鲜重则逐渐增加,最后略有降低。可溶性糖含量变化总趋势是降低（5.0%）,而淀粉含量先升后降,再逐渐增加,最后保持在15.0%左右,种子酸性磷酸酯酶活性逐渐增强,且不同成熟度间的活性差异极显著（P〈0.01）。种子生长素（IAA）和赤霉素（GA）含量逐渐减少,而脱落酸含量是逐步增加,最后达72.7μg/100 g鲜重。综合考虑,结缕草适宜的收获期应在盛花期后36 d左右,即6月15日左右,此时种子活力强,含水量为26%28%,千粒重为0.89 g。

奶牛乳房炎性乳房链球菌GapC重组蛋白的免疫保护性研究

为研究奶牛乳房炎性乳房链球菌GapC蛋白的免疫保护性,本研究采用纯化后的GapC重组蛋白与免疫佐剂乳化后制备疫苗,免疫家兔后采用间接ELISA法检测抗体效价,并以小鼠为实验动物进行攻毒试验。结果显示,抗体效价高达1∶128 000,GapC蛋白免疫组对乳房链球菌的保护率较高,达70%,而全菌体免疫组的保护率仅为30%,表明GapC蛋白具有很高的免疫原性,为奶牛乳房炎的预防控制和进一步研究有效疫苗提供实验依据。

不同浓度十二烷基硫酸钠对紫花苜蓿干燥速度和营养品质的影响

对刈割后初花期紫花苜蓿(Medicago sativa),分别喷洒不同浓度十二烷基硫酸钠(CK:0%、D1:0.5%、D2:1%、D3:1.5%、D4:2%、D5:2.5%、D6:3%),测定其水分含量变化和干燥后粗蛋白(CP),中性洗涤纤维(NDF),酸性洗涤纤维(ADF)及能量(GE)含量的变化。结果表明:喷洒不同浓度的十二烷基硫酸钠可以不同程度的提高紫花苜蓿的干燥速度,并改善其干草营养品质。除D5外,其余各处理组间紫花苜蓿的CP含量差异不显著(p>0.05),其中D5(2.5%)处理组CP含量最高(20.42%);D4(2%)NDF含量(33.77%)显著低于其他各处理组(p<0.05);除D3外,其他各处理组ADF含量显著低于CK(p<0.05);CK组GE含量极显著低于其余各处理(p<0.01),其中D6(3%)GE含量最高(17 671.00 J/g)。综合考虑,7个处理组中以D4(2%)处理组的干燥效果最好,能有效的改善紫花苜蓿干草品质。