多浪羊POMC基因克隆及其在初情期不同组织中的表达研究

【目的】研究POMC基因在绵羊初情期时不同组织的表达水平及规律。【方法】对多浪羊进行初情期发情鉴定,采集初情期下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫、脾、肺、肾和大脑9种组织,提取其组织RNA,对POMC基因进行cDNA克隆和组织表达分析;对多浪羊POMC氨基酸与其他物种POMC氨基酸序列进行比较,制作系统发育树;应用qPCR技术检测POMC基因在下丘脑、垂体、卵巢、输卵管和子宫5种组织中的表达水平。【结果】获得多浪羊POMC基因两条cDNA序列,长度分别为1 078、1 108 bp,两条cDNA序列编码区(CDS)相同,均为792 bp,编码263个氨基酸。同源性比对分析得出多浪羊POMC氨基酸序列与绵羊、牛、山羊的同源性分别为99.62%、96.6%、96.3%,与猪、马、人的同源性分别为89.51%、83.08%、79.78%。qPCR和组织表达谱分析结果表明POMC基因在9种组织均有表达,其中在垂体和下丘脑中表达量比较高,显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】试验结果对于进一步探索POMC基因与绵羊初情期之间的关系提供了理论依据。