复旦大学附属中山医院检验科服务满意度调查分析

检验科亦称医学实验室或临床实验室，是以为预防、诊断、治疗人体疾病或评估人体健康为目的，对来自人体的材料进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学、病理学或其他检验的实验室。《医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189：2007）》文件中指出医学实验室的服务是对患者医疗保健的基础。为了更好地服务于临床，检验部门应主动加强与临床科室间的沟通交流，更好地保障医疗安全和患者的生命安全。

用品管圈提高检验科门诊患者满意度

目的探讨用品管圈提高检验科门诊患者满意度。方法成立品管圈,通过调研了解检验科门诊患者满意度情况,分析不满意的原因,拟定和实施对策并判断改进效果。结果开展品管圈后,门诊患者满意度由72%提高到89.6%(P<0.01),圈员的质量管理能力提高。结论品管圈活动可用于提高检验科门诊患者满意度。

某新冠定点救治医院新型冠状病毒奥密克戎变异株环境污染调查

目的评估新型冠状病毒奥密克戎变异株对病区公共环境及医务人员个人防护用品的污染情况。方法对某新冠定点救治医院病区公共区域、脱卸区域和个人防护用品进行采样,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测新型冠状病毒核酸并报告Ct值,分析个人防护用品新型冠状病毒阳性相关因素。结果共采集病区公共区域环境标本100份,病区公共区域环境新型冠状病毒核酸检测总阳性率为30.00%,脱卸区电梯地面、走廊公共区域地面、脱卸电梯按钮新型冠状病毒核酸检测阳性率最高,分别为60.00%、60.00%、40.00%。一脱区和二脱区新型冠状病毒核酸检出率分别为18.33%、1.67%。48.33%的工作人员个人防护用品检出新型冠状病毒核酸,其中外层鞋套鞋底、外层手套和防护服检出率最高,分别为35.00%、21.67%、8.33%。单因素分析结果显示医生岗位和高风险操作医务人员个人防护用品新型冠状病毒核酸检测阳性率高(均P<0.05)。结论新型冠状病毒奥密克戎变异株对病区公共环境、一脱区和个人防护用品可造成不同程度污染,做好个人防护和定期环境清洁消毒,可以降低医务人员感染风险。

数字PCR技术及其在临床检验中的研究进展

数字聚合酶链反应(dPCR)技术是一种新的分子诊断技术,相比实时荧光定量PCR(qPCR),它有着更高的精度、灵敏度和特异度。dPCR目前在生物医学领域已经获得了广泛的应用,如病原体与拷贝数变异检测、miRNA与单细胞基因表达分析、下一代测序和染色体异常检测等。该文立足于临床检验应用,概述了dPCR技术的原理与分类,并将其与qPCR和下一代高通量测序(NGS)技术进行了比较分析,介绍了dPCR在临床检测中的技术发展及最新成果,探讨了其在临床实际应用中面临的挑战和发展前景。

某综合性医院肺外非结核分枝杆菌病微生物学及临床特征分析

目的探讨肺外非结核分枝杆菌病(extrapulmonary nontuberculous mycobacterial disease,ENTM)的微生物学和临床特征。方法回顾性查找2017年1月至2021年12月复旦大学附属中山医院微生物实验室检出ENTM标本,纳入确诊ENTM病例33例,分析人口学、微生物学、临床表现、治疗和预后特征。结果33例ENTM患者中,年龄(49±16.3)岁,23例(69.7%)为女性,1/3为免疫抑制宿主。感染类型以皮肤软组织感染、骨关节感染和播散性感染最常见(57.6%、18.2%和15.6%),51.5%(17/33)为医疗保健相关感染。病原以快速生长型非结核分枝杆菌(RGM)中的脓肿分枝杆菌复合群(42.4%)最常见。患者平均接受(3.5±0.8)种药物联合治疗,疗程6.3(4.3,9.6)个月。多数病例痊愈(69.7%)或临床好转(18.2%)。与RGM相比,缓慢生长型非结核分枝杆菌(SGM)感染者年龄更大[(60.2±15.0)岁vs(42.6±14.0)岁,P<0.05]且更多为社区获得性感染(83.3%vs 28.6%,P<0.05)。结论ENTM中最常见皮肤软组织感染,脓肿分枝杆菌复合群感染最多。SGM感染者年龄更大且更常见社区获得性感染。ENTM的治疗较为困难且缺少统一标准,需要更多研究。

基于二代测序技术的胰腺癌胚系变异携带情况及临床因素相关性分析

目的探讨胚系变异在胰腺癌患者中的携带率及其相关的临床因素。方法纳入271例胰腺癌患者,通过二代测序检测21个肿瘤易感基因的胚系变异,并分析胚系变异与发病年龄、家族史及个人史等临床因素的关系。结果在未经筛选的胰腺癌患者中P/LP胚系变异的携带率为6.3%,遗传高危组(具备肿瘤家族史或个人史或早发性)胰腺癌患者中的携带率高达17.1%。胰腺癌患者中胚系变异频率较高的基因为PALB2、BRCA2和ATM。结论胰腺癌患者中整体胚系变异的携带率不高,但在遗传高危组中显著升高,证明了临床因素在遗传性胰腺癌筛选中的重要性。

磁微粒化学发光法测定VEGF的性能验证和临床应用效果评估

目的分析磁微粒化学发光法测定血管内皮生长因子(VEGF)的性能并评估临床应用效果。方法选取2023年8月于复旦大学附属中山医院确诊为实体恶性肿瘤患者80例作为癌症组,良性病变患者80例作为良性疾病组,另选取于该院体检的表观健康者20例作为健康对照组。采用磁微粒化学发光法测定VEGF的水平,并验证其正确度、重复性、中间精密度、线性范围、可报告范围、参考范围及抗干扰能力。比较3组患者VEGF水平并绘制VEGF诊断恶性肿瘤的受试者工作特征(ROC)曲线。结果低值样本重复检测20次的变异系数(CV)为4.38%,高值样本重复检测20次的CV为1.32%,符合国家卫生健康委员会临床检验中心室间质量评价标准中公布的肿瘤标志物不超过总允许误差(TEa)的1/4的要求(≤6.25%)。低值样本测量10次的CV为2.38%,高值样本测量10次的CV为1.92%,中间精密度符合不超过TEa的1/3的要求(≤8.33%)。重复检测3次国际标准品Z1、Z2的偏差分别为1.43%和-1.45%,其绝对值均未超出目标偏差(≤15%)。线性范围为40~3200 pg/mL。可报告范围为40~16000 pg/mL。20例表观健康人群检测结果均在厂家声明参考范围内,参考范围验证通过。加入干扰物质后,检测结果偏差均符合产品说明书声明的偏差(≤15%),抗干扰验证通过。癌症组VEGF水平高于健康对照和良性疾病组(P<0.05),以160 pg/mL为最佳截断值时,VEGF诊断恶性肿瘤的曲线下面积为0.90,灵敏度为0.69,特异度为0.95。结论磁微粒化学发光法测定VEGF的重复性、中间精密度、正确度、线性范围、可报告范围、参考范围、抗干扰能力均符合实验室质量管理要求,能保证检测质量,满足临床使用需求,可用于恶性肿瘤的辅助诊断。

积极推进医学检验结果一致性的工作

临床医生和患者都希望医学检验可以做到同一份样本在不同的检验部门、不同的时间得到相同的检测结果（在临床允许的差异范围内）。这是一代又一代医学检验人员长期以来孜孜追求的目标——检测标准化,也是检测结果一致性追求的目标。但医学检验的实际情况距离这一目标相距甚远。由于种种原因,医学检验部门使用的检测系统（检测仪器、检测试剂盒参数、标准品等）常常各不相同,使得同一份样本的检测结果在不同的检测部门出现程度不等的差异。

非酒精性脂肪性肝病的表观遗传学研究进展

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种从相对良性的肝脏脂肪变性到非酒精性的脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的代谢性肝病。NASH以持续性肝损伤、炎症和肝纤维化为特征,并显著地增加了肝硬化和肝细胞癌等终末期肝病的风险。目前关于NAFLD/NASH的发病机制仍不明确,但是近来该病在表观遗传学领域的研究进展给该病的发病机制提供了新的视角。本文综述了该领域近来的研究进展,为阐明NAFLD的发病机制奠定了坚实的基础,并为该病的早发现、早诊断、早治疗提供了潜在的靶点。

深度学习对放疗影像进行盆腔肠管自动勾画的可行性研究

目的研究基于深度学习对放疗影像进行盆腔肠管自动勾画的可行性。方法随机选取2019—2021年在复旦大学附属中山医院接受放疗的直肠癌患者100例,随机选取其中60例作为训练模型病例,另40例作为测试病例。以手动肠管勾画为标准,基于深度学习自动分割软件AccuContour中的原始小肠模型,分别在60个模型病例中随机选取60、40、20(2组)个病例训练肠管勾画,获得4个训练模型Rec60、Rec40、Rec20A和Rec20B。使用40例测试病例评估原始模型与Rec60模型的Dice相似性系数(Dice similarity coefficient,DSC)、95%Hausdorff距离(95%Hausdorff distance,HD95)和平均对称表面距离(average symmetric surface distance,ASSD),并分别评估5组自动勾画的DSC。使用SPSS软件对几何参数进行配对t检验。结果训练后的勾画更接近手动勾画的肠管,能够较好地分辨肠管边界,可区分小肠与结肠。Rec60的平均DSC、HD95和ASSD分别较原始模型高0.16(P<0.001)、低12.4(P<0.001)和低5.14(P<0.001)。关于DSC,经配对t检验,4个训练模型与原始模型的差异均有统计学意义,Rec60与Rec40之间差异无统计学意义,Rec60和Rec40与Rec20A和Rec20B之间差异有统计学意义,Rec20A与Rec20B之间差异无统计学意义。结论对于放疗影像的自动勾画,模型训练能够有效提高肠管勾画的准确性。在AccuContour软件中40个及以上病例的训练集能够训练出盆腔肠管勾画的最优模型。

高通量测序数据再分析在识别结直肠癌患者ERBB2扩增中的价值

目的评估未涵盖即ERBB2拷贝数变异(copynumbervariation,CNV)分析的高通量测序(highthroughput sequencing,HTS)数据再分析在识别结直肠癌患者ERBB2扩增中的价值。方法回顾性分析经病理活检确诊为结直肠癌并接受外周血cfDNA高通量测序样本的检测数据252例。根据经免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和/或荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)判断为ERBB2未扩增样本的HTS数据,计算17号染色体(Chr17)reads数占总reads数的比例范围,初步确定其为识别ERBB2扩增的阈值。根据初步阈值筛选可疑阳性样本,通过数字PCR、IHC和FISH进行验证。结果89例经IHC和/或FISH判定为ERBB2未扩增样本的Chr17 reads数与总reads数的比值为0.239±0.192(0.188~0.299)。以均数的1.25倍0.298作为识别ERBB2扩增的阈值分析其余163例样本数据,发现7例疑似阳性,比值为0.302~0.853。其中5例经IHC和/或FISH判定为阳性,6例经数字PCR验证为阳性,Chr17 reads与总reads数的比值与ERBB2/EIF2C1比值成正相关,相关性好(r2=0.909)。结论再分析未涵盖ERBB2 CNV分析的HTS数据可以初步识别结直肠癌患者的ERBB2扩增。

间接法建立上海地区人群血清铁蛋白参考区间

目的采用间接法建立上海地区人群血清铁蛋白参考区间。方法选取2021年1月—2022年10月复旦大学附属中山医院行铁蛋白检测的27775名受试者,采用Turkey法剔除离群值,最终纳入18264名受试者用于建立参考区间。采用Hoffmann法建立铁蛋白的参考区间。选取2023年3—4月同院2486名表观健康者,用于验证铁蛋白自建参考区间。依据性别和年龄将参考区间建立人群和验证人群分别分为男性组、≤50岁女性组和>50岁女性组。另选取2022年3月—2023年4月复旦大学附属中山医院>50岁女性贫血患者207例,用于血清铁蛋白自建参考区间的临床应用评估。采用线性回归分析评估铁蛋白水平与性别和年龄的相关性。结果男性组、≤50岁女性组和>50岁女性组之间铁蛋白水平差异均有统计学意义(P<0.001)。男性铁蛋白水平与年龄无相关性(r^(2)=0.003,P>0.05),女性铁蛋白水平与年龄呈正相关(r^(2)=0.125,P<0.05)。采用Hoffmann法依据年龄和性别分别建立参考区间。建立的男性、≤50岁女性和>50岁女性铁蛋白参考区间分别为33.4~1000.0、4.8~341.0、27.4~765.0μg·L^(-1)。自建参考区间的上、下限与现用参考区间有一定差异。自建参考区间的验证通过率(男性组98.59%、≤50岁女性组95.82%、>50岁女性组97.38%)显著高于现用参考区间(85.89%、78.76%、60.26%)(P<0.001)。依据自建参考区间能更好地区分女性贫血人群铁代谢指标异常者。结论血清铁蛋白具有性别和年龄差异。采用间接法建立的铁蛋白参考区间较现用参考区间更适用于上海地区人群。

TNFRSF12A与肝癌的临床相关性及其与肿瘤免疫调控的相关研究

目的探讨肝癌发病机制中TNFRSF12A分子的作用。方法通过综合分析癌症基因图谱(Cancer Genome Atlas Program,TCGA)和单细胞测序数据,研究TNFRSF12A在肝癌中的表达情况及其与预后的相关性。HPA数据库分析TNFRSF12A在亚细胞内的定位,使用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。TIME 2.0数据库分析TNFRSF12A与肝癌组织内免疫细胞浸润的相关性。结果TNFRSF12A在肝癌组织中高表达并与患者生存预后呈显著正相关(OS:HR=1.61,P=0.0070;RFS:HR=1.45,P=0.0370;PFS:HR=1.30,P=0.0990;DSS:HR=1.67,P=0.0270),同时与患者的年龄(P=0.0467)和BCLC分期(P=0.0456)也存在显著相关性。TNFRSF12A与肿瘤干细胞标志物(CD24、SOX4、ANPEP)共表达,提示其与肿瘤恶性程度高度相关。分子功能分析揭示其主要存在于细胞质中,并在细胞凋亡、侵袭、蛋白结合等过程中发挥作用。此外,TNFRSF12A与Treg细胞和免疫细胞浸润相关,揭示其在肿瘤免疫调节中可能发挥的作用。结论TNFRSF12A在肝肿瘤中表达显著升高,并与患者预后显著相关。肿瘤细胞可通过其与Treg产生的细胞因子发生互作,重塑肿瘤微环境。

人音猬因子相互作用蛋白在肿瘤中的分子调控机制及临床价值的研究进展

HHIP(hedgehog-interacting protein)基因编码人音猬因子相互作用蛋白,位于染色体4q31.21-31.3。作为Hedgehog(Hh)信号通路的内源性拮抗剂,HHIP能够抑制Hh信号通路活化。在人类肿瘤中,Hh信号通路通常呈异常激活状态,HHIP在大多数类型的肿瘤组织中普遍低表达。HHIP表达水平与肿瘤患者总生存期呈正相关,可作为肿瘤患者的独立预后标志物。本文从HHIP在肿瘤中的生物学功能、作用机制及其临床价值方面对HHIP研究进展作综述。

血清PCT、CRP联合NLR在细菌性血流感染中的应用价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)联合中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在细菌性血流感染(BSI)早期诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法选取2022年1-12月就诊于复旦大学附属中山医院并诊断为细菌性BSI的339例患者作为血培养阳性组,选取同期收治的临床诊断为发热且血培养结果为阴性的185例患者作为血培养阴性组。根据病原菌类型分为革兰阴性菌感染(GN-BSI)组194例和革兰阳性菌感染(GP-BSI)组145例。将GN-BSI组分为肠杆菌目组(133例)、非发酵菌组(49例)及其他细菌组(12例)3个亚组。比较血清PCT、CRP和NLR在不同组别间的差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC)、灵敏度和特异度,评估血清PCT、CRP、NLR单项及联合诊断细菌性BSI的效能。结果血培养阳性组血清PCT、CRP和NLR水平高于血培养阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);GN-BSI组的PCT水平中位数为1.77 ng/mL,高于GP-BSI组的0.79 ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05);肠杆菌目组血清PCT、CRP水平高于非发酵菌组,差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标联合诊断细菌性BSI的AUC为0.866,灵敏度为0.752,特异度为0.816;3项指标联合鉴别诊断GN-BSI和GP-BSI的AUC为0.977,灵敏度为0.959,特异度为0.917;3项指标联合鉴别诊断肠杆菌目细菌BSI和非发酵菌BSI的AUC为0.842,灵敏度为0.699,特异度为0.857,均高于单项指标检测的诊断价值。结论血清PCT、CRP联合NLR对细菌性BSI早期诊断及鉴别诊断具有一定的临床价值。

基于术前RDW-SD、RDW-CV评估乳腺癌淋巴转移患者预后

目的 分析乳腺癌淋巴转移患者术前红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)和红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)与其预后的关系。方法 选取2018年1月—2022年2月复旦大学附属中山医院厦门医院经术后病理确诊乳腺癌并发生淋巴转移的女性患者156例。收集患者术前RDW-CV和RDW-SD、临床病理指标,以及预后相关信息。采用Cox回归分析评估患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析RDW-SD和RDW-CV预测患者预后不良的效能。根据RDW-CV、RDW-SD的最佳临界值,将156例乳腺癌淋巴转移患者分为高表达组和低表达组,采用Kaplan-Meier生存曲线比较高表达组和低表达组无病生存率的差异。结果 不同TNM分期的乳腺癌淋巴转移患者之间RDW-SD、RDW-CV差异有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,RDW-CV诊断病理Ⅳ期[曲线下面积(AUC)=0.838,P<0.001)和患者预后不良(AUC=0.773,P<0.001)的效能均优于RDW-SD(AUC分别为0.780、0.729,P<0.05)。Cox回归分析结果显示,术前RDW-CV是预后不良的独立危险因素[风险比(HR)=1.46,95%可信区间(CI)为1.13~1.89,P=0.004]。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,RDW-CV高表达组和RDW-SD高表达组无病生存率分别低于RDW-CV低表达组和RDW-SD低表达组(P<0.001)。结论 术前RDW-CV对乳腺癌淋巴结转移患者的预后评估价值优于RDW-SD。高RDW-CV是患者预后不良的独立危险因素。

数字PCR技术检测结核分枝杆菌的应用进展

结核病是一种全球范围内的慢性传染病,对人类健康已构成严重威胁,早期诊断、耐药筛查和控制疾病传播是结核病防治的关键方面,然而,现有的诊断技术和药敏试验耗时长,难以实现早期诊断和耐药筛查的目的,大大限制了对疾病传播的控制。数字聚合酶链反应(dPCR)是第3代PCR,是一种灵敏度高、不需要校正曲线的核酸定量检测方法。该文就dPCR的原理及其在结核病诊断、耐药筛查和传播监测中的应用进行综述,并将dPCR与其他结核病检测方法进行比较,展望了dPCR在临床结核病实验室应用中的挑战和未来的前景。

浆母细胞在成人原发免疫性血小板减少症中的表达特征及临床价值

目的探讨成人原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中浆母细胞的表达特征及在疾病诊断中的价值。方法选取2022年7—12月来复旦大学附属中山医院就诊的20例ITP患者和20例继发其他各种疾病导致血小板减少患者(非ITP血小板减少患者)分别作为ITP组和非ITP血小板减少组,并选取同期24例体检健康者作为健康对照组。应用流式细胞术检测各组外周血B淋巴细胞亚群并比较其差异,采用Logistic回归分析ITP发生的风险因素。结果与健康对照组比较,ITP组浆母细胞(CD19^(+)CD27^(++)CD38^(++))占CD19^(+)细胞比例显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),其余淋巴细胞亚群指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照组比较,非ITP血小板减少组初始B细胞(CD19^(+)CD27^(-)CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例显著上升,记忆B细胞(CD19^(+)CD27+CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),浆母细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。与非ITP血小板减少组比较,ITP组浆母细胞(CD19^(+)CD27^(++)CD38^(++))、记忆B细胞(CD19^(+)CD27+CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例均显著上升,初始B细胞(CD19^(+)CD27^(-)CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,当模型未校准时,OR=3.31,P<0.01;校准性别、年龄后,ITP发生的风险增加2.65倍(OR=3.65,P<0.01);进一步校准性别、年龄和血小板计数后,ITP发生的风险增加3.78倍(OR=4.78,P<0.01)。结论外周血浆母细胞升高是成人ITP发生的独立风险因素。