法医学中的性别鉴定

对用形态学、细胞学、性激素检测、 DNA重组技术和聚合酶链式反应（ PCR）等方法进行性别鉴定进行了概述，显示骨骼的性别鉴定以形态学方法为好；对能获得足够量基因组 DNA的人体组织，最好用 PCR检测牙釉基因。而检测性染色质因阳性率较低，检测性激素仅适用于血痕检材， DNA分子杂交技术需要复杂的仪器及放射性同位素标记的探针，这些方法目前已较少应用。

褪黑素对大鼠空间学习记忆的影响及其机制研究

本研究运用Morris水迷宫和电生理学方法 ,以逃避潜伏期、穿环系数和海马CA1区突触长时程增强(long termpotentiation ,LTP)为指标 ,研究褪黑素对大鼠空间学习记忆能力的影响。实验结果显示 :( 1)在Morris水迷宫 6d训练中 ,对照组大鼠后 4d平均逃避潜伏期为 18 4 4± 2 7s,褪黑素组为 3 0 0 2± 3 6s,两者有显著差异 (P <0 0 1) ;训练 6d后 ,褪黑素组穿环系数为 2 5 68± 2 3 2 % ,明显小于对照组的 4 3 3 3± 2 85 % (P <0 0 1)。( 2 )采用微量注射法给予海马CA1区褪黑素 ,强直后 60min ,fEPSP斜率为基准值的 114 2 8± 1 80 % ,显著低于对照组的 169 71±6 4 8% (P <0 0 1)。( 3 )预先给予东莨菪碱 ,不影响褪黑素对海马CA1区LTP的抑制 ,强直后 60minfEPSP斜率为基准值的 113 70± 5 5 5 %。( 4 )提前给予荷包牡丹碱后给予褪黑素 ,强直后 60minfEPSP斜率为基准值的 162 2 9±10 5 2 % ,明显大于褪黑素组 (P <0 0 1) ,而与对照组无显著差异 (P >0 0 5 )。上述结果表明 ,褪黑素对大鼠的空间学习记忆能力及海马CA1区LTP均有明显的抑制作用 ,两者相关 ;东莨菪碱不能阻断褪黑素对海马CA1区LTP的抑制作用 ,而荷包牡丹碱可以阻断褪黑素对LTP的抑制 。

蜂毒肽对新生大鼠心肌细胞Na^+,K^+-ATP酶基因表达的影响

目的 观察蜂毒肽对新生大鼠培养心肌细胞Na+,K+ ATP酶α1和 β1亚基mRNA的表达。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术。药物与培养的心肌细胞温育 1h后 ,观察蜂毒肽对Na+,K+ ATP酶基因表达的影响。用GAPDHmRNA作为内参照。 结果 蜂毒肽对α1亚基mRNA表达有显著促进作用。经GAPDH校正 ,光密度值对照组为 0 .47± 0 .14(n =5 ) ,蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组为 0 .6 6± 0 .10 (n =6 ,P <0 .0 5 ) ,哇巴因 1mmol/L组为 0 .6 7± 0 .0 9(n =6 ,P <0 .0 5 )。蜂毒肽 0 .0 1mmol/L组和哇巴因 1mmol/L组对Na+,K+ ATP酶β1亚基mRNA表达无显著影响。结论 蜂毒肽 0 .0 1mmol/L对Na+,K+ ATP酶α1亚基mRNA表达有促进作用 ,但对

大鼠肝前性门静脉高压症形成中一氧化氮和内皮素-1水平的动态变化

目的 :观察大鼠肝前性门静脉高压症形成中一氧化氮 (NO)和内皮素 - 1(ET - 1)水平的动态变化 ,探讨其在门静脉高压症高动力循环中的作用。方法 :以部分门静脉结扎 (PVL)法复制肝前性门静脉高压症大鼠模型 ,分别用硝酸还原酶和放免法检测正常组、假手术 (SO)组及PVL组术后不同时点的门静脉血浆NO-2 /NO-3 、ET - 1水平 ,并同步监测血流动力学指标的动态变化。结果 :PVL术后各时点NO-2 /NO-3 水平显著高于而ET - 1水平显著低于正常组 ,同时伴有血流动力学的明显变化。结论 :门静脉高压症大鼠存在高动力循环状态 (HCS)。NO和ET -

复方大黄制剂预防大鼠肥胖的实验研究

目的 :研究复方大黄制剂预防大鼠肥胖的效果及其可能机制。方法 :新生鼠 2 6只 ,随机分成大黄制剂 +高能饲料组 (n =8)、高能饲料对照组 (n =8)和普通饲料对照组 (n =10 )。大黄制剂 +高能饲料组和高能饲料对照组喂高能量饲料 ,普通饲料对照组喂普通饲料。第 9周后大黄制剂 +高能饲料组给予复方大黄制剂灌服 ,剂量 40mg·10 0g-1bodyweight·d-1,给药 8周 ,观察大鼠体重动态变化 ,腹腔脂肪重量 ,脂肪细胞大小 (显微电脑测量 ) ,脂肪细胞中瘦素 (leptin)表达 (ABC法 ) ,血清瘦素水平 (放免法 )变化。结果 :大黄制剂 +高能饲料组大鼠体重明显低于高能饲料对照组 ,脂肪重量明显轻于高能饲料对照组 ,脂肪细胞小于高能饲料对照组 ,脂肪细胞周围瘦素表达明显弱于高能饲料对照组 (灰度值 ) ,且与腹腔脂肪组织重量间呈显著正相关 (r=0 86 6 3,P <0 0 5 ) ,而血清瘦素水平变化不大。结论 :复方大黄制剂 (40mg·10 0g-1bodyweight·d-1)对大鼠肥胖有预防作用 ,其机制可能与脂肪细胞瘦素表达减弱有关。

心梗后心肌重构过程中AT_(1A)、AT_2受体表达的变化

为探讨AT1、AT2 受体在心肌重构演变过程中的作用 ,本实验应用免疫组化、电镜技术和图像分析方法 ,观察了大鼠心梗后心肌重构过程中非梗塞区AT1、AT2 受体表达的动态变化。结果显示 ,心梗术后 3d ,电镜显示非梗塞区心肌细胞肌原纤维横纹消失 ,线粒体肿胀 ,成纤维细胞增多 ,免疫组化显示AT1A受体在非梗塞区心肌组织表达明显升高 (P <0 0 0 1) ,AT2 受体表达无明显变化 (P >0 0 5 ) ;心梗术后 14d ,可见心肌细胞肌原纤维横纹 ,心肌细胞间胶原纤维明显增多 ,同时AT1A受体在心肌的表达比心梗术后 3d时减弱 ,但仍高于对照组 (P <0 0 5 ) ,AT2 受体表达明显增加 (P <0 0 0 1)。结果提示 :心梗后非梗塞区心肌AT1A、AT2 受体表达先后上调 。

复方大黄制剂对肥胖大鼠脂肪细胞瘦素及C/EBPα的影响

目的 :观察正常大鼠、肥胖大鼠和复方大黄制剂灌服 1个月肥胖大鼠脂肪细胞瘦素和C/EBPαmRNA表达的变化及C/EBPα对瘦素表达的调控。方法 :用大、中、小剂量分组 (2 0mg·10 0g-1;4 0mg·10 0g-1;12 0mg·10 0g-1)对肥胖大鼠进行复方大黄制剂灌服。制备脂肪细胞悬液后采用免疫组化ABC法及WesternBlot检测脂肪细胞瘦素表达水平。应用定量RT PCR技术检测脂肪细胞中C/EBPα基因mRNA表达的变化。结果 :肥胖大鼠灌服中剂量复方大黄制剂 30d后体重明显减轻 ;Lee’s指数明显降低。免疫组化ABC法及WesternBlot检测瘦素表达水平 ,发现脂肪细胞瘦素表达明显减弱。定量RT PCR结果发现 ,肥胖大鼠脂肪细胞中C EBPαmRNA表达水平较正常大鼠高 ,在中剂量复方大黄制剂灌服 1个月后 ,随着肥胖大鼠体重的减轻 ,脂肪细胞中C/EBPαmRNA水平也随之降低 ,与瘦素水平降低程度呈显著正相关 (r =0 98,P <0 0 1)。结论 :肥胖大鼠脂肪细胞的瘦素表达水平较正常大鼠高 ;灌服复方大黄制剂减肥有效的同时 ,脂肪细胞瘦素表达水平明显下降。肥胖大鼠脂肪细胞中C/EBPαmRNA表达水平在复方大黄制剂治疗后明显降低 ;其降低程度与脂肪细胞瘦素表达水平间呈显著正相关。

孤啡肽对创伤应激大鼠海马组织中IL-1βmRNA水平的影响

研究孤啡肽 (orphaninFQ ,OFQ)对机体免疫功能的调节机制 ,采用以单碱基突变模板作为内标的逆转录 聚合酶链式反应技术 ,观察侧脑室注射 (icv)OFQ对创伤应激介导的免疫功能低下大鼠海马IL 1βmRNA水平的影响。结果发现大鼠经手术创伤后 ,海马组织中IL 1βmRNA水平较正常大鼠有明显升高 (P <0 .0 1) ;icv 1μg(0 .5 5nmol)OFQ对正常大鼠海马组织中IL 1βmRNA水平无明显影响 ;icv 1μgOFQ可降低创伤大鼠海马组织中IL 1βmRNA水平 (P <0 .0 5 ) ;创伤大鼠侧脑室内注射 1μg孤啡肽的同时 ,注射 1μg [Phe1Ψ(CH2 NH)Gly2 ] nociceptin(1 13) NH2 ([F/G] NC 1 13,孤啡肽衍生物 ) ,结果海马组织中IL 1βmRNA水平与单纯创伤大鼠无显著性差异。结果提示孤啡肽通过作用于脑内的孤啡肽受体参与对创伤大鼠免疫功能的调节 ,其影响途径之一可能为抑制海马组织内IL 1βmRNA基因表达 ,[F/G] NC 1

Fas、NF-κB及Caspases在TNFα介导的微血管内皮细胞凋亡中的作用

目的 :研究肿瘤坏死因子α(TNFα)引起微血管内皮细胞凋亡的特点及Fas(即CD95抗原 )、NF -κB和caspases在此种凋亡中的作用。方法 :用TUNEL、流式细胞仪等方法测定TNFα引起体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞 (下称内皮细胞 )凋亡。用Northernblot、Fas抗体测定TNFα对内皮细胞Fas表达的影响及Fas在内皮细胞凋亡中的作用。用Westernblot、免疫组化测定TNFα作用后凋亡蛋白酶caspase - 8、caspase- 3的活化与表达。结果 :细胞生长曲线显示TNFα抑制内皮细胞增殖 ,并呈剂量依赖关系。TUNEL法测凋亡百分率为 14.0 %± 3.1% ,流式细胞仪测凋亡百分率为 13.1%。NF -κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸盐 (APDC)与TNFα共同作用后 ,细胞凋亡增加。TNFα作用后内皮细胞的Fas表达增高 ,用Fas抗体与TNFα共同作用 ,细胞凋亡增加。TNFα作用下caspase- 8活化显著增加 ,caspase - 3表达增多。caspase - 3抑制剂与TNFα共同作用 ,细胞凋亡减少。结论 :大剂量TNFα (5× 10 6U/L)能够引起一定量的体外培养的内皮细胞发生凋亡。NF -κB有抗内皮细胞凋亡的作用。TNFα上调内皮细胞Fas表达 ,后者参与内皮细胞凋亡。TNFα所引起的内皮细胞凋亡与caspase- 8及caspase -

VEGF高表达的胶质瘤细胞C6对共培养微血管内皮细胞表达Flk-1及Flt-1的影响

目的 :以正常鼠肝细胞系BRL 3A为对照 ,研究VEGF高表达的恶性胶质瘤细胞系C6对体外共培养的肺微血管内皮细胞表达Flt- 1、Flk - 1的影响。方法 :建立体外C6 ,BRL 3A与肺微血管内皮细胞的共培养方法 ,利用免疫细胞化学方法检测共培养后的微血管内皮细胞上VEGF受体Flt- 1、Flk - 1蛋白的表达变化 ,进一步采用RT-PCR和Northernblot分析Flt- 1、Flk - 1mRNA表达的改变。结果 :与胶质瘤细胞C6共培养的微血管内皮细胞Flk- 1、Flt- 1蛋白表达增加 (P <0 0 5) ,而与BRL 3A共培养的内皮细胞Flk - 1、Flt- 1蛋白表达下降 (P <0 0 1 ) ,RT -PCR和Northernblot检测发现与C6共培养后可上调微血管内皮细胞Flk - 1、Flt - 1mRNA的表达 (P <0 0 1 ) ,而与BRL 3A共培养下调了Flk- 1、Flt- 1mRNA的表达 (P <0 0 1 )。结论 :VEGF高表达的胶质瘤细胞C6对共培养的微血管内皮细胞表达Flk - 1、Flt- 1有明显的上调作用 。

骶神经根对膀胱功能的选择性支配(英文)

背景:SD大鼠不同骶神经根对膀胱功能的选择性支配作用目前仍不十分清楚。目的:研究骶神经根对膀胱功能的选择性支配,为临床脊髓损伤后的膀胱功能重建及建立实验性人工膀胱动物模型提供依据。设计:随机对照实验。单位:两所大学的骨科,一所大学医学院的生理学教研室。材料:2000-10/2002-06在复旦大学医学院卫生部手功能重建重点实验室进行实验,雄性清洁级SD大鼠10只,体质量250～300g。干预:随机分为2组,其中一组左侧为实验侧,另一组右侧为实验侧。对10只脊髓损伤后的SD大鼠进行硬膜外S1～4神经根电刺激。主要观察指标:记录膀胱神经丛动作电位和膀胱平滑肌复合肌肉动作电位变化,同时通过膀胱内插入测压管并经压力换能器记录膀胱内压的变化。结果:S1～4神经均参与SD大鼠的膀胱神经功能支配,其中以S2神经最主要,S1,S3神经次之,S4神经的支配作用最小。结论:不同的骶神经根对膀胱平滑肌的支配效能不同,利用膀胱平滑肌的主要支配神经根进行人工电刺激排尿或通过神经吻合重建人工膀胱反射弧,对提高脊髓损伤患者的膀胱排尿功能有一定的意义。

神经活性甾体对神经元的作用

神经活性甾体是指神经组织中具有活性的甾体激素。根据甾体激素的作用机制可分为三类 :(1)通过细胞表面离子通道型受体介导产生效应 ,这些受体包括GABAA 受体、NMDA受体等 ;(2 )通过G蛋白偶联的膜受体指导第二信使反应 ,再通过DNA结合蛋白 ,调节基因表达产生效应 ;(3)通过细胞内受体介导调控基因的表达产生效应。甾体激素的这些效应尤其是对离子通道型受体和G蛋白偶联型受体的调节作用 。

大鼠骶神经根对膀胱功能选择性支配的实验研究

目的:研究骶神经根对膀胱功能的选择性支配,为临床脊髓损伤(SCI)后的膀胱功能重建及建立实验性人工膀胱动物模型提供依据.方法:对10只SCI的SD大鼠进行硬膜外S1～S4骶神经根电刺激,记录膀胱神经丛动作电位和膀胱平滑肌复合肌肉动作电位变化,同时通过膀胱内插入测压管并经压力换能器记录膀胱内压的变化.结果:SD大鼠的S1～S4骶神经均参与膀胱神经功能支配,其中以S2骶神经最主要,S1、S3骶神经次之,S4骶神经的支配作用最小.结论:不同的骶神经根对膀胱平滑肌的支配效能不同,利用膀胱平滑肌的主要支配神经根进行人工电刺激排尿或通过神经吻合重建人工膀胱反射弧,对提高SCI后的膀胱排尿功能有一定的临床意义.

血管紧张素Ⅱ对缺血心肌细胞钾离子通道的作用

实验用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞 ,利用全细胞膜片钳的方法记录心室肌细胞的延迟整流钾电流 (IK)、内向整流钾电流 (IK1)和ATP敏感钾电流 (IKATP)。采用低氧、无糖、高乳酸和酸中毒综合方式模拟缺血灌流 ,造成细胞的模拟缺血 ,并在缺血的基础上继续用含 10 0nmol/LAngⅡ灌流细胞 ,观察AngⅡ对模拟缺血心室肌细胞钾离子通道的影响。实验结果显示 :(1)模拟缺血时 ,IK 明显减小 ;AngⅡ能进一步抑制IK。 (2 )模拟缺血条件下 ,IK1受到抑制 ,并且以内向电流的抑制为主 ;AngⅡ可加强对IK1内向电流的抑制 ,而对部分外向电流则有增加的作用。 (3)模拟缺血使IKATP外向电流略有增加 ;AngⅡ则明显加强IKATP外向电流 。

缓激肽在ACE抑制剂改善心肌梗塞后缺血边缘区血供中的作用

目的 研究血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEⅠ )介导的缓激肽 (bradykinin)对急性心肌梗塞后缺血边缘区组织血流量的影响。方法 ♂Wistar大鼠被随机分成 4组 :雷米普利、雷米普利加icatibant、络沙坦以及喂水对照组。用药 1wk后结扎冠状动脉左前降支 ,在结扎前后分别测定心率、血2 0 0 1 0 2 0 6收稿 ,2 0 0 1 0 5 17再修回1 复旦大学基础医学院生理学教研室·肾脏与高血压研究中心 ,上海 2 0 0 0 322 上海市岳阳医院内科 ,上海 2 0 0 4373德国基尔大学药理系作者简介 :茅建春 ,男 ,主治医师 ,Tel:0 2 1 64 0 4190 2 198压、缺血边缘区组织血流量的变化 ,成活的大鼠饲养 3wk后测定心肌梗死面积。结果 用雷米普利预处理 1wk能改善急性心梗心脏缺血边缘带的组织血流量并缩小心肌梗死面积 ,icatibant能使以上作用明显减弱 ,而单用络沙坦则无效。结论 ACEI类药物可改善急性心梗心脏缺血区边缘的血供并使梗塞面积缩小 。

血管新生的调控

近年来血管新生(angiogenesis)与疾病的关系受到广泛重视 ,有关血管新生的调控、与某些疾病的发生发展及防治的研究 ,已在整体、细胞、分子水平上深入开展 ,此内容构成了“微血管医学(MicrovascularMedicine)”的一个重要部分。以往本刊曾发表过中国微循环学会修瑞娟理事长有关这方面的评述及其它论文。为了进一步引起大家的重视 ,这里我们邀请中国微循环学会副理事长金惠铭教授撰写了“血管新生与疾病”的专稿。由于此稿全文较长 ,故编辑部将其分为“血管新生的调控”与“血管新生与疾病”两部分 ,分两次在本刊发表 ,以飨读者。金惠铭教授的原稿附有较多的参考文献 ,为节省篇幅 ,在发表时编辑部作了删减 ,请大家谅解。欢迎大家踊跃投寄有关这方面的研究论文与心得 ,编辑部将择优尽快发表。

蚓激酶对中风恢复期患者血液流变学影响的研究

目的探讨蚓激酶对中风后患者血液流变学的影响。方法采用随机双盲、安慰剂对照的前瞻性研究 ,31例缺血性脑血管病患者随机分为治疗组16例与对照组15例 ,口服蚓激酶 (或安慰剂 )400mg,每日3次 ,分别于给药前、给药3个月及6个月时测定血液流变学指标。结果服药后全血粘度、血浆粘度、血小板聚集率、红细胞聚集指数及纤维蛋白原含量均有降低 ,以6个月时最为显著 ,对照组无变化。结论蚓激酶能改善中风后患者的血液流变学指标。