中药提取物治疗男性不育研究进展

男性不育症是男科常见病之一,近年来呈现不断上升趋势。目前,西医对男性不育症的治疗尚缺乏理想疗效,而中医药在治疗男性不育症方面发挥了一定的优势,获得了满意的疗效。本文就中药提取物治疗男性不育症作一综述:枸杞多糖可通过促进损伤细胞的增殖和上调生精细胞中SCF与c-kit表达来干预雷公藤多苷对生精细胞的损伤过程,从而保护雄性生殖功能。五味子多糖对环磷酰胺所致大鼠生精障碍具有明显的治疗作用,其可以使不育大鼠精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义,且呈剂量依赖性,其机制可能与恢复下丘脑-垂体-性腺轴的调控功能有关。淫羊藿苷类成分和黄酮类成分都对男性不育症有疗效,其中淫羊藿苷对环磷酰胺诱导生精障碍的睾丸具有改善睾丸生精小管结构、减少生殖细胞凋亡、促进精子发生和间质细胞分泌睾酮的功能。菟丝子黄酮能保护睾丸组织的曲精管、生精细胞、间质细胞,可以提高大鼠睾丸组织表皮生长因子(EGF)m RNA及蛋白表达,从而起到保护睾丸组织及生精功能的作用。

子宫内膜癌药物治疗研究进展

近年来,子宫内膜癌(EC)在世界范围内的发病率均有上升趋势。随着我国经济高速发展,人们生活习惯和饮食结构西化,肥胖人群增多,以及非正规激素替代治疗、多囊卵巢综合征、不孕和绝经延迟等高雌激素或长期雌激素刺激导致EC发病率明显上升,严重威胁女性健康。根据EC临床病理特征及其分子生物学特点,国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)将其分为两型:其中Ⅰ型为雌激素依赖型,约占80%,该类患者的总体预后较好,10年生存率高达85%;Ⅱ型为非激素依赖型,预后相对较差。对于早期、高分化、雌激素依赖型的年轻(<40岁)且有生育需求的患者,以孕激素为主的保守治疗能够维持其生育功能,辅以助孕技术可获得一定的妊娠率。晚期EC对他莫昔芬联合甲羟孕酮的反应率达33%。而对于复发或转移EC,目前常用的有孕激素(反应率11%~56%),或他莫昔芬联合甲地孕酮、促性腺激素释放激素类似物(Gn RH-a,11%)、选择性雌激素受体调节剂(25%~31%)、芳香化酶抑制剂。随着对肿瘤分子机制和信号转导通路研究的深入,EC药物治疗的新策略转向靶向药物,但目前针对EC的靶向药物尚处于临床前研究阶段:m TOR的抑制剂依维莫司(everolimus)联合来曲唑的缓解率为32%;黄体生成激素释放激素(LH-RH)激动剂AEZS-108对LH-RH受体阳性的复发EC的Ⅲ期临床随机试验正在进行。另一项关于PARP的抑制剂BMN673针对复发EC的Ⅱ期临床试验也在进行中。结合靶向药物的高选择性和低毒性,临床应用前景乐观。

枸杞多糖对低雄激素不育模型大鼠影响的药效观察和作用机制研究

目的通过观察枸杞多糖对低雄激素不育大鼠生殖损伤的改善作用,评价枸杞多糖治疗低雄激素雄性不育的药效和可能的作用机制。方法将雄性成年SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、枸杞多糖低剂量和高剂量组,其中造模给药方式为灌胃给予度他雄胺40 mg/kg,1次/d,连续28 d;在造模的第15天开始枸杞多糖干预灌胃给药,高低剂量组分别给予枸杞多糖80 mg/kg和40 mg/kg,模型对照组给予等量溶媒,1次/d,连续14 d。给药结束时检测睾丸附睾组织学、超微结构、精子活力、交配雌鼠受孕率、血清雄激素水平、附睾雄激素受体(AR)和核转录因子(NF-κB)蛋白表达。结果与模型对照组比较,枸杞多糖高剂量组精子活率和前向运动率显著升高(P<0.05);枸杞多糖低剂量组和高剂量组交配雌鼠受孕率分别为37.5%和62.5%,较模型对照组分别上升25%和50%;模型对照组附睾可见附睾上皮连接出现断裂,管内精子聚集;枸杞多糖低剂量组大鼠附睾上皮结构和精子排列有一定的恢复,高剂量组附睾上皮组织和精子基本恢复正常;枸杞多糖给药组血清双氢睾酮(DHT)水平较模型对照组显著升高(P<0.05,P<0.01);枸杞多糖给药组AR和NF-κB蛋白表达较模型对照组显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论枸杞多糖可以改善低雄激素附睾不育大鼠的生育能力,其作用机制可能与升高血清DHT水平、促进AR和NF-κB表达、发挥雄激素样活性有关。

坤泰胶囊对去势大鼠和幼兔子宫影响的实验研究

目的考察坤泰胶囊对去势大鼠和幼兔子宫的影响。方法手术法摘除大鼠卵巢,给予不同剂量坤泰胶囊后,观察大鼠子宫及内膜的厚度的变化。蛋白印迹法检测各组大鼠子宫组织中血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞增殖核抗原(Ki-67)的表达情况。幼兔连续给予苯甲酸雌二醇6 d后,给予坤泰胶囊,取子宫进行病理切片观察,分析坤泰胶囊对幼兔子宫内膜的影响。结果与模型组相比,中、高剂量的坤泰胶囊能够显著性降低大鼠的子宫脏器系数及内膜厚度(P<0.05),高剂量的坤泰胶囊能够降低Ki-67的表达(P<0.05),坤泰胶囊低、中剂量组的VEGF表达明显升高(P<0.05)。坤泰胶囊对子宫组织中PCNA的表达无显著性影响。坤泰胶囊低、中剂量组的幼兔子宫腺体增多,Mcphail指数升高。结论坤泰胶囊对去势大鼠无雌激素样的活性,但能促进幼兔内膜的转化,呈现出较弱的孕激素活性。

祛膜颗粒在去势大鼠模型激素样活性的实验研究

目的初步研究祛膜颗粒在去势大鼠模型的激素样活性作用。方法制备去势大鼠动物模型,灌胃给予祛膜颗粒(5.5,11,22 g生药/kg)连续10 d后,观察各组大鼠阴道上皮角化细胞、子宫壁厚度、子宫水分摄取增加百分率的变化;采用化学发光法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平;采用免疫组化法观察子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的变化。结果祛膜颗粒能使去势大鼠阴道涂片出现角化细胞;祛膜颗粒(5.5,11 g生药/kg)子宫水分摄取增加百分率升高,其中祛膜颗粒(11 g生药/kg)明显升高(P<0.05);祛膜颗粒(5.5,11,22 g生药/kg)子宫壁厚度升高,其中祛膜颗粒(11 g生药/kg)明显升高(P<0.05)。祛膜颗粒(5.5和11 g生药/kg)能升高血清E2水平(P>0.05),祛膜颗粒(5.5,11和22 g生药/kg)能降低血清P水平(P>0.05);祛膜颗粒能增加子宫组织ER、PR的表达量。结论祛膜颗粒在一定剂量下可表现出较弱的雌激素样活性。

孕三烯酮胶囊多次给药在巴马小型猪体内的药代动力学研究

目的建立快速灵敏的HPLC-MS/MS法测定巴马小型猪血浆中孕三烯酮的浓度,并研究孕三烯酮胶囊在巴马小型猪体内的药代动力学特征。方法以巴马小型猪为实验动物,连续给药12周,每周给药2次,于给药后不同时间点采集血样。通过测定多次给药后小型猪血浆中孕三烯酮的浓度,计算其药代动力学参数。测定血浆样品以孕二烯酮为内标,经环己烷液液萃取后进行LC-MS/MS分析。质谱检测采用ESI正离子模式,选择检测离子反应对为m/z 309.2→241.1(孕三烯酮),m/z 311.2→109.1(孕二烯酮)。结果孕三烯酮在0.1~10 ng·m L-1浓度范围内线性良好(r=0.9999),定量下限为0.1 ng·m L-1。提取回收率均高于83.14%,日间、日内RSD均小于11.27%,专属性良好,在本实验涉及的条件下样品稳定。8只小型猪首次给药后Cmax为(2.85±0.96)μg·L-1,Tmax为(2.06±0.62)h,t1/2为(8.43±4.13)h,AUC(0-85)为(23.81±8.62)μg·L·h-1,AUC(0-∞)为(24.36±8.73)μg·L·h-1,MRT(0-85)为(8.40±2.44)h,MRT(0-∞)为(9.81±3.88)h;末次给药后Cmax为(2.70±0.55)μg·L-1,Tmax为(1.69±0.65)h,t1/2为(8.51±3.72)h,AUC-(0-85)为(17.71±4.89)μg·L·h1,AUC(0-∞)为(18.51±4.48)μg·L·h-1,MRT(0-85)为(8.54±3.50)h,MRT(0-∞)为(9.98±4.41)h。多次给予孕三烯酮胶囊后2 h血药浓度相差不大,且用药后无不良反应,安全性较高。结论该方法准确、快速、灵敏、专属性强,适用于动物实验及临床上测定血浆中孕三烯酮的浓度及其药代动力学研究。

孕三烯酮胶囊多次给药在巴马小型猪体内的药代动力学研究

目的:建立快速灵敏的HPLC-MS/MS法测定巴马小型猪血浆中孕三烯酮的浓度,并研究孕三烯酮胶囊在巴马小型猪体内的药代动力学特征。方法:以巴马小型猪为实验动物,连续给药12周,每周给药2次,于给药后不同时间点采集血样。通过测定多次给药后小型猪血浆中孕三烯酮的浓度,计算其药代动力学参数。测定血浆样品以孕二烯酮为内标,经环己烷液液萃取后进行LC-MS/MS分析。色谱柱:Agilent ZORBAX Extend-C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm);流动相:水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱;流速:0.40 m L·min^(-1);进样量:20μL;柱温:35℃。质谱检测采用ESI正离子模式,扫描方式为多重反应监测(MRM)模式,选择检测离子反应对为m/z 309.2→241.1(孕三烯酮),m/z 311.2→109.1(孕二烯酮)。结果:孕三烯酮在0.1~10 ng·mL^(-1)浓度范围内线性良好(r=0.999 9),定量下限为0.1 ng·mL^(-1)。提取回收率均高于83.1%,日间、日内RSD均小于11.3%,专属性良好,在本实验涉及的条件下样品稳定。8只小型猪首次给药后C_(max)为(2.85±0.96)μg·L^(-1),T_(max)为(2.06±0.62)h,t_(1/2)为(8.43±4.13)h,AUC_(0-85)为(23.81±8.62)μg·L·h^(-1),AUC_(0-∞)为(24.36±8.73)μg·L·h^(-1),MRT_(0-85)为(8.40±2.44)h,MRT_(0-∞)为(9.81±3.88)h;末次给药后C_(max)为(2.70±0.55)μg·L^(-1),T_(max)为(1.69±0.65)h,t_(1/2)为(8.51±3.72)h,AUC_(0-85)为(17.71±4.89)μg·L·h^(-1),AUC_(0-∞)为(18.51±4.48)μg·L·h^(-1),MRT_(0-85)为(8.54±3.50)h,MRT_(0-∞)为(9.98±4.41)h。结论:该方法准确、快速、灵敏,专属性强,适用于动物实验及临床上测定血浆中孕三烯酮的浓度及其药代动力学研究。多次给予孕三烯酮胶囊后2 h血药浓度相差不大,且用药后无不良反应,安全性较高。

液质联用法同时测定新西兰兔血浆中左炔诺孕酮和炔雌醇及其药动学

目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)测定新西兰兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)含量的方法,并研究LNG/EE避孕贴剂多次给药后新西兰兔体内的药动学特征。方法 6只雌性新西兰兔给予LNG/EE避孕贴(5 cm×4 cm,标示量为LNG 5.35 mg,EE 0.11 mg),1次/3 d,连续给药10次,分别于给药后不同时间点进行耳缘静脉采血,血浆样品经丹酰氯衍生化后,采用液质联用方法(HPLC-MS/MS)测定血浆中LNG(内标孕三烯酮)和EE(内标氘代炔雌醇)的血药浓度,并采用DAS3.0软件计算主要药代动力学参数。结果 LNG的线性范围为0.1~20μg·L-1,最低定量限为0.1μg·L-1,提取回收率均大于92%,日内、日间精密度(RSD)均小于15%。首次给药后LNG的药代动力学参数:Cmax为(8.10±2.38)μg·L-1,Tmax为(2.38±1.45)h,AUC(0-t)为(142.35±36.99)μg·L-1·h-1;末次给药后LNG的药代动力学参数:Cmax为(7.05±1.07)μg·L-1,Tmax为(2.71±1.83)h、AUC-(0-t)为(141.95±22.31)μg·L1·h-1。EE的线性范围为0.02~5μg·L-1,最低定量限为0.02μg·L-1,提取回收率均大于85%,日内、日间精密度(RSD)均小于15%。首次给药后EE的药代动力学参数:C-max为(0.18±0.04)μg·L 1、Tmax为(2.50±1.30)h、AUC(0-t)为(2.65±0.56)μg·L-1·h-1;末次给药后EE的药代动力学参数:Cmax为(0.17±0.07)μg·L-1、Tmax为(2.17±0.26)h、AUC-1(0-t)为(2.02±0.82)μg·L·h-1。结论HPLC-MS/MS法灵敏,准确,可用于LNG和EE同时测定研究,新西兰兔多次给予避孕贴后体内血药浓度无蓄积。