FK506在颅脑损伤中作用的实验研究

目的研究创伤性脑损伤(TBI)后,FK506对血浆一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、脑组织炎症介质、自由基生成、兴奋性氨基酸(EAAs)水平的影响。方法雄性SD大鼠采用液压损伤法制备脑损伤模型,随机分为损伤组、治疗组和对照组。治疗组于伤后5min开始,一次性腹腔注射FK506(3mg/kg)。伤后30min、6h、24h测量血浆NO、NOS和伤灶及周围脑组织的白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、兴奋性氨基酸(EAAs)水平。结果与损伤组相比,治疗组中NOS活性和NO水平显著降低,IL-6、TNFα完全被清除,SOD损耗减少,MPO活性减低,伤后30min组EAAs释放明显减少。结论FK506能抑制伤后NO升高,减少EAAs释放,清除炎症介质,减少自由基生成,对减轻TBI后继发性脑损伤有较大应用价值。

阿尔茨海默病神经退行性变与细胞周期

对于阿尔茨海默病的神经退行性变机制的解释,目前有很多假说。近年来研究表明神经退行性变与细胞周期有关联,由此人们提出了阿尔茨海默病的细胞周期假说,该假说对认识阿尔茨海默病的神经退行性变机制提供了新的视角。

老年性痴呆大鼠模型建立的研究

目的研制并建立同时具备老年斑、神经纤维缠结两大病理特征形成过程的AD大鼠模型。方法将D-半乳糖皮下注射和鹅膏蕈酸脑组织定向注射相结合作用于大鼠,分别采用Y-电迷路和免疫组化方法,检测造模大鼠学习记忆和脑组织β-AP含量、磷酸化tau蛋白水平。结果造模大鼠学习记忆成绩下降,脑组织β-AP含量增多,磷酸化tau蛋白水平增高。结论造模大鼠同时具备学习记忆障碍,脑组织β-AP含量增多和磷酸化tau蛋白水平增高及胆碱能功能下降等特征,为目前较为理想的AD模型之一。

老年痴呆患者认知功能与维生素B_(12)及叶酸的相关性

目的评估老年人群维生素B_(12)和叶酸水平是否对轻度认知功能障碍(MCI)和阿尔兹海默症(AD)患者存在潜在影响。方法采用化学发光微粒子免疫分析法检测191例年龄≥50岁的老年痴呆患者血清维生素B_(12)和叶酸水平。以69名认知功能正常的人群作为正常对照组。探讨血清低水平维生素B_(12)和叶酸是否是老年痴呆发生的危险因素。认知功能的评价采用目前通用的神经心理测试:中文版简易精神状态检查表(CMMSE)、记忆和执行筛选量表(MES)。采用Pearson相关分析评估血清维生素B_(12)及叶酸水平与各组年龄、受教育年限、体重指数(BMI)和认知功能的相关性,采用Logistic回归分析评估血清维生素B_(12)、叶酸与老年痴呆患病风险的关系。结果 191例老年痴呆患者中54例为MCI、137例为AD,其中有78.1%的患者维生素B_(12)和叶酸水平正常,有6.1%的患者维生素B_(12)低于参考区间下限,有5.8%的患者叶酸水平低于参考区间下限;另有10.0%的患者维生素B_(12)或叶酸水平高于参考区间上限。作各协变量调整后,MCI和AD患者血清维生素B_(12)及叶酸水平与CMMES和MES评分无相关性(P>0.05)。但低血清维生素B_(12)水平与AD患病风险相关[比值比(OR)=2.869,95%可信区间(CI)1.123~7.333]。结论血清维生素B_(12)和叶酸水平与MCI或AD患者认知功能之间无明显关联。低水平维生素B_(12)可能通过某种机制增加AD患病风险。

GABA受体在脑缺血中的作用

GABA是哺乳类动物中枢神经系统中的一种抑制性氨基酸递质 ,通过其三种受体发挥生理作用。随着对脑缺血损伤机制的研究 ,科学工作者发现 ,GABA的三种受体在脑缺血损伤与修复中发挥了重要的作用。本文对GABA受体与脑缺血的关系做一综述。

蛋白磷酸酯酶-1和-2A抑制剂对NG108-15细胞tau蛋白磷酸化的影响

Alzheimer痴呆(AD)的主要脑病理变化之一为由超磷酸化的tau蛋白组成的神经原纤维缠结(Neurofibrillary tangle,NFT)。AD的Tau蛋白异常磷酸化与蛋白磷酸酯酶(PP)-2A和-1缺陷有关。本文首先用免疫印迹法显示NG含两大组分的tau蛋白。MTT方法观察到PP-2A和PP-1抑制剂冈 田酸(Okadaic acid.OA)处理NG108-14细胞能导致细胞代谢明显下降,同时免疫印迹法显示OA能导致的NG细胞Tau蛋白磷酸化。该研究为建立AD样蛋白磷酸酯酶缺陷引起的tau蛋白磷酸化的细胞模型奠定了基础。

Alzheimer病患者和大鼠脑内早老蛋白-1的分布

用免疫组化方法和原位杂交观察散发性阿尔茨海默病 (Sporadic Alzheimer' s disease)病人和老年对照 ,以及成年大鼠脑组织内的早老蛋白 -1(Presenilin-1,PS1)分布。结果观察到 PS1在脑内广泛分布 ,其中小脑的 Purkinje细胞、皮层的第 、 层细胞、内嗅皮层的第 层、海马的锥体细胞层和颗粒细胞层、黑质等结构 PS1表达较高。在大鼠和正常对照人脑内大多数 PS1阳性神经元染色呈点状分布于胞浆内 ;而阿尔茨海默病人脑内有许多 PS1阳性神经元为均质染色并且其中有些呈神经原纤维缠结状 ,其次有大量各型 PS1阳性老年斑 ,和少量 PS1阳性胶质细胞。结果提示

血脑屏障与脑缺血

血脑屏障 (BBB)是存在于脑组织与血液之间的一个复杂的细胞系统。它能控制血循环中某些物质向中枢神经组织转运 ,从而保证中枢神经组织内环境的稳定。近年的研究表明 ,脑缺血再灌注后 ,许多介质参与了BBB结构功能的改变和破坏 ,而BBB结构功能的变化又是脑缺血后水肿和炎症反应等病理变化的重要环节。深入探讨脑缺血再灌注后BBB的病理变化 ,可为脑缺血临床治疗方案的优化提供理论依据。

视网膜下移植睫状神经营养因子编码基因修饰的细胞保护SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞变性

目的探讨移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的细胞对SD大鼠视神经横断伤后视网膜节细胞的保护作用。方法通过脂质体将CNTF表达质粒转移至人胚肺成纤维细胞,建立稳定、高水平表达CNTF的细胞株。采用双侧背外侧膝状体及上丘核团注射3%荧光金逆行标记视网膜节细胞。将标记后的大鼠分为两组,于标记后7d手术切断眶内段视神经其中一组左眼不做手术作为正常对照组,右眼切断视神经作为手术对照组;另一组双眼均手术切断视神经,左眼注射PBS作为治疗对照组,右眼视网膜下移植表达CNTF的细胞作为实验组。术后5、14、17、21及28d取出眼球,铺片后荧光显微镜观察并计数视网膜内存活的节细胞。结果手术切断眶内段视神经后2周,视网膜内节细胞数减少6744%,视网膜下移植表达CNTF的细胞后第5、17、21d视网膜内存活的节细胞数明显多于治疗对照组(P<005)。结论视网膜下移植高水平表达CNTF的细胞对视网膜节细胞有保护作用。

重症肌无力患者骨骼肌25000蛋白含量分析

目的 探讨重症肌无力 (MG)患者骨骼肌 2 5 0 0 0蛋白质的减少是否具有特异性。方法用Guba Straubsolution (myosin提取液 )提取 2 1例正常 (骨折对照者 )肌肉 ,18例MG患者肌肉及 2 0例其他神经肌病患者肌肉的蛋白 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析蛋白成分 ,以伴刀豆凝集素 /辣根过氧化物酶 (ConA/HRP)联合反应检测糖蛋白。结果 SDS PAGE电泳图谱显示 ,相对分子质量约2 5 0 0 0的蛋白质谱带浓度在MG肌肉中明显低于正常对照肌肉和其他神经肌病肌肉。正常肌肉该蛋白谱带密度为 3 4± 1 5 ,MG肌肉为 1 6± 0 7,其他神经肌病肌肉为 3 7± 1 5 ;正常与其他神经肌病肌肉中 2 5 0 0 0蛋白质水平几乎没有差异 (P =0 899) ,但两者该蛋白质水平与MG肌肉差异非常明显(P <0 0 0 1)。电泳分析亦表明 2 5 0 0 0蛋白质与乙酰胆碱受体分子无关。糖蛋白检测揭示相对分子质量 2 5 0 0 0蛋白质为糖蛋白。结论 (1)MG肌肉中 2 5 0 0 0蛋白质水平特异性地低于正常肌肉和其他神经肌病肌肉 ,提示该蛋白可能与MG发病或发展有关 ;(2 ) 2 5 0 0 0蛋白质是一种糖蛋白 ,但不是乙酰胆碱受体蛋白。

正常及重症肌无力肌肉蛋白成分的比较

目的：了解正常及重症肌无力（ＭＧ）肌肉蛋白成分是否存在差异。方法：用ＰＢＳ提取正常和ＭＧ肌肉的蛋白，以常量及超微量ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析蛋白成分；扫描计算有差异的谱带密度，并以双向电泳鉴定其组分。结果：正常肌肉有一相对分子质量约２５×１０３的蛋白明显高于ＭＧ肌肉，常量分析该谱带密度：正常肌肉为４．２０±２．３１，ＭＧ肌肉为１．４０±０．４７，差异十分显著（Ｐ＜０．０１）。微量分析该谱带密度：正常肌肉为４．６２±１．９４ＭＧ肌肉为１．６６±０．５６，差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。双向电泳显示２５×１０３谱带至少有两个主要的蛋白成分组成，有差异的蛋白为一偏碱成分。结论：ＭＧ肌肉２５×１０３蛋白水平明显低于正常肌肉，提示该蛋白很可能与ＭＧ的发病或发展有密切的关系。

延迟亚低温对自发性高血压大鼠永久性大脑中动脉闭塞作用的研究

目的建立自发性高血压大鼠(SHR)永久性大脑中动脉闭塞模型(pMCAO),观察亚低温对神经损伤的保护作用。方法将33只SHR随机分为①延迟2 h亚低温组[n=8,术后2 h给予(33±0.5)℃的全身亚低温];②延迟6 h亚低温组[n=9,术后6 h给予(33±0.5)℃的全身亚低温];③常温组(n=8,术后置于室温25℃);④假手术组(n=8,术中不插入线栓,术后置于室温25℃)。采用线栓法制作pMCAO模型。术后5 h,24 h,36 h对SHR进行神经行为学评分;并于术后36 h处死大鼠,制作脑冠状切片,尼氏染色后计算脑梗死体积、水肿程度;NeuN染色比较大鼠脑梗死周边和梗死核心区神经元的脱失。结果各组大鼠脑梗死后神经行为学评分差异无统计学意义。延迟2 h、6 h亚低温组的梗死体积分别较常温组减小23.75%(P<0.01)、18.72%(P<0.05);水肿程度减轻25.32%、21.52%(P<0.05)。神经元脱失情况:皮质梗死周边,延迟2 h、6 h亚低温组较常温组分别减少21.67%(P<0.01)、15.67%(P<0.05);而皮质梗死核心各手术组之间无明显差别。两亚低温组之间梗死体积、水肿程度及梗死周边神经元的脱失均无显著差异。结论亚低温治疗可以显著减小脑梗死体积和水肿程度。延迟6 h和延迟2 h亚低温治疗的效果无明显差异。

一种鼠脑梗死区域的自动测量方法

目的 :提出一种自动测量大鼠脑梗死面积及体积的方法 ,克服人工勾画法和手动设定阈值法的不足。方法 :基于图像处理和分析系统的自编应用程序可根据脑片图像的灰度特征自动生成阈值 ,确定梗死灶。结果 :自动阈值法所得数据和标准值相关性良好 (γ =0 966,n =75 ) ;且多人多次重复测量所得数据的离散程度明显低于其他方法。结论 :自动阈值法可用于梗死区域的检测 。