几种快速提取新生隐球菌DNA的方法

目的 探讨几种快速提取新生隐球菌DNA方法的效果。方法 分别用玻璃珠机械破裂法、酶消化法、高渗剂破裂法及三法联合法提取有荚膜的新生隐球菌B 3 50 1野生株DNA ,用联合法提取 5种血清型新生隐球菌标准株的DNA ,用紫外分光光度计检测提取DNA的浓度和纯度。结果 4种方法抽提 2ml新生隐球菌培养液 (菌体数约为 1×10 8个 /ml) ,可获得DNA的量约是 64～ 2 0 3 μg。酶消化法、高渗剂破裂法及三法联合法抽提的DNA ,其OD2 60 /OD2 80比值均小于 1.8。结论 除玻璃珠机械破裂法外 ,酶消化法、高渗剂破裂法 ,以及三法联合法均可用于快速抽提新生隐球菌的DNA。

T细胞免疫耐受研究现状与探讨

免疫系统的耐受现象一直是困扰免疫学家的一大难题。当人们发现免疫系统可以通过细胞方式与体液方式识别外来抗原 ,并产生细胞毒作用或形成特异性与抗原结合的抗体来消灭外来抗原时 ,不禁迷惑 :为什么机体内有如此多的抗原却不会引起免疫系统的应答 ,即有自身耐受现象。为此科学家们开始了对免疫耐受机制展开了研究 ,并由此找到耐受的两种不同方式 :即胸腺选择形成的中枢耐受及外周耐受。

CAP59荚膜相关基因最大外显子序列用于新生隐球菌分型的探讨

目的 探讨CAP5 9基因最大外显子序列对新生隐球菌进行分型的可行性。方法 根据CAP5 9基因最大外显子序列设计 1对引物 ,对新生隐球菌 5个血清型菌株进行PCR扩增和测序 ,用GenBank数据库分析序列的差别 ,Phylip3.6a3软件处理数据并绘制种系进化树 ,选择一定数量的新生隐球菌临床分离株和其他致病真菌进行临床验证。结果 新生隐球菌不同血清型菌株的CAP5 9最大外显子序列存在差别 ,临床验证显示CAP5 9基因最大外显子对受试菌株分型结果与免疫学分型结果全部符合。结论 以所设计引物扩增的基因可以作为新生隐球菌分型和检测的分子生物学工具。