MicroRNAs特性及其在毒理学中的应用

MicroRNAs(miRNAs)是一类22 nt左右的小分子非编码单链RNA,它通过与靶mRNA互补结合,调控mRNA翻译,在细胞的生长、分化、发育、代谢和凋亡等活动中发挥作用。研究表明,miRNAs的表达调控着各种肿瘤和环境疾病的发生发展,是一个很好的生物标志,因此miRNAs在毒理学的研究中将会发挥重要作用。

1993～2002某开发区化工行业职业伤害上报现状调查分析

[目的 ]分析职业伤害报告现状和有关影响因素。 [方法 ]对某开发区 1993～ 2 0 0 2年间发生的职业伤害上报情况进行流行病学调查分析。 [结果 ]该区实际年均职业伤害发生率为 3 5 7 3× 10 -5;上报率为 3 0 8% ,上报年均职业伤害发生率为 110 2× 10 -5;农民工和临时工的职业伤害上报率低 ,分别为实际发生率的 6 0 %和 3 1 6% ;独资、私营和小型企业上报率低 ,分别为实际发生率的 2 3 7%、15 9%和 11 9% ;参保企业上报率相对较高 ,也仅为实际发生率的 42 9%。上报的职业伤害中 ,错报率为 45 5 %。宣传教育不力是影响上报的主要原因 ( 3 1 1% )。 [结论 ]影响职业伤害上报的原因较多。提高职业伤害上报率应从加强法律法规教育、提高企业经营者的守法意识和增强职工自我保护意识等方面综合考虑。

消化道摄入壬基酚在大鼠体内的分布与清除

[目的 ]了解壬基酚经消化道摄入后在大鼠体内的分布与清除过程。 [方法 ]对空腹和自由进食大鼠灌胃壬基酚后 ,不同时间剖杀动物 ,取血、肝、肾、睾丸和脑组织测定壬基酚含量。 [结果 ]空腹大鼠灌胃后壬基酚在血和睾丸中的清除符合一室模型 ,在肝、肾和脑组织中的清除符合二室模型。在血、肝、肾、睾丸和脑组织中的平均滞留时间分别为2 8 12、19 47、3 1 91、2 9 64和 3 9 41h。自由摄食大鼠灌胃后壬基酚在血、肝、肾、睾丸和脑组织中的清除符合一室模型 ,其平均滞留时间分别为 43 16、47 13、3 8 12、44 5 5和 41 5 1h。 [结论 ]消化道摄入壬基酚后 ,壬基酚主要分布于实质脏器中 ;壬基酚从体内的消除途径主要为经肝脏清除 ;

丙烯腈对大鼠脑皮层氧化应激效应的研究

目的 评价长期低浓度接触AN对大鼠脑组织的氧化性应激效应 ,探讨AN神经毒性机制。方法 SD雄性大鼠 3 0只 ,随机分成 3组 :对照组、低剂量组和高剂量组 ,通过饮水分别给予 0、5 0和 2 0 0mg L的AN溶液。染毒时间为 12周。染毒结束后从每组随机选取 7只大鼠 ,取双侧大脑皮层测定氧化性应激指标。结果 染毒组的MDA水平(nmol mg蛋白 )明显高与对照组 (16 60± 6 49) ,且高剂量组 (15 7 7± 85 40 )明显高于低剂量组 (98 5 3± 5 0 3 5 ) ,其剂量 效应关系有显著性 ;3组之间的GSH Px活力差异未见显著性 ;虽然低剂量组的SOD活力和对照组的差异未见显著性 ,但高剂量组明显高于对照组和低剂量组。高剂量组GSH明显低于对照组和低剂量组 ,但低剂量组和对照组的差异无显著性。结论 诱导氧化性应激可能是AN神经毒性的重要作用机制。

异黄酮对前列腺癌细胞的激素受体基因表达的影响

[目的]通过大豆异黄酮的活性物质染料木黄酮和大豆苷元抑制前列腺癌PC 3和LNCaP细胞增殖和对激素基因表达的影响,探讨大豆异黄酮治疗和预防前列腺癌的可能机制。[方法] 0、10、2 0、40、60、80和160 μmol/L剂量组的染料木黄酮和大豆苷元处理前列腺癌细胞,细胞存活率用MTT方法检测,α雌激素受体(ERα)、β雌激素受体(ERβ)、雄激素受体(AR)和血管上皮生长因子(VEGF)等基因的mRNA表达用RT PCR进行检测。[结果]染料木黄酮和大豆苷元对PC- 3、LNCaP细胞具有明显的抑制生长作用,在160 μmol/L的浓度时,染料木黄酮、大豆苷元作用72h后,PC- 3细胞的存活率分别为12 .2 8%和44 .88% ,LNCaP细胞的存活率分别为2 5 .48%和43 .14 % ,其抑制效应具有时间和剂量依赖性,同时发现对PC 3细胞的VEGF、ERα和ERβ基因表达下调,AR基因处理前后没有检测到;对LNCaP细胞的VEGF和AR基因表达下调,ERα和ERβ的表达并无影响。[结论]大豆异黄酮能抑制前列腺癌细胞的增殖效应,存在时间和剂量效应关系,雌激素受体基因可能直接在大豆苷元抑制PC 3细胞的增殖中参与作用,而染料木黄酮抑制PC- 3细胞和染料木黄酮及大豆苷元抑制LNCaP细胞可能主要是通过Akt通路影响VEGF和AR等基因而实现。

Hormesis简史及其中文译名

本刊在2004年第6期上刊载了顾祖维教授整理的"兴奋效应(Hormesis)"的名词解释小资料后,收到了上海市疾病预防控制中心应贤平研究员的来信,对该词的中文译名提出了不同看法。本刊将信转请张玉彬、金泰廙、金锡鹏教授作答。为供大家学习和参考,现将二文均刊载如下,以飨读者。

热休克蛋白HSP70-hom2437位点基因多态性与煤工尘肺的关系

[目的]探讨HSP70-hom 2437 T/C位点基因多态性与煤工尘肺(CWP)的关系。[方法]选择中国西南两省225例确诊的CWP患者为病例组(Ⅰ期:n=134;Ⅱ+Ⅲ期:n=73+18),非CWP的294名接尘工人为对照组,均为男性,汉族。对研究对象进行问卷调查(接尘工种和接尘工龄,肺部疾病发生情况,吸烟情况等),采用PCR-RFLP方法进行多态性检测。[结果]HSP70-hom基因型频率分布在病例组和对照组间差异有统计学意义(x^2=11.209,P=0.026),经多因素Logistic回归分析对年龄、接尘时间以及吸烟指数分级等因素校正后,与接尘对照组比较,Ⅱ+Ⅲ期CWP患者HSP70-hom CC基因型频率明显增加,其调整OR=15.61,95%CI(1.25～194.6)。[结论]HSP70-hom 2437基因多态可能与中国西南汉族人群中CWP易感性有关,并可能与CWP严重程度有关。

氯乙烯致染色体损伤的易感性与APE1和XRCC1基因多态关系研究

目的探讨脱嘌呤-脱嘧啶核酸内切酶（APE1）和X线交叉互补基因1（XRCC1）基因多态与氯乙烯致外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。方法采用双核淋巴细胞微核的方法评价个体染色体损伤水平，采用引入错配碱基创造酶切位点的限制性片断长度多态（CRS-RFLP）和PCR-RFLP技术对75名氯乙烯接触工人APE1Asp148Glu，XRCC1Arg194Trp、Arg280His及Arg399Gin多态位点进行检测。结果研究对象中APE1 148（Asp/Asp、Asp／Glu、Glu/Glu）三种基因型频率分别为38．7％、44．0％和17．3％；XRCC1 194（Arg／Arg、Arg／Trp、Trp／Trp）三种基因型频率分别为75．5％、21．3％和4．0％；XRCC 1280（Arg／Arg、Arg／Hi、His／His）三种基因型频率分别为69．3％、30．7％和0；XRCC 1399（Arg／Arg、Arg／Gln、Gln/Gln）三种基因型频率分别为49．3％、45．3％和5．3％。多因素poisson回归分析结果表明，女性发生染色体损伤的危险性是男性的1．6倍（95％CI 1．2284～2．0699，P=0．0004），XRCC1 194Arg／Arg基因型个体发生染色体损伤的危险性是Arg／Trp、Trp／Trp基因型个体的0．6898倍，（95％CI 0．4997～0．9333，P=0．0195）。单体型分析结果表明，TGG／CGG和TGG／CAG单体型对组微核率均低于野生纯合子单体型（CGG／CGG）（P〈0．05）。结论女性和XRCC1 194 Arg/Arg基因型个体为氯乙烯致染色体损伤的易感人群。

精液中三种邻苯二甲酸酯类物质的测定

环境内分泌干扰物质(Envionmental endocrine disruptors),又称环境类激素,是指一些可影响负责机体自稳、生殖、发育和行为的天然激素的合成、分泌、转运、结合、作用或消除的外源性物质.

高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素的含量

微囊藻毒素(MC)是水样释放的有毒代谢物,对环境及人类健康具有较大的危害性。因而建立高效液相色 谱法(HPLC)测定水中藻毒素的方法,用该法检测常见微囊藻毒素MC-LR的检出限为0.03μg/L,线性定量范围为0.05- 10μg/L,建立了标准曲线和工作曲线,并应用该方法分析水样,表明其具有实用性,并初步利用导数光谱法进行定量。

丙烯腈染毒大鼠脑病理形态学改变及其对神经特异蛋白质表达的影响

目的观察丙烯腈(Acrylonitrile AN)所致的大鼠脑组织病理学改变及对神经特异蛋白质表达的影响。方法选用SD雄性大鼠,应用苏木素—伊红(HE染色法)染色、免疫组织化学、图像分析等技术综合评价经饮水染毒大鼠3个月后所致大鼠病理改变及对神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经微丝(NF)的影响。结果低剂量染毒大鼠皮层和海马区胶质细胞增生,神经元排列紊乱,且高剂量染毒组还可见血管扩张和出血,但未见明显的神经元坏死迹象;免疫组织化学技术观察显示GFAP表达增加;NF表达减少,排列密集,且有串珠样改变。结论胶质细胞增生及NF改变为AN所致神经损害的病理学特征。

砷镉联合染毒大鼠肾毒性剂量效应分析

目的分析砷、镉联合染毒大鼠肾毒性效应及其剂量-效应关系,探讨砷、镉联合肾毒性的生物标志物和生物接触限值。方法以雄性Wistar大鼠为实验动物,用As2O3(333.78μmol/L,1335.11μmol/L)和CdCl2(444.84μmol/L,1334.52μmol/L)溶于水中单独或联合染毒3个月。以染毒砷(As)、镉(Cd)剂量为外剂量指标,大鼠体内血、尿、肾脏中砷、镉负荷为内剂量指标;肾小管损伤指标尿β2-微球蛋白(Uβ2-MG)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)和肾小球损伤指标尿白蛋白(UALB)为肾功能损伤效应指标。结果砷对肾小球的毒性强于镉,镉对肾小管的毒性则比砷强。Uβ2-MG、UALB、UNAG水平变化明显,主要集中在联合染毒组,尤其是高砷(Ashigh,1335.11μmol/L)+低镉(Cdlow,444.84μmol/L)组、Ashigh(1335.11μmol/L)+高镉(Cdhigh,1334.52μmol/L)组与对照组、各单独染毒组间差异均有统计学意义。砷、镉染毒剂量、体内负荷与效应指标间均为正相关关系,存在明显的剂量效应关系。结论砷、镉对大鼠肾脏功能联合作用主要为相加作用;内接触剂量比外接触剂量更能反映毒物对机体的毒性作用;尿镉、尿砷和Uβ2-MG、UALB是监测砷、镉联合肾毒性的敏感生物标志物。

性早熟患儿血清中四种环境内分泌干扰物的检测

目的建立高效液相色谱分析法测定性早熟患儿血清中4种环境内分泌干扰物（DEHP、MEHP、p,p＇-DDE、4-NP）含量的方法。方法正己烷提取血清样品,采用C18色谱柱分离。以甲醇：水：三氟乙酸（1000：50：1）为流动相,应用紫外检测器在波长228nm处检测DEHP和MEHP,在波长238nm处检测p＇-DDE；应用荧光检测器在激发波长275nm、发射波长312nm处检测4-NP。结果血清中待测组份的浓度和峰面积呈良好的线性关系,的线性范围是0.002～1.0μg/m。检测限均为1ng/ml。回收率DEHP为96.84%～103.44%,MEHP为87.69%～104.92%,p,p＇-DDE为87.6%～109.89%,4-NP为98.57%～105.1%。结论该方法样品处理简单、操作简便,能够节省生物样品,缩短检测时间,提高检测效率。

DNA损伤关卡及分子机制研究进展

DNA损伤会引发多种细胞反应,包括DNA修复、细胞周期延迟或阻滞、细胞凋亡等。其中细胞周期延迟或阻滞是通过DNA损伤关卡完成的。DNA损伤关卡主要包括3个组成部分,即感应因子(如ATM和ATR)、信号传导因子(如Chk1和Chk2)和效应因子(包括多种能激活CDKs的磷酸酯酶,如Cdc25A、Cdc25B和Cdc25C)。DNA损伤关卡主要包括G1/S、S和G2/M关卡。DNA损伤发生在G1期时,通过ATM-Chk2-Cdc25A或ATR-Chk1-Cdc25A途径启动G1/S阻滞,随后是由p53介导的G1/S期阻滞的维持过程。在S期发生的DNA损伤引发的S期关卡的激活主要通过两条途径即ATM(ATR)-Chk2(Chk1)-Cdc25A-Cdk2途径和ATM-NBS1/SMC1途径,阻滞DNA的复制。G2/M期关卡的作用是阻止在G2期DNA受损的细胞进行有丝分裂,根据损伤的形式不同,分别激活ATM-Chk2-Cdc25和ATR-Chk1-Cdc25两条通路,抑制Cdc2/CyclinB的活性,阻止细胞进入M期。

镉、锌对大鼠前列腺的联合毒性研究

[目的]研究亚慢性低剂量氯化镉染毒对SD大鼠前列腺的损伤及锌的保护作用 ,并探讨镉、锌在前列腺内分布和对大鼠性激素水平的影响。[方法]氯化镉 (50 ,150mg/LH2O)和/或氯化锌 (100 ,300mg/LH2O)自由饮水染毒14周 ,取心脏血 ,测血清性激素水平 ;取前列腺腹叶和背侧叶 ,测前列腺内镉锌含量和MT_1,MT_2及ARmRNA表达量。[结果]实验发现在血清睾酮水平无明显下降的情况下 ,镉染毒可造成前列腺器官系数下降。镉染毒可降低大鼠血清促黄体生成素的水平 ,而锌则表现为上调。同时镉和锌均可升高血清中雌激素水平。在前列腺组织中 ,镉、锌诱导腹叶金属硫蛋白mRNA的表达 ,而对背侧叶的表达无影响。高镉染毒使得前列腺腹叶雄激素受体表达水平 ,在各锌剂量组中 ,均有下调。镉或锌均可使前列腺背侧叶雄激素受体表达水平上升 ,而在联合组中 ,则表现为下调。同时镉染毒使得前列腺中的镉蓄积而锌流失 ;而锌则起相反效应。[结论]饮水镉染毒可引起体内性激素的紊乱及调节其受体在前列腺中的水平 ,并改变锌在前列腺的含量 ,这些效应可能使得前列腺易于遭受镉的损伤而导致以后的前列腺恶变。