粉尘螨Der f2变应原的分离纯化及其特征

目的 用粉尘螨 (Dermatophagoidesfarinae)代谢培养基浸液 (Dff)分离纯化粉尘螨 2类变应原 (Derf2 )。 方法 采用SephadexG 10 0层析、DEAE离子交换层析、PAGE等方法分离纯化Derf2 ,并对Derf2作SDS PAGE测定和热稳定性测定。结果 从Dff分离纯化得到较纯的Derf2 ,经SDS PAGE测定其相对分子质量为 140 0 0 ,并经 10 0℃加热 15min后 ,仍保留 5 0 %～ 83.3 %生物学活性。结论 从Dff中分离纯化的变应原 。

肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性

目的 观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法 采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PLC抗体对钙非依赖性PC PLC活性具有显著抑制 ;(4 )肝细胞中存在着与PC PLC抗体相结合的蛋白质 ;(5 )钙依赖性和钙非依赖性PC PLC的蛋白峰有部分重叠 ;(6 )亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC PLC活性。

卵巢癌SKOV3ip1多细胞团簇细胞内顺铂和紫杉醇浓度测定及意义

目的 :探讨药物渗透性与卵巢癌SKOV3ip1细胞形成的多细胞团簇化疗耐药性的关系。方法 :用液体重叠系统获得SKOV3ip1多细胞团簇 ,毛细管区带电泳法测定SKOV3ip1单层和团簇细胞胞内顺铂和紫杉醇含量。结果 :顺铂作用 2h后单层细胞和团族细胞内顺铂浓度分别为 19.2 196± 5 .3111nmol/ (L·10 6细胞 )和 2 1.994 4± 8.9776nmol/ (L·10 6细胞 ) ,差异无显著性 (P =0 .6 3)。紫杉醇作用 1h后单层细胞和团簇细胞胞内紫杉醇浓度分别为 5 .332 9± 0 .9818nmol/ (L·10 6细胞 )和 11.15 99± 0 .70 4 1nmol/ (L·10 6细胞 ) ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1)。结论 :同样条件下 ,团簇细胞胞内顺铂和紫杉醇浓度不比单层细胞内药物浓度低 ,顺铂、紫杉醇在卵巢癌SKOV3ip1多细胞团簇中的渗透因素不是引起团簇细胞化疗耐药的原因。

β-连环蛋白在胃癌中的表达及其生物学意义

[目的]研究β_连环蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。[方法]应用免疫组织化学ABC法检测75例胃癌及癌旁组织石蜡标本β_连环蛋白的表达水平。[结果]β_连环蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织 ,低分化癌组织较高分化、中分化组织β_连环蛋白的表达高 ,有淋巴结转移的组织较无转移的表达高 ,浸润程度越深表达越高。[结论]β_连环蛋白是一个与胃癌发生及发展较为相关的生物学指标 ,可能可以作为观察胃癌细胞侵袭转移的较有价值的病理指标。

肝癌组织中β-和p^(120)-连环蛋白的表达

目的 揭示连环蛋白与肝癌的发生发展的关系。方法 应用RT -PCT和免疫组织化学观察细胞黏附与信号转导分子 β 和 p12 0 -连环蛋白在正常肝组织、肝癌旁结节性肝硬化组织和肝癌组织中 p12 0 ctnmRNA的蛋白质表达情况及其与β 连环蛋白的关系。 结果 所有肝组织中均表达p12 0 ctnmRNA同工蛋白 1A和 3A。 2例正常肝组织中 β 和p12 0 连环蛋白分子表现为胞膜表达而胞质无表达 ;17例癌旁结节性肝硬化组织表现为胞膜和胞质均有表达 ,以胞质为主 ,且胞膜表达有所增强。 17例HCC组织中表现为胞膜表达明显减弱或消失 ,而胞质表达则增强。多数细胞胞膜表达呈现不连续性。结论 肝组织中可检测到p12 0 ctn同工蛋白 1A和 3AmRNA。此外 ,正常肝组织中 β 和 p12 0 连环蛋白分布在胞膜 ,对维持正常的细胞黏附和信号转导起重要作用 ;结节性肝硬化肝组织中此 2种分子出现了分布变化 ,而肝癌细胞中此 2种分子发生了明显的转位现象 。

FAK和整合蛋白α5、β1亚基在胃癌中表达的比较及其临床意义

目的 比较粘着斑激酶 (FAK)和整合蛋白 (integrin)α5、β1亚基在胃癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系及相互关系。方法 用免疫组织化学亲合素生物素法 (ABC)检测 75例胃癌及癌旁组织石蜡标本FAK和整合蛋白α5、β1亚基蛋白的表达水平。结果 FAK、整合蛋白α5亚基和整合蛋白 β1亚基的表达为 或 分别是胃癌组织 5 7%、2 9%和 2 5 % ,癌旁组织 4%、76%和 84% ;低分化胃癌组织 68%、18%和 16% ,高中分化组织 42 %、45 %和 39% ;有淋巴结转移的组织 77%、31%和 31% ,无转移的组织 36%、2 8%和 19% ;浸润程度较深的组织 68%、2 9%和 2 5 % ,浸润程度较浅的组织 19%、31%和 2 5 %。结论 FAK较整合蛋白α5、β1亚基可以更有效地衡量胃癌的发生与发展 ,FAK的表达量可作为胃癌发生、发展过程中一种较有价值的病理指标。FAK可能既是一种转化相关酶又是一种演变相关酶。