AI-2,一种新的细菌自体诱导分子

细菌通过数量阈值感应系统调节群体内个体的基因表达而使整个群体步调一致。细菌通过感应自体诱导分子(autoinducer, AI)浓度而感知周围环境中同类存在的密度,并据此调节自身特定性状的表达。AI-2是近年来新发现的一种介导细菌种间信号传导的自体诱导分子,其分子结构、功能均不同于传统的AI分子。AI-2对细菌的调节作用主要表现为对毒力基因表达的影响,但目前也有人认为AI-2可能只是一种代谢产物。

PCR检测与细菌培养方法在细菌性痢疾监测中的应用比较

目的通过与PCR检测比较,确定细菌培养方法对细菌性痢疾疾病负担的低估程度。方法从2002年细菌性痢疾监测研究获得的10105份腹泻标本中随机选取337份,采用针对ipa H基因的PCR方法检测其志贺菌感染,并同传统细菌培养方法进行比较。结果337份腹泻标本中检测到ipa H基因212份,检出率为62.9%;而粪便培养阳性为39份,检出率为11.6%(P<0.001)。Logistic回归分析显示影响PCR检出的因素依次为细菌培养结果(OR=15.5;95%CI:2.0-119.0),具有发热症状(OR=2.8;95%CI:1.2-6.2),菌痢流行季节的腹泻(OR=2.4;95%CI:1.4-4.3)及女性病例(OR=1.8;95%CI:1.1-3.0)。结论与PCR检测相比,传统细菌培养方法使得菌痢的发病率在相当大的程度上被低估。

慢性阻塞性肺病外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达与血清TNF-α、IL-6、IL-8相关性的研究

目的:探讨慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者外周血单个核细胞表面Toll样受体(Toll-like receptors)TLR2和TLR4的表达情况及其与血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的关系。方法:本研究涉及的3组研究对象分别为:吸烟COPD组(n=68)、吸烟非COPD组(n=42)和不吸烟非COPD组(n=43)。将68例吸烟COPD患者进一步分为急性发作期亚组(n=32)和稳定期亚组(n=36)。采用实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清细胞因子的浓度。结果:吸烟COPD组外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平及血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度均显著高于吸烟非COPD组(TLR2:1.87±2.04比0.47±0.24;TLR4:4.08±3.84比0.41±0.18;TNF-α:68.20±56.26比26.20±5.43;IL-6:201.62±174.69比72.99±8.03;IL-8:235.42±158.22比77.50±8.38)。吸烟非COPD组外周血单个核细胞上TLR2、TLR4的表达水平均显著低于不吸烟非COPD组(TLR2:0.47±0.24比2.96±2.71;TLR4:0.41±0.18比2.67±1.74),而吸烟非COPD组血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度均显著高于不吸烟非COPD组(TNF-α:26.60±5.43比8.93±6.41;IL-6:72.99±8.03比25.61±8.63;IL-8:77.50±8.38比47.10±11.11)。COPD急性发作期单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平及血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度均显著高于COPD稳定期(TLR2:3.56±1.80比0.368±0.222;TLR4:6.97±3.76比1.51±0.943;TNF-α:106.17±61.94比90.01±19.66;IL-6:327.18±183.56比105.36±13.45;IL-8:381.74±108.51比34.44±10.45)。吸烟COPD组外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平与血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度成正相关。结论:COPD患者尤其是COPD急性发作期患者外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平及血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度均显著升高;并且COPD患者外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4的表达水平与血清TNF-α、IL-6、IL-8的浓度成正相关。提示COPD的发生、发展与机体天然免疫密切相关。

河北省正定县农村地区细菌性痢疾发病率分析

目的了解河北省正定县农村地区细菌性痢疾的疾病负担。方法于2002年对河北农村地区进行了以人群和医疗机构为基础的细菌性痢疾发病率监测。对同意参与研究的腹泻病例采集大便标本,分离、鉴定志贺菌并确诊菌痢病例。计算年龄别菌痢发病率。并对确诊菌痢病例进行90 d随访,监测菌痢相关的后遗症。结果全年共调查10105例腹泻病例,人群腹泻率为133/千人年。其中,0岁组腹泻率最高为1 388/千人年;其次为5岁以下儿童,发病率为618/千人年。共确诊菌痢331例。3岁组儿童发病率最高,为32/千人年,其次为60岁以上老年人,为7/千人年。发热及脓血便为菌痢的重要临床特征。未发现与菌痢相关的后遗症与死亡。菌痢的发病率与月平均气温及月平均降雨量密切相关。结论细菌性痢疾在正定县农村地区所导致的疾病负担巨大,远远高于传染病报告的发病率。应考虑针对5岁以下儿童及60岁以上老年人实施疫苗免疫,以控制该地区志贺菌感染与流行。

儿童患者分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的分子特征及毒力因子研究

目的了解儿童患者分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）临床分离株的分子特征。毒力因子和药物敏感性。方法收集2008年1月至12月上海市3家儿童医院98株MRSA和49株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）临床分离株，PCR法检测杀白细胞素（PVL）基因阳性菌株，多重PCR法对MRSA菌株进行葡萄球菌7ytec盒式染色体（SCCmec）分型，多位点基因序列类型（MLST）测定MRSA菌株的序列类型（ST），eBURST软件分析各型在菌株克隆复合体（CC）内的相关性，琼脂稀释法测定MRSA和MSSA对临床常用抗菌药物的敏感性。结果98株MRSA临床分离株中有6株PVL基因阳性，阳性率为6．1％；49株MSSA临床分离株中有2株PVL基因阳性，阳性率为4．1％。98株MRSA临床分离株中，SCCmecⅡ型4株，占4．1％；SCCmecⅢ型23株，占23．5％；SCCmecIV型52株，占53．0％；SCCmecV型15株，占15．3％；4株未能分型，占4．1％。MLST分析表明SCCmec已分型的94株中，4株SCCrnecⅡ型为ST5；23株SCCmecⅢ型为ST239；52株SCCmecIV型中30株为ST59，ST5和STl各8株，ST8和ST88各2株，ST22和ST910各1株；15株SCCmecV型中6株为ST239，5株ST88，3株ST59，1株ST45。eBURST软件分析结果显示，ST8、ST239属于ST8CC，ST1属于ST15CC，ST910属于ST30CC，ST59、ST5、ST88、ST45、ST22、ST9、ST7均为各自CC的起源型别。SCCmecⅣ、V型MRSA较SCCmecⅡ、Ⅲ型MRSA对多种非8内酰胺类抗菌药物更为敏感，未发现万古霉素耐药株。结论儿童患者分离的MRSA临床分离株的PVL基因阳性率相对较低，SCCmecIV型、V型可在院内传播，形成小范围内的流行，其基因表型存在多种ST分型。

丙型肝炎病毒1b亚型E2区序列与干扰素治疗应答的关系

目的探讨上海地区丙型肝炎病毒(HCV)1b亚型感染者E2区的高变区1(HVR1)和高变区2(HVR2)、双链RNA激活的蛋白激酶真核翻译启动因子磷酸化同源区域(PePHD)及其邻近区域的基因序列与干扰素应答的相关性。方法收集上海地区24例HCV1b慢性感染者在α干扰素治疗前后及随访过程中的血清标本,用逆转录聚合酶链反应扩增E2区的HVR1、HVR2、PePHD及其邻近区域的基因并进行测序和氨基酸同源性分析。结果治疗前的HVR1区氨基酸序列高度变异,基于HVR1序列的种系发生树提示序列变化与干扰素应答类型无关。持续应答组(SR)、无应答组(NR)和复发组(TR)治疗前的HVR2区平均氨基酸变异数分别为2.0、1.0和1.5,统计学分析显示SR组与NR组差异有显著性(t=3.098,P<0.05)。治疗前的PePHD序列高度保守,无1例存在氨基酸变异。观察4例NR患者治疗过程中的PePHD序列,也未发现有任何氨基酸的突变。进一步比较PePHD邻近区域的氨基酸序列发现存在个别位点的变异(平均氨基酸变异SR组6.67,NR组5.75,TR组7.43),但变异的多少与疗效无关(SR组∶NR组t=1.413,P=0.195;SR组∶TR组t=1.706,P=1.107;TR组∶NR组t=0.682,P=0.504)。结论与HCVE2基因的HVR1区、PePHD区及其邻近区域序列与患者对干扰素的应答无相关性比较。

人免疫缺陷病毒给抗结核疫苗带来了新问题

在已感染人免疫缺陷病毒（HIV）的儿童中使用抗结核疫苗可能导致致死性感染，这使公共卫生机构感到十分棘手。

锑矿工结核病传播及危险因素调查

目的了解锑矿工肺结核感染率及感染的危险因素。方法采用整群抽样方法,对263例锑矿工肺结核患者进行结核分枝杆菌的菌株鉴定和药敏试验。基因分型采用12位点结核分枝杆菌散在分布重复单元和多位点串联重复序列;采用2检验评估结核传播的危险因素。结果锑矿工肺结核的感染率为9.8%(472/4 831);纳入研究的263例患者中,175例成簇,成簇率为66.5%,近期传播率最低估计值为53.2%。治疗失败、工龄大于10年、菌株多重耐药及痰涂片阳性的锑矿工肺结核传播率较高。结论锑矿工结核分枝杆菌具有成簇性,其菌株毒力更强、传播率高,治疗效果、矿龄、菌株耐药性及痰涂片结果是影响肺结核传播的重要危险因素。

2007年Keystone结核病国际研讨会简介

两年一次的Keystone结核病国际研讨会（www．keystonesymposia．org）以其主题明确，方向集中，规模不大，科学家们有机会直接交流为特色而闻名，成为高水平的生物医学专题研讨会。结核病研究的研讨会每两年举行一次，2007年的会议于3月20～25日在加拿大著名的旅游胜地温哥华召开，吸引了来自全球近50个国家的600多名代表参加。这次研讨会由德国科学家Stefan Kaufmann等3位教授组织，具有重视基础研究与临床应用相结合等结核病控制中关键问题的特点，共有56位代表作大会主题发言，370多篇壁报在会上交流。代表们的工作涉及了目前结核病基础与临床的研究热点，特别是新药和疫苗开发的内容。

耐受性疫苗预防哮喘小鼠变应性炎症反应的研究

目的：探讨免疫耐受疫苗技术是否可以通过调节T细胞抑制炎性T细胞引起的过敏性哮喘的发生。方法 BALB／c小鼠随机分成5组，每组10只。各组用不同的策略免疫小鼠，具体为：第1组小鼠注射100μl磷酸盐缓冲液（ PBS）为阴性对照组；第2组小鼠注射10μg卵白蛋白；第3组小鼠注射10μg地塞米松；第4组小鼠将10μg卵白蛋白与10μg地塞米松共同注射；第5组小鼠将100μg卵白蛋白与100μg地塞米松共同注射。各组均于第1天、4天、7天和14天通过背部皮下注射的方式进行免疫小鼠。在最后一次免疫后7 d，对各组小鼠同时诱导过敏性哮喘，24 h后，评价各组小鼠的哮喘发病情况，评价指标包括：肺部病理变化、支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的浸润、血清抗体的产生、过敏反应试验等。以此评价免疫耐受疫苗对小鼠哮喘发病的影响。结果免疫耐受性疫苗免疫的小鼠肺组织炎症细胞浸润、血清中IgE和IgG1抗体水平、肺组织CD4^＋T细胞的浸润程度等都有了显著降低，而CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋的调节性T 细胞所占CD4^＋T细胞中的比例明显增高。同时，耐受性疫苗能够抑制Th2型细胞因子的表达。结论耐受性疫苗免疫能够诱导调节性T细胞产生并影响炎性T细胞及其淋巴细胞因子的表达，从而抑制小鼠哮喘的发生。

用显微镜观察药物敏感性方法快速检测结核分枝杆菌耐药性

背景和目的：结核病的早期快速诊断是阻断结核病传播，尤其是耐药结核病传播的关键。显微镜观察药物敏感性（microscopic-observation drug—susceptibility，MODS）方法是一种通过痰液标本的液体培养，在镜下检测细菌生长特性的方法。MODS的主要步骤如下：痰标本用乙酰半胱氨酸-氢氧化钠溶液处理后，用24孔细胞培养板进行液体培养。