植入前遗传学筛查用于几种适应症的效率初探

目的探讨植入前遗传学筛查(PGS)用于染色体异常、反复种植失败和反复自然流产患者的效率。方法回顾性研究2015年1月到2016年3月在我中心行PGS治疗,共328个取卵周期和随后进行的263个冻胚移植周期,根据其适应症分为男方染色体异常(A组)、女方染色体异常(B组)、反复种植失败(C组)和反复自然流产(D组),分析4组患者的体外受精-胚胎发育情况、胚胎单核苷酸多态性(SNP)检测分析结果和临床结局。结果 4组患者成熟卵母细胞(MII)率、受精率、卵裂率、D3有效胚胎率均无统计学差异(P>0.05);获卵数在A组(12.93±5.73)、B组(13.17±6.65)显著高于C组(10.48±6.07)、D组(10.76±5.47),D组可进行PGS活检的胚胎数与D3有效胚胎数的比率(57.2%)显著高于A组(51.3%)、B组(48.4%)和C组(50.0%)(P均<0.05);正常核型胚胎比率C组(71.6%)、D组(58.7%)显著高于A组(39.0%)、B组(33.5%),而无可移植正常核型胚胎的周期率D组(13.5%)显著低于A组(31.3%)、B组(33.3%)、C组(29.1%)(P均<0.05);4组患者的妊娠率和流产率均无统计学差异(P>0.05)。结论三种适应症的患者实施PGS均能达到满意的临床妊娠率;夫妇染色体异常的患者最终获得正常核型胚胎的几率较低,但是有效避免了高流产率的风险;反复自然流产的患者经PGS筛选后胚胎移植可将流产率控制在较低水平(3.4%)。

卵母细胞滑面内质网聚集对卵胞浆内单精子显微注射周期妊娠和新生儿结局的影响

目的:探讨在卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)周期中,卵母细胞滑面内质网聚集(SERa)对胚胎发育情况、妊娠结局和新生儿结局的影响。方法:回顾性分析2015年1月至2020年12月的ICSI周期,根据纳入和排除标准,共纳入SERa阳性(SERa+)周期组(至少有1个卵母细胞有SERa+)291例,与同时期的1302例SERa阴性(SERa-)周期(所有卵母细胞均无SERa)作为对照组进行比较。分析两组患者的体外受精-胚胎移植(IVF-ET)实验室指标、临床结局以及新生儿情况,包括MⅡ卵母细胞率、受精率、卵裂率、临床妊娠率、种植率、流产率、活产率以及围产期并发症等。结果:(1)两组患者的年龄、不孕年限、不孕类型、体质量指数(BMI)、卵泡刺激素(FSH)、窦卵泡数(AFC)、促排方案、促性腺激素(Gn)天数、Gn剂量以及获卵数比较,差异无统计学意义(P>0.05);(2)与SERa-周期组相比,SERa+周期组的MⅡ卵母细胞率以及囊胚形成率显著增加(P<0.05);(3)与SERa-周期组相比,SERa+周期组的活产率显著降低(P<0.05),流产率显著增加(P<0.05);(4)两组患者的受精、卵裂、临床妊娠、种植率和围产期并发症比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SERa的存在对ICSI周期的胚胎发育和妊娠结局有负面影响,但仍然有一定的发育潜能和利用价值。建议胚胎学家对SERa+卵子仍应考虑加以利用,但在临床上优先考虑来自SERa-卵母细胞的胚胎用于SERa+周期的移植。

中华医学会生殖医学分会《关于胚胎移植数目的中国专家共识》解读

不孕症治疗的目标是单胎、足月、健康婴儿的诞生。辅助生殖技术(assisted reproductive technologies,ART)体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryotransfer,IVF-ET)实施过程中,为了获得更高的妊娠率,传统的做法是将多枚胚胎移植入子宫腔,由此导致了多胎妊娠的发生远远高于自然妊娠[1]。关于ART技术安全性的研究一直在进行,目前认为不良妊娠结局的增加主要与不孕群体的低生育力、多胎妊娠和ART技术操作有关[2,3],其中多胎妊娠被认为是ART的并发症之一,也是导致不良围产期结局最重要的原因。

荧光原位杂交技术在辅助核型分析中的应用价值探讨

目的:探讨荧光原位杂交技术(FISH)在辅助核型分析中的应用价值。方法:用特定位点探针对14例外周血淋巴细胞染色体检查结果不确定的病例行FISH,以期明确诊断。结果:14例病例中,13例获得确诊,1例FISH未能帮助诊断。结论:FISH能有效地对大部分辅助核型疑难病例进行确诊,但需合理选择探针。

7p部分三体综合征的表型和基因型关系研究

目的:探讨7p部分三体综合征的起源,分析患者表型和基因型的关联性,同时研究单核苷酸多态-微阵列比较基因组杂交技术(SNP aCGH)在检测亚细胞遗传学改变中的应用价值。方法:对外院核型报告正常的1例特殊面容、低智合并先心患儿复查染色体,G带发现其4q35.2区域疑似有额外片断附着,进一步用SNP aCGH进行全基因组扫描,并用4号染色体长臂末端和7号染色体短臂末端探针与患儿淋巴细胞杂交(FISH)以验证SNP aCGH结果,同时对患儿进行家系调查及部分成员染色体检查。结果:患儿核型46,XX,add(4)(q35.2)?全基因组扫描显示,患儿7p21.1-pter区域有20.78Mb的重复,而4q35.2-qter区域有3.24Mb的缺失。FISH发现,患儿外周血淋巴细胞含3个拷贝的7号染色体短臂末端和1个拷贝的4号染色体长臂末端。家系调查发现,患儿父亲及祖父均为46,XY,t(4;7)(q35.2;p21.1)。综合以上结果,确定患儿核型为46,XX,der(4)t(4;7)(q35.2;p21.1)pat,异常核型由父亲传递,系精子在减数分裂中通过邻近分离-I所形成的不平衡产物。患儿不平衡片断包含与颅骨发育异常相关的TWIST基因、与先心相关的MOX2基因以及与颅面部异常特征相关的ACTB基因。结论:亲代平衡易位导致的子代小片断不平衡是7p部分三体综合征等出生缺陷的重要原因;SNP aCGH是鉴别小片断不平衡的有效手段;7p部分三体综合征患者异常表型可能与TWIST、MOX2、ACTB等基因有关。

齐聪教授中医辨治结合不同周期辅助生殖技术的治疗策略

体外受精与胚胎移植成功率仅28.5%左右,中医药联合辅助生殖技术能有效提高妊娠率,应用前景良好,但在传统中医学中并无相关记载,且目前尚未形成统一的诊疗体系。齐聪教授根据多年临床经验和试管不同周期的各个特点,予以健脾养血、健脾补肾、补肾活血、补肾安胎、凉血止血等辩证用药;间歇期则注重辨病治疗;并倡导夫妻同治、针药并治,充分体现了预培其损、同病异治、三因制宜的中医特色。

断裂点精确定位在平衡易位胚胎染色体分析中的应用

目的尝试一种新的精确平衡易位断裂点的分析方法,以便区分染色体正常型和平衡易位携带型胚胎。方法基于两例染色体平衡易位携带同胞兄弟,利用基因芯片测序结合荧光强度比(LRR)、B等位频率(BAF)、单体型连锁分析(PGH)和基因型识别两对夫妇(夫妇A、B)、男方母亲及胚胎的染色体结构,尽可能精确定位以缩小平衡易位断裂点的识别范围;参考胚胎各染色体拷贝数变异(CNV)检测与PGH结果,区分不平衡易位型、正常型与平衡易位携带型胚胎;筛选染色体完全正常的单囊胚植入,妊娠后行产前诊断。结果将平衡易位断裂点的识别范围由±3 Mb大小缩小至412 Kb(chr14:69340569~69752603)。最终为夫妇A确定了2枚可优先移植的胚胎(1-3和1-6号胚胎),为夫妇B确定了4枚可优先移植的胚胎(2、3、5和7号胚胎)。辅助生殖技术(ART)助孕后,两对夫妇分别选择染色体结构正常的1-3号和5号单囊胚植入后成功妊娠,并最终足月顺利分娩健康宝宝。结论LRR、BAF、PGH和基因型的结合分析可显著提高平衡易位断裂点定位的准确性,可在植入前区分染色体正常型和易位携带型胚胎。

高龄孕妇生育唐氏综合征患儿机制的研究进展

唐氏综合征由21号染色体部分或全部基因重复引起，其发病率随孕妇年龄增加而显著升高，但高龄孕妇生育唐氏综合征患儿的机制尚未阐明，相关研究包括染色体配对及重组异常、纺锤体组装检查点异常、“生物学衰老”假说及端粒长度减少、黏连蛋白异常、内分泌环境变化、卵母细胞镶嵌选择模型、维持DNA稳定性相关基因的单核苷酸多态性等。本文对上述研究进行综述。

影响男性生育力的部分生活因素

1．烟酒众所周知，长期烟酒会对肺部和胃肠等带来不利后果。阿根廷有家生殖中心收集3967人追踪10年，分析炯酒对人精子的影响认为：单纯吸烟或喝酒的男性精液状况与完全不喝酒抽烟的相比完全没有差别。但如果既常抽烟又常喝酒的男性在精液量、精子浓度和活动率都比一般人差了许多。

孕中期羊水细胞染色体核型分析及其异常核型发生率的比较

目的分析孕中期羊水细胞染色体核型及比较不同异常核型的发生率，并对各种异常核型的临床意义进行探讨。方法1998年9月至2010年11月在复旦大学附属妇产科医院集爱遗传与不育诊疗中心行羊水细胞染色体检查的孕妇共13648例，抽取并培养成功的羊水标本共计13795份，即13795个胎儿获得核型诊断，对上述胎儿根据其母亲（孕妇）不同检查指征进行分组：当孕妇年龄≥35岁时为高龄孕妇组（4065个）；血清学筛查提示高危时为血清筛查高危组（6462个）；超声筛查出现异常征象时为超声异常征象组（1539个）；已知夫妇中有一方为染色体异常时为夫妇染色体异常组（108个）；除此之外，其他胎儿列为其他因素组（1621个）。采用羊水细胞培养法对各组胎儿进行染色体核型分析，并用荧光原位杂交技术对78个≥26孕周的胎儿行常见非整倍体快速诊断，对153个核型异常胎儿的父母进行淋巴细胞核型分析。结果（1）各组异常核型分类及其构成：13795个胎儿中共发现异常核型388个，异常核型发生率为2．813％（388／13795）。388个异常胎儿中，非整倍体最多，为59．8％（232／388）；常染色体结构异常为24．7％（96／388）；嵌合体为12．4％（48／388）；其他较少见的异常核型包括标记染色体为1．3％（5／388），性染色体结构异常为1．0％（4／388），三倍体为0．8％（3／388）。除了夫妇染色体异常组，其他各组均以非整倍体占绝大多数，有4例罕见的非整倍体，分别出现在高龄孕妇组、超声异常征象组及血清筛查高危组。超声异常征象组异常核型种类最多，而夫妇染色体异常组其胎儿染色体异常种类最集中（常染色体结构异常）。嵌合体主要分布在血清筛查高危组，占该组异常核型的20．0％（29／145）。（2）异常核型种类及发生率：异常核型种类中以21三体最为常见，占全部异常核型的35．6％（138／388），其次为常染色体平衡性结构重排为20．6％（80／388）、嵌合体为12．4％（48／388）、18三体为11．3％（44／388），其他较常见的异常核型包括常染色体非平衡性结构重排和45，x0，各为4．1％（16／388），47，XXY为3．9％（15／388）。（3）父母淋巴细胞核型分析：153个胎儿进行了其父母淋巴细胞的核型分析，并最终确定了胎儿异常核型来源：家族性异常58个，新发生的异常95个。78个胎儿的荧光原位杂交技术诊断结果与G显带核型全部一致，其中2个为21三体。结论不同检查指征孕妇的胎儿异常核型的构成不同；孕中期胎儿异常核型种类繁多，致畸风险与异常核型种类有关。

241例胎儿侧脑室增宽的结局随访

目的探讨不同程度胎儿侧脑室增宽的妊娠结局和预后。方法研究对象为复旦大学附属妇产科医院2004年1月至2013年12月共241例因B超诊断为胎儿侧脑室增宽行多科会诊的病例。根据胎儿侧脑室宽度，将这些病例分为轻度组（≥10～〈12mm，151例）、中度组（≥12～〈15mm，56例）和重度组（≥15mm，34例）。记录B超随访、新生儿检查结果及出生后的随访资料。采用z。检验或Fisher精确概率法进行统计学分析，率的多重比较采用Bonferroni方法校正。结果241例孕妇中，91例（37．8％）终止妊娠，其余150例（62．2％）继续妊娠至分娩。这150例孕妇中，孕期胎儿侧脑室宽度缩小者42例（28．0％），侧脑室宽度无明显变化者108例（72．O％）；轻度组105例，中度组30例，重度组15例。42例侧脑室宽度缩小者中，轻度组31例患儿侧脑室宽度恢复正常，其中l例生后出现有耳听力异常；中度组10例患儿中，9例侧脑室宽度恢复正常，1例缩小为轻度侧脑室增宽，这10例生后均未见明显异常；重度组1例的左、右侧脑室宽度分别由16．0和18．0mm缩小至14．0和16．0mm，生后未见明显异常。对108例侧脑室宽度无明显变化者随访发现，轻、中、重度组出现异常结局的比例分别为14．9％（11／74）、10．0％（2／20）和6／14。孕期胎儿侧室宽度缩小者的预后明显优于侧脑室宽度无明显变化者f2．4％（1／42）与17．6％（19／108），x^2=4．940，P=0．026]。150例继续妊娠者中，轻、中、重度组出现异常结局的比例分别为11．4％（12／105）、6．7％（2／30）和6／15，差异有统计学意义（矿=6．908，P=0．032）。其中，中度和轻度组分别与重度组相比，出现异常结局的比例差异均有统计学意义（x^2=4．929，P=0．026；x^2=5．266，P=0．022）。241例孕妇中，因高龄、胎儿侧脑室增宽或唐氏综合征筛查高危等原因行染色体检查者共57例，5例（8．8％）发现异常。轻、中和重度组染色体异常的比例分别为7．0％（3／43）、1／8和1／6。29例孕妇检查发现1例风疹病毒IgM阳性，2例巨细胞病毒IgM阳性，1例弓形虫IgM阳性。结论胎儿侧脑室增宽程度及宫内转归与妊娠结局和预后相关。

不同助孕方式中2318例早孕期自然流产物异常核型比较

目的 :探讨辅助生殖技术是否会增加胚胎染色体异常的风险。方法 :根据不同受孕方式,将2 318例早孕期流产的患者分成体外受精(in vitro fertilization,IVF)组(n=310)、卵细胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperminjection,ICSI)组(n=86)、自然妊娠(natural conception,NC)组(n=1 922)3组,分析比较3组的异常核型发生率,分析患者年龄与非整倍体发生率间的关系,以及单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism-based arrays,SNP-array)、下一代测序(next generation sequencing,NGS)、传统细胞培养结合G显带这3种不同检测方法的异常核型检出率。结果:2 318例流产绒毛中,1 420例存在染色体异常,异常率为61.26%,其中异常核型以非整倍体占绝对多数,共发现1 040例,发生率为44.86%(1 040/2 318),占异常核型的73.24%(1 040/1 420),涉及除1号染色体以外所有染色体,且以16-三体发生频率最高,其次为22-三体和45,X单体。IVF组、ICSI组及NC组间的流产物染色体总体异常率差异无统计学意义(57.74%、55.81%、62.02%,P=0.207)。但ICSI组的三倍体发生率明显低于NC组及IVF组(0、7.23%、7.42%,P=0.035)。当根据流产患者年龄分组时,高龄组(≥35岁)的非整倍体发生率明显高于低龄组(<35岁)(60.25%比40.07%,P<0.01)。SNP-array技术、NGS及核型分析对异常核型的总体检出存在差异(62.94%比53.13%、59.92%,P=0.035),SNP-array技术对非平衡性结构异常、三倍体、微重复和微缺失的检出率最高,还能检出单亲二倍体(uniparental disomy,UPD)和杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),而核型分析对四倍体的检出率最高。结论:胚胎染色体异常是自然流产的最重要原因;IVF不增加胚胎染色体异常的发生率,但ICSI有增加胚胎性染色体非整倍体风险的趋势。随着母亲年龄的增长,胚胎非整倍体的发生率显著升高。以SNP-array和NGS为代表的分子检测技术有望成为流产物染色体检测的一线方法。

荧光原位杂交技术在产前诊断中的应用价值探讨

目的探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在羊水产前诊断中的应用价值。方法 2644例符合羊水产前诊断指征的孕妇在抽羊水行染色体检查的同时,用常见非整倍体探针对未培养的羊水间期细胞行FISH检查,其中1661例唐氏高风险孕妇采用LSI 21(红色)、71例18三体高风险孕妇采用CEP 18(天蓝色)、912例高龄或超声异常征象及其它早孕用药、不良孕史等因素孕妇采用LSI 21(红色)/LSI 13(绿色)/CEP 18(天蓝色)/CEP X(绿色)/CEP Y(红色)探针,对2644例羊水核型分析和FISH结果进行比较。结果 FISH检出染色体数目异常102例,检出率3.9%(102/2644),核型分析发现异常病例124例,检出率4.7%(124/2644),两者比较无显著差异(P>0.05)。124例异常核型中99例为染色体数目异常,占异常核型的79.8%(99/124),FISH全部检出,其中97例两种方法结果完全一致,两例结果不符(一例FISH:18三体,核型分析:三倍体;另一例FISH:13、18、21、X三体,核型分析:三倍体)。124例异常核型中22例染色体结构异常,占异常核型的17.7%(22/124),分别为:罗氏易位5例,相互易位8例,倒位4例,X长臂等臂1例,1号染色体部分重复1例,标记染色体1例,20号染色体长臂双着丝粒1例,9号染色体含不明来源物1例,FISH未能检出,假阴性率0.8%(22/2644)。124例异常核型中3例存在染色体结构和数目双重变化,为罗氏不平衡易位,FISH检出其数目异常。结论 FISH在羊水产前诊断中对于常见非整倍体具有快速、准确的特点,但需严格掌握指征。

染色体核型分析的技术进展及应用原则

染色体和染色质是同一种物质在细胞周期不同阶段的不同存在形式,是细胞核中最重要的组成部分,也是基因的主要载体。细胞从间期到分裂期过程中,染色质DNA高度螺旋化,使几厘米长的DNA形成几微米长的染色体,其长度约为原来的DNA形成几微米长的染色体．其长度约为原来的万分之一。

两例父源性6号染色体单亲二体的产前诊断

目的对2例父源性6号染色体单亲二体（paternal uniparental disomy of chromosome 6，pUPD6）进行产前诊断。方法对胎儿细胞进行原位培养和G显带染色体核型分析，应用单核苷酸多态性微阵列芯片对胎儿样本及父母双方的外周血DNA进行分析。结果两例胎儿均为正常男性核型，芯片检测显示其均为pUPD6。结论pUPD6可导致1型新生儿短暂性糖尿病。隐性致病突变的纯合状态、印记基因障碍、对胎盘功能的影响是单亲二体产前诊断和遗传咨询中应考虑的主要致病因素。

接种疫苗与怀孕安全

近日，门诊中碰到一位女士匆忙前来咨询，因本人快进入试管周期，但其先生需要去某地区出差，时间紧，没有和她商量就打了黄热病及霍乱疫苗，她担心这样做会对试管妊娠会产生不良影响。类似的情况门诊中经常会碰到，但由于疫苗种类繁多，加上生殖医生在疫苗安全方面的知识受限，无法给病患较好的咨询。因此将有关常见部分疫苗安全和注射原则提供给大家，供大家参考。

正解激素六项报告,快速了解你的内分泌

激素六项检测,又称“性激素六项检测”“生殖激素六项检测”,是生殖中心常规的基础检查项目。医生可以通过测定各项性激素水平来了解女性的卵巢功能,诊断与生殖内分泌失调相关的疾,病。“E2”“P”“LH”“FSH”“PRL”“T”,乍一看是不是觉得每个字母都不陌生?但是真要理解字母背后的含义恐怕就很难了。本期“女性健康”就带您解读这六项激素的“密码”。