雌激素和姜黄素对海人酸杏仁核点燃大鼠行为学、脑电图及海马神经元损伤的影响

目的了解雌激素和姜黄素对海人酸(kainic acid,KA)杏仁核点燃大鼠癫痫发作的影响。方法给去势的雌性大鼠添加雌激素治疗,添加姜黄素治疗,或添加雌激素和姜黄素治疗,比较各组大鼠致痫后癫痫发作的行为学、脑电图和海马神经元损伤的变化。结果给雌激素治疗的大鼠重型发作(Racine 4/5级)评分最高,而雌激素加姜黄素治疗组评分最低(P<0.05)。脑电图的变化与行为学的改变基本一致。致痫后大鼠注射KA侧海马CA3区、CA4区可见到明显的细胞损伤,而该侧海马CA1区、齿状回区(DG)及对侧海马CA3区、CA1区及DG区神经元损害不明显。雌激素组大鼠双侧海马CA3区均出现加重的神经元损害,姜黄素组及雌激素加姜黄素组大鼠海马注射对侧CA3区存活神经元较雌激素组明显增加(P<0.01)。结论高水平的雌激素可以加重癫痫的发作,给姜黄素治疗可以减轻大鼠海马CA3区神经元损害。

雌激素和克罗米酚对致痫大鼠行为学、脑电图和海马神经元损伤的影响

目的:了解雌激素和克罗米酚对海人酸(kainicacid,KA)致痫大鼠癫痫发作的影响。方法:给去势的雌性大鼠添加雌激素治疗,或添加雌激素和克罗米酚治疗,比较各组大鼠致痫后癫痫发作的行为学、脑电图和海马神经元损伤的变化。结果:给雌激素治疗的大鼠癫痫发作的潜伏期和到达4级或5级(4/5级)的时间均较KA组明显缩短.而同时给雌激素和克罗米酚治疗组的潜伏期比单纯给雌激素治疗组明显延长。脑电图的变化与行为学的改变基本一致。致痫后的大鼠海马均可见到明显的细胞损伤,与癫痫发作严重程度和时间相一致。结论:高水平的雌激素可促进癫痫发作,给克罗米酚治疗具有一定的抗癫痫作用。

典型多系统萎缩的诊断和治疗:附病例报告

多系统萎缩(MSA)是少见的散发性、进行性神经系统退行性疾病,临床主要表现为帕金森综合征、锥体束损害、小脑共济失调、自主神经系统功能障碍等不同症状的组合。MSA的早期影像学改变不明显,容易被误诊、漏诊。本文报道了本院2013-04-25和2013-07-27分别收治的2例MSA患者,分别以帕金森综合征和小脑共济失调为主要表现,对症支持治疗后均好转出院。

糖尿病加重大鼠脑缺血再灌注损伤的研究

目的:建立稳定的慢性实验性糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤模型,明确糖尿病与正常大鼠脑缺血损伤的异同之处。方法:以链脲佐菌素诱导产生实验性糖尿病大鼠,饲养40d左右,经测定血糖(大于13.5mmol/L)确定糖尿病模型的建立。以线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,测定脑血流和梗死体积、进行神经功能评分,行苏木精-伊红染色和Luxol坚牢蓝-甲苯紫染色,观察超微结构的变化,用胶质纤维酸性蛋白标记来观察星形胶质细胞的激活情况。结果:糖尿病大鼠比正常大鼠再灌注时,脑血流恢复差犤再灌注23h时,缺血中心区血流分别为(40.3±7.5)%和(48.2±5.5)%,半暗区血流分别为(55.0±5.5)%和(64.5±5.8)%,t分别为2.40,3.25,P<0.05犦,神经功能评分高(分别为2.85±1.23和1.23±0.44,t=4.51,P<0.01),梗死体积大犤分别占各自对侧体积的(28.3±8.10)%和(14.8±7.8)%,t=3.39,P<0.01犦,光镜和电镜观察显示脑组织缺血损害和髓鞘脱失时程提早且更为严重,早期胶质细胞激活差。结论:从组织形态学等方面证实本模型的可靠性和可重复性,揭示实验性糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤重于正常大鼠。

葡萄球菌蛋白A免疫吸附治疗全身型重症肌无力的临床研究

目的研究葡萄球菌蛋白A免疫吸附治疗全身型重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的疗效和安全性。方法采用蛋白A免疫吸附治疗19例成人全身型MG并进行临床疗效和安全性的判定。结果所有入选病人均完成2次免疫吸附治疗;第2次治疗后的IgG、IgA、IgM浓度明显下降(P<0.0001);Osserman分级、改良美国MG基金会(MGFA)评分、MG日常生活量表(ADL)和徒手肌力量表(MMT)均明显改善(P<0.0001)。MG特异性乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性的患者2次治疗后抗体滴度明显下降;治疗后外周血调节性T细胞百分比明显上升。部分病人有轻度不良反应,但总体耐受性良好,各项安全性临床评定指标在治疗前后的变化均无统计学意义。结论葡萄球菌蛋白A免疫吸附可以迅速改善全身型MG病人的病情。

不同大鼠胶质瘤抗原致敏的DC体外诱导CTL活性的研究

目的 :比较大鼠骨髓来源的树突状细胞 (dendriticcells,DC)体外经由大鼠C6胶质瘤细胞由不同方式制备的不同抗原致敏后 ,对特异性细胞毒性T淋巴细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)的诱导作用。方法 :自大鼠骨髓分离DC前体细胞 ,经重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rrGM -CSF) +白细胞介素 4 (rrIL - 4 )诱导培养、扩增 ;由C6胶质瘤细胞经由反复冻融、煮沸灭活及超声破碎细胞抽提其总蛋白的方法制备各种不同抗原致敏DC ,致敏的DC与T淋巴细胞进行共培养诱导CTL ;以ELISA法检测CTL诱导过程中淋巴细胞趋化因子 (lymphocytechemoattractantfactor)及细胞因子IFN -γ分泌水平 :以 [3 H]-TdR掺入法检测DC诱导T细胞增殖及其特异性CTL杀伤活性。结果 :体外应用煮沸灭活瘤细胞制备的肿瘤抗原致敏DC ,能诱导更强的刺激T细胞增殖的能力、并且可以诱导杀伤活性更强的CTL。结论 :应用煮沸灭活的瘤细胞制备瘤抗原负载DC获得瘤苗可获得更强的抗肿瘤保护作用。

PTD-Calbindin D28K融合蛋白的表达、纯化及其穿膜功能的鉴定

目的 构建融合蛋白PTD CalbindinD2 8K(CaBP2 8)的表达质粒 ,并进行诱导表达、纯化 ,在体外初步鉴定其跨膜转运功能。方法 提取大鼠脑组织总RNA ,反转录后用聚合酶链反应 (PCR)法扩增编码CaBP2 8的全长cD NA序列 ,重组入 pET 32a及含有PTD的pTransVector表达载体中 ,测序鉴定后转化大肠埃希菌BL2 1(DE3) ,构建重组体的表达菌株。IPTG诱导表达后 ,以NTA Ni亲和层析柱进行分离纯化 ,SDS PAGE以及Westernblot鉴定。纯化的CaBP2 8及PTD CaBP2 8用FITC标记 ,分别以一定的浓度孵育体外培养的cos7细胞 ,最后荧光显微镜下观察两者在细胞中的分布情况 ,并用流式细胞仪 (FCM)做定量分析。结果 成功地构建了含有及不含有PTD的CaBP2 8表达载体 ,插入片断 783bp ,表达产物相对分子质量分别约 30 0 0 0、5 0 0 0 0 ,经Weternblot鉴定 ,与抗CaBPD2 8K抗体均有特异性反应。孵育培养的cos7细胞后 ,CaBP2 8 FITC仅少量吸附于细胞膜表面 ,而PTD CaBP2 8 FITC则分布于胞质内 ;FCM定量分析发现 ,细胞荧光强度随着目的蛋白的孵育浓度或孵育时间增加而增加 ,并且孵育时间为 1h时荧光达到最强。结论 重组PTD CaBP2

p38蛋白激酶(p38 MAPK)在癫大鼠脑内的表达

目的观察p38蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)在癫大鼠脑内的表达情况。方法健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组(n=8)和癫组(n=8)。采用戊四氮腹腔注射建立癫模型,大鼠点燃后的惊厥行为按照Racine的标准进行观察评分,采用Western blot和免疫荧光法比较两组大鼠脑内p38MAPK的表达情况。结果癫组大鼠脑内p38MAPK在皮层和海马的表达均显著高于正常对照组(P<0.01)。结论 p38MAPK在癫大鼠脑内表达上调。

人神经生长因子对糖尿病多发性神经病大鼠坐骨神经calpainⅡ的作用

目的:观察人神经生长因子(hNGF)对早期糖尿病多发性神经病(DPN)大鼠坐骨神经中calpainⅡ表达的影响。方法:用链佐星(STZ)一次性腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型,在DPN4周(造模后4周)腹腔注射hNGF90U/(kg·d),共4周。用原位杂交和免疫组化方法观察坐骨神经calpainⅡmRNA和蛋白表达。结果:DPN8周大鼠坐骨神经calpainⅡmRNA和蛋白表达明显减少。用hNGF治疗的DPN大鼠calpainⅡmRNA和蛋白表达增加。结论:hNGF治疗能纠正早期DPN大鼠坐骨神经calpainⅡmRNA和蛋白表达异常。

中国神经内科专科医师培养制度的"上海模式"

在住院医师规范化培训(住培)后优选人员进行专科医师规范化培训(专培)是培养高级专科人才的重要手段,符合目前临床医学工作对人才的需求。1993年,卫生部印发《关于实施临床住院医师规范化培训试行办法的通知》,此后各地逐步开展不同规模、不同水平的住院医师规范化培训的前期探索。上海市分别于2010年和2014年开启了神经内科住培制度和专培制度,经过多年的建设,形成了上海市神经内科医师毕业后继续教育的完整"培养链",成为上海市临床医师培养体系中的一大亮点。

规范的三级康复治疗对急性脑卒中偏瘫患者神经功能恢复的影响

目的 探索规范的三级康复治疗对于卒中偏瘫患者神经功能的影响。方法 脑卒中患者 5 2例在脑梗死和脑出血 2个层次上随机分成康复组和对照组 ,每组 2 6例 ,康复组给予规范的三级康复治疗 ,对照组不给予规范的三级康复治疗 ,一般的常规内科治疗两组相同。分别于入选时及发病后第 1、3、6个月月末采用临床神经功能缺损程度评分标准进行评测。结果 康复组在入选后各阶段的评分明显低于对照组 (均P <0 0 0 1) ,康复组入选后各阶段神经功能评分积分差值明显高于对照组(均P <0 0 0 1) ;入组时及治疗后 1、3、6个月时康复组患者的神经功能的积分分别相当于总分的5 1%、34%、18%和 8% ,而对照组分别为 5 8%、5 4 %、4 2 %和 37% ;入组时与治疗后 1、3、6个月月末的康复组神经功能积分差值相当于总分的百分数分别为 17%、33%和 4 3% ,而对照组则分别为 5 % ,16 %和 2 1%。

颅内嗅神经母细胞瘤(附10例报告)

目的 :研究颅内嗅神经母细胞瘤的临床。方法 :回顾性分析经手术病理证实的颅内嗅神经母细胞瘤 10例。结果 :本组患者平均年龄 3 5 5岁 ,平均病程 10个月 ,首发症状以鼻衄、鼻塞为主 ,头颅CT、MRI显示肿瘤大多位于前颅底 ,有骨质破坏及颅内外沟通。术后 8例随访 2个月～ 4年 ,存活 3例 ,死亡 5例。结论 :颅内嗅神经母细胞瘤极为罕见 ,多伴有鼻部症状 ,常发生于以嗅沟为中心的前颅底 ,一般预后差。手术全切除外加放疗、化疗有助于预后。

治疗帕金森病的不同药物对基底节多巴胺能系统的影响

目的:应用99mTc -TRODAT 1SPECT显像多巴胺转运体(DAT)和13 1I -epideprideSPECT显像多巴胺D2 受体,研究早期帕金森(PD)病人中用不同药物单一治疗14个月的随访情况。方法:72例早期(Hoehn&YahrⅠ～Ⅱ级)PD患者双盲、区组随机化方法分为4组,分别给予苯海索6mg·d-1(n =15 ) ;L 多巴制剂(美多巴2 5 0’,每天2 .5片) (n =2 2 ) ;L deprenyl(司来吉兰7.5mg·d-1) (n =2 2 ) ;多巴胺受体激动剂培高利特0 .5mg·d-1(n =13 )并随访14个月。分别在基线,随访7和14个月时,进行临床评分,同时以99mTc -TRODAT 1和13 1I -epidepride为配体,应用SPECT功能显像各组患者基底节区DAT和多巴胺D2 受体,比较不同治疗方案对基底节多巴胺能系统的影响情况。结果:99mTc -TRODAT 1SPECT显像结果显示,苯海索组和多巴制剂治疗组在治疗14个月后,基底节DAT均显著降低(P <0 .0 5 ) ,司来吉兰治疗组和多巴受体激动剂组在治疗7和14个月后,基底节区DAT虽有降低,但与基线比较无统计学意义(P >0 .0 5 )。随访14个月时,与对照组(苯海索组)比,仅受体激动剂组患者基底节区DAT值较高(P <0 .0 5 ) ,即减少程度最小。13 1I- epideprideSPECT显像结果显示,随访7和14个月时各组和基线比较均无显著差异,各组间亦无明显差异。结论:早期PD患者中。

Bcl-2蛋白家族及其诱导的神经元凋亡

癫发作可启动神经元凋亡通路,线粒体位于凋亡通路的核心位置。Bcl-2家族蛋白是其上游重要的调控因子,它们通过转录水平、磷酸化-去磷酸化修饰、二聚体形成或水解剪切等机制精确调控内、外源性凋亡途径,最终决定神经元的存亡。对Bcl-2家族蛋白成员以及调控机制的研究有助于寻找新的干预手段,减少癫所致的神经元损伤。

加巴喷丁对难治性癫痫的治疗作用

目的评价加巴喷丁在难治性癫痫治疗中的有效性和安全性。方法采用多中心随机双盲研究,用加巴喷丁添加治疗难治性癫痫,观察有效性和安全性。随机入组病例140例,进入疗效分析的为138例,治疗组66例,安慰剂组72例。结果服用加巴喷丁的病人每4周随访时的癫痫发作次数均减少,且在用药后第8、12、20周与对照组的差异有统计学意义。治疗有效率在用药后第12周、第20周与对照组的差异有统计学意义,且在全身强直阵挛发作者和部分性发作继发全身性发作者中更明显。安全性二组差异无统计学意义。结论加巴喷丁添加治疗难治性癫痫较安慰剂组能减少癫痫发作次数,提高治疗有效率,加巴喷丁是一个安全性较好的药物。

肌电图引导下A型肉毒毒素治疗痉挛性斜颈146例临床研究

目的:探讨肌电图引导下A型肉毒毒素局部肌肉注射治疗原发性痉挛性斜颈的疗效。方法:对146例痉挛性斜颈患者在肌电图引导下进行A型肉毒毒素局部肌肉注射,观察其治疗效果以及不良反应。结果:146例痉挛性斜颈患者,治疗后Tsui量表评分明显下降;重复治疗者复发症状减轻,治疗剂量下降,疗效仍良好。所有患者均未见严重不良反应。结论:肌电图引导下A型肉毒毒素局部肌肉注射是一种治疗痉挛性斜颈有效和安全的手段。

[^(11)C]-β-CFT脑多巴胺转运体PET显像在帕金森病诊断中的应用

目的:探讨[11C]-β-CFT多巴胺转运体(DAT)PET显像在帕金森病(PD)早期诊断及病情严重度评估的应用价值。方法:对早期PD组、晚期PD组和正常对照组进行[11C]-β-CFT基底节区DATPET显像,比较3组间基底节DAT摄取指数差异,分析PD组基底节区DAT摄取指数与UPDRS评分的相关性。结果:PD患者基底节区DAT摄取指数显著降低;其中单侧PD患者症状/同侧基底节区DAT摄取指数明显低于对照组。PD组基底节各亚区DAT摄取指数与UPDRS运动评分呈显著负相关。结论:[11C]-β-CFT基底节DATPET显像有助于PD的早期诊断及病情严重度的评估。

骨骼肌25 000蛋白分布于Ⅰ型肌纤维

目的:探讨骨骼肌25 000蛋白分布与肌纤维类型的关系。方法:分别对正常人及重症肌无力患者骨骼肌相邻的连续冰冻切片进行ATPase染色及25 000蛋白的免疫组化染色,阐明25 000蛋白在骨骼肌的分布及与骨骼肌纤维类型的关系。用免疫印迹方法观察以Ⅰ型纤维为主的比目鱼肌和以Ⅱ型纤维为主的肱三头肌中25 000蛋白表达的差异。结果:相邻冰冻切片ATPase染包和25 000蛋白免疫组化的结果表明,无论是正常人还是MG患者的骨骼肌,25 000蛋白均存在于胞质内,并主要分布在Ⅰ型纤维;在相同免疫染色条件下,该蛋白在MG骨骼肌的染色强度明显低于正常人。免疫印迹显示,在相同的骨骼肌总蛋白量中,比目鱼肌的25 000蛋白表达水平明显高于肱三头肌,进一步证实了25 000蛋白主要分布在Ⅰ型纤维。结论:25 000蛋白主要在骨骼肌Ⅰ型纤维中表达,MG患者骨骼肌的易疲劳和收缩无力可能与该蛋白在Ⅰ型纤维中低表达有关。

体位改变对压力反射敏感性的影响

目的:探讨帕金森病(PD)患者的压力反射敏感性(BRS)的受损及体位改变的影响。方法:对正常青年组13名,正常老年组11名,PD组16例,采用频谱分析的方法检测仰卧(supine)和头高位倾斜(HUT,+75°)时的心率变异性(HRV)和BRS值。结果:Supine在PD组BRS较青年组低(P<0.05);HUT后各组BRS均降低(P<0.05),且各组之间的差异显著,青年组、老年组、PD组依次降低(P<0.05)。结论:体位改变使BRS值降低;PD患者的心血管反射受损;BRS及体位改变测试是PD患者自主神经功能损害的敏感指标。

融合蛋白PTD-XIAP的原核表达、纯化及其血脑屏障穿透功能的初步鉴定

目的:原核表达、纯化PTD-XIAP融合蛋白,鉴定其血脑屏障的通透功能.方法:反转录大鼠脑组织RNA,用PCR法扩增编码XIAP蛋白BIR1-2、BIR3-RING及BIR-2的cDNA片断,重组入pTransVector表达质粒并转化大肠埃希菌BL21;以IPTG诱导表达,用NTA-Ni层析柱分离纯化,Western blot鉴定.PTD-BIR3-RING经腹腔注入小鼠体内,用免疫荧光法检测脑组织中的分布.结果:PTD-BIR3-RING得到表达,相对分子质量约30×103,与6×His单克隆抗体有特异性反应.注入小鼠体内后,脑组织中广泛分布有阳性细胞.结论:重组PTD-BIR3-RING具有良好的血脑屏障穿透功能.