目的:探究分枝杆菌脂蛋白LprO对分枝杆菌-巨噬细胞相互作用的影响。方法:使用在线网站分析耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.smeg)LprO蛋白的CD4^(+)T、CD8^(+)T以及细胞毒性T细胞(Cytotoxic T Lymphocytes,CTL)抗原表位数量,评...目的:探究分枝杆菌脂蛋白LprO对分枝杆菌-巨噬细胞相互作用的影响。方法:使用在线网站分析耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.smeg)LprO蛋白的CD4^(+)T、CD8^(+)T以及细胞毒性T细胞(Cytotoxic T Lymphocytes,CTL)抗原表位数量,评估LprO蛋白的免疫原性。构建lprO过表达的重组耻垢分枝杆菌M.smeg::pMV261-lprO,以转入空载质粒pMV261的M.smeg::pMV261菌株作为对照,分析过表达lprO对M.smeg菌株以及细菌-巨噬细胞互作的影响。结果:LprO蛋白中预测的CD4^(+)T、CD8^(+)T以及CD8^(+)CTL细胞表位数与Ag85A蛋白相当,具有较好的研究潜力。经实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证,M.smeg::pMV261-lprO菌株中,lprO表达量显著高于对照菌株,过表达菌株构建成功。lprO过表达不改变M.smeg菌落形态、细菌形态、细菌体外生长能力和巨噬细胞内生长能力。细菌侵染巨噬细胞Raw264.7,流式细胞技术检测显示,M.smeg::pMV261-lprO在细胞侵染前期能显著促进巨噬细胞凋亡。结论:分枝杆菌LprO蛋白可能具备与Ag85A蛋白相当的T细胞表位数,能在激起宿主的免疫反应中发挥较为重要的作用。在M.smeg中过表达LprO后能诱导侵染前期的巨噬细胞凋亡,参与细菌-宿主相互作用。综上,LprO蛋白或许有作为新型疫苗成分或药物靶标的潜力。展开更多
