基质细胞衍生因子-1在Wistar大鼠视网膜上的生理性表达

目的研究正常成体大鼠视网膜基质细胞衍生因子(SDF-1)的生理性表达情况。方法取正常Wistar成年大鼠视网膜进行抗SDF-1和抗PCK免疫组织化学染色,镜下观察结合半定量图像分析;实时定量RT-PCR测定视网膜神经上皮层SDF-1mRNA含量,与内参基因βactin比较。结果正常大鼠视网膜神经上皮可见SDF-1表达,其阳性结果多位于视网膜内层,视神经无明显染色。PCK在视网膜神经上皮上无明显表达。实时定量RT-PCR证实在健康成体大鼠视网膜神经上皮存在一定量的SDF-1mRNA。结论正常成年大鼠视网膜神经上皮层存在SDF-1的生理性表达,其生理作用及调控机制有待进一步研究。

实验性糖尿病对视网膜基质细胞衍生因子1表达的影响

目的探讨基质细胞衍生因子（SDF-1）在糖尿病动物模型视网膜上表达的情况。方法34只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为3组，对照组（CON，n=8），糖尿病病程2个月（DM2M，n=14）和3个月组（DM3M，n=12）。腹腔内一次性注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病动物模型。各组大鼠行视网膜抗SDF-1免疫组化染色，镜下观察结合半定量图像分析，测定单位视网膜面积积分吸光度（IOD／AOI）并进行组间比较，采用Wilcoxon—Mann—Whitney及t检验；利用免疫荧光组织染色双标法进行糖尿病视网膜SDF-1和缺氧诱导因子（HIF-1）共表达研究。荧光实时定量RT-PCR测定DM2M组（n=4）和CON组（n=2）视网膜神经上皮层SDF-1mRNA含量，β-actin校正后用t检验进行组间比较。结果各组大鼠视网膜免疫组化切片神经上皮均可见SDF-1表达，正常对照组和糖尿病组之间差异有统计学意义（z=-3．359，P〈0．001）。部分视网膜内层细胞可见SDF-1和HIF-1双表达。实时定量RT-PCR证实在糖尿病大鼠视网膜神经上皮SDF-1mRNA含量较对照组增加（t=2．33，P〈0．05）。结论实验性糖尿病可引起视网膜神经上皮层SDF-1的表达增加，其表达可能与转录因子HIF-1有关。

不同胎龄脊髓脊膜膨出胎鼠膀胱和脊髓神经损害的形态学观察

目的通过不同胚胎期脊髓脊膜膨出（MMC）胎鼠膀胱平滑肌的发育和神经支配情况及脊髓神经损害的形态学观察，了解这种损害的时间和空间上的变化及其相互关系。方法胎鼠分为MMC组和正常对照组，每组再根据胎龄各分3小组，共6小组。用免疫组织化学法检测各组腰骶段脊髓GFAP、VAChT的表达和膀胱”Actin和neurotubulin-β-Ⅲ的表达；另取各组腰骶段脊髓及膀胱切片作HE染色。Image-Pro Plus5．1软件分析免疫组织化学照片相关部分的光密度，SPSS16．0软件对数据进行进行统计分析，以P≤0．05为差异有统计学意义。结果在胚胎16d，2组胎鼠的膀胱肌层内就已经可以检测出neurotubulin-β-Ⅲ的表达；胚胎16、18和20d时，MMC组胎鼠膀胱内的neurotubulin-β-Ⅲ表达较相同胚胎期的正常对照组显著降低。在胚胎16、18、20d，2组的膀胱肌层内都能看到较多的旷Actin的阳性显色；且各胚胎期，2组膀胱内的mActin表达差异无统计学意义。在胚胎16d和18d，正常组和MMC组及胚胎20d正常组的脊髓内，GFAP染色均很少，没有明显的星形胶质细胞显示，在胚胎20d的MMC组胎鼠的脊髓背侧，可见大量的GFAP阳性的星形胶质细胞显影，其表达显著高于正常组。MMC组各个胚胎期脊髓VAChT的表达都较少，在胚胎20d组的背外侧核仅见少量阳性表达的神经元；而正常组VAChT的表达相对较多，在胚胎20d组的背外侧核可见较多阳性表达的神经元；2组间各胚胎期VAChT表达差异均有统计学意义。结论MMC胎鼠膀胱平滑肌的分化和发育与正常组差别无统计学意义。MMC胎鼠胚胎16d，膀胱肌层内可见神经支配，但神经纤维减少，与脊髓内骶副交感神经核和背外侧核的胆碱能神经元减少是同步。MMC胎鼠脊髓损伤后的神经修复过程，星形胶质细胞的出现要晚于胚胎18d。