先天性心脏缺损相关NR2F2基因新突变研究

目的:探索先天性心脏缺损(CHD)相关NR2F2基因新突变。 方法:入选104例中国汉族CHD患者和208名匹配的非CHD对照者。对全部入选对象的NR2F2基因的编码区、剪接位点及部分非翻译区进行聚合酶链反应-测序分析。将所测序列与核苷酸数据库中公布的NR2F2序列进行对比分析以发现NR2F2基因突变。运用计算机软件ClustalW2分析突变氨基酸进化上的保守性,应用PROVEAN、MutationTaster和PolyPhen-2软件预测突变的致病性。 结果:在1例散发性动脉导管未闭合并室间隔缺损患者中发现了1个NR2F2基因新突变,即c.1189C>T(p.Arg397Trp)突变。该错义突变不存在于208名非CHD对照者。多物种NR2F2蛋白的氨基酸序列比对分析显示被改变氨基酸在进化上完全保守,致病性预测表明所识别的NR2F2基因突变是致病性突变。 结论:c.1189C>T是CHD相关NR2F2基因新突变,对CHD的早期防治具有潜在的意义。

一例先天性心脏缺损相关ISL1基因新变异的发现及功能分析

目的分析与先天性心脏缺损(congenital heart defect,CHD)相关的ISL1基因变异及其功能特点。方法收集194例CHD患者和232名正常对照的临床资料和外周血样,提取基因组DNA。测序分析全部对象的ISL1基因的编码外显子及侧翼的部分内含子。构建野生型ISL1基因表达质粒ISL1-pcDNA3.1,通过定位诱变获得相应的变异体。应用脂质体将基因表达质粒转染CHO细胞,应用双荧光素酶报告基因分析试剂研究变异型ISL1的功能特性。结果在1例散发性房间隔缺损患者中检测出1种新的杂合性ISL1基因变异c.499C>T(p.Q167X)。功能研究表明变异型ISL1对靶基因MEF2C启动子的转录激活功能丧失。结论发现了一个与CHD相关的ISL1基因新变异,ISL1基因的缺陷可能为部分CHD的分子病因。