谈系统发生树建立的分子标准

随着进化生物学以及生物信息学的发展 ,研究不同物种间进化关系的方法也有了新的进展。其中分子进化方法使得系统发生树的建立更加简便和精确。几种系统发生树的建树方法及相关分子标准目前比较流行。。

中国人共刺激信号抑制配体表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

目的 :构建CTLA 4基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中表达CTLA 4蛋白。方法 :用PCR方法获得中国人CTLA 4基因第二外显子 ,构建重组表达质粒pPBCTLA ,转化大肠杆菌DH5α ,以PCR和RFLP方法筛选阳性克隆 ,以免疫印迹技术检测表达产物。结果 :阳性重组子在DH5α中经温度诱导可表达CTLA 4蛋白 ,分子量与理论值相符 (约 12kD)。进一步分析表明 ,CTLA 4蛋白主要以包涵体形式存在。Western blot结果证实 ,12kD的表达条带可与标准羊抗人CTLA 4IgG起特异反应。淋巴细胞转化实验结果表明该蛋白具有明显的免疫抑制作用。结论 :用基因工程技术获得中国人CTLA 4基因表达蛋白 ,为进一步研究CTLA 4的生物学功能及研制抗CTLA 4抗体奠定了基础。