人载脂蛋白H的分离、纯化和鉴定

目的探索一种相对简便而高效的方法,从人血浆中分离、纯化载脂蛋白H。方法用高氯酸预处理血浆,以离子交换色谱和亲和色谱相结合的方法进行蛋白质的分离和纯化。用SDS-聚丙烯凝胶电泳和Western blot对纯化产品进行鉴定。用BCA蛋白质定量测定试剂盒测定获得载脂蛋白H的量。结果连续分离、纯化3次,每次获得的产品纯度均大于98%,且经Western blot分析均能与抗β2-GlycoproteinⅠ单克隆抗体呈阳性反应。3次纯化共获得apoH12.56 mg,平均21 mg/L。结论本方法重复性好、可靠性高,较传统方法更为简便和经济。