不同激活状态的巨噬细胞培养上清液对7721肝癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究不同激活状态的巨噬细胞培养上清液对7721肝癌细胞株(SMMC7721)增殖和迁移的影响。方法人类单核白血病细胞(THP-1)经佛波酯(PMA)诱导成为巨噬细胞(UaM),再分别采用脂多糖(LPS)诱导成为经典活化的巨噬细胞(M1),白细胞介素(IL-4+IL-13)诱导成为替代性活化的巨噬细胞(M2);用ELISA法检测其IL-10和IL-12的表达水平,定量PCR法检测TNF-α、CCL3、iNOS、AMAC-1、CCL22和Arg-1的表达;用CCK8法和Transwell试验检测UaM、M1和M2培养上清液对SMMC7721增殖和迁移的影响。结果 M1诱导组IL-12、TNF-α、CCL3和iNOS表达升高,M2诱导组IL-10、AMAC-1、CCL22和Arg-1表达升高。M1诱导组SMMC7721细胞增殖活力均明显低于UaM组和M2组(F=12.135,P<0.01);UaM和M2诱导组SMMC7721细胞的增殖活力在浓度比为1∶1时无统计学差异(F=5.356,P=0.293),在其他浓度组均存在统计学差异(P<0.01);SMMC7721在各组间穿过Transwell基底膜的细胞数量均存在差异(F=105.442,P<0.01)。结论 M1培养上清液能抑制SMMC7721的增殖和迁移,M2培养上清液能促进SMMC7721的增殖和迁移。

肿瘤中糖蛋白糖链结构与功能变化的研究进展

在多种多样的蛋白质翻译后加工中,糖基化修饰是最普遍的一种,约50%的蛋白质是糖基化修饰的。如果把O连接的葡萄糖胺修饰的细胞核内蛋白和胞质蛋白包括进来,其比例会更多;尤其是那些涉及细胞与细胞相互作用的许多分子,它们都是糖蛋白。糖蛋白糖链参与诸如细胞生长、细胞黏附、肿瘤转移等许多重要的生理和病理过程。以糖蛋白N-糖链为例,分支结构可从蛋白表面伸出〉3 nm的大型的具有分支的可移动糖簇结构,足够长的糖簇结构可形成必须的独立结构域,从而发挥重要功能。

糖蛋白质组学技术在肿瘤研究中的应用

蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰,50%以上的蛋白质存在糖基化现象[1]。蛋白质糖基化涉及到细胞免疫、细胞粘附、蛋白翻译调控、蛋白降解等多种生物过程。在肿瘤的发生、发展进程中,某些糖基化修饰会随着疾病进程发生改变,

血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖、侵袭影响

目的 观察血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖及侵袭转移能力的影响,探讨肿瘤微环境中内皮细胞在肝癌发生、发展中的作用.方法 以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养上清为条件培养液（CM）,以内皮细胞培养液（EBM）为对照组,分别对Hep3B细胞进行干预.观察其对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力的影响,并检测相关信号通路分子.结果 与对照细胞比较,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）实验结果显示CM促进肝癌细胞的增殖（P＜0.01）;细胞划痕实验和迁移实验也分别显示CM明显促进肝癌细胞迁移能力[（33.65±1.22）％比（57.85±2.20）％,P ＜0.01;（51.2±3.1）个比（28.4±4.6）个,P＜0.01];侵袭实验显示CM明显诱导肝癌细胞侵袭能力[（16.2±2.3）个比（5.4±1.5）个];同时CM干预的肝癌细胞侵袭转移相关基因,如基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、骨桥蛋白（OPN）和簇分化抗原44（CD44）表达及丝氨酸/酪氨酸激酶（Akt）和细胞外信号调节激酶（ERK）蛋白磷酸化水平均被明显上调.结论 血管内皮细胞培养上清体外促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭转移,提示血管内皮细胞可通过旁分泌机制参与肝癌侵袭转移过程.

CD44v6与肝细胞癌转移的关系

1991年Günthert等[1]采用针对大鼠转移性胰腺癌细胞表面糖蛋白的一种单抗,其相关抗原的cDNA序列与CD44同源,后证实为CD44v6,将这种单抗与肿瘤细胞同时注入裸鼠体内,可延缓甚至完全阻断其淋巴结和肺转移灶形成。他们最早提出了CD44v6与肿瘤转移相关,而1998年李祖国等[2]首次证明在肝细胞癌（HCC）细胞中CD44v6可能通过细胞内羧基端结构影响细胞内骨架蛋白的构象和分布，

肝癌肝移植临床研究回顾与展望

过去十多年间肝癌肝移植临床研究的热点主要有：（1）适应证的适度放宽，使有限的供肝资源得到更公平、合理的使用。多个新的适应证标准被提出并被验证。我国学者提出的适合国情的标准，在不显著影响疗效的同时使更多肝癌患者受益于肝移植治疗。（2）探索合适的免疫抑制方案，在控制排异的同时预防和减少移植术后肿瘤的复发。目前，还没有足够的临床试验数据进行结论，但对于高复发风险患者，建议其在肝移植术后尽量减少钙调素抑制剂的用量并转换为mTor抑制剂。近年，肿瘤精准医学和免疫治疗技术飞速发展，为肝癌肝移植研究提供了新的机遇。

绿色荧光高／低转移人肝癌细胞株MHCC97-HG／LG的建立及鉴定

目的建立稳定自发绿色荧光的高、低转移人肝癌细胞株并明确鉴定。方法脂质体转染法将绿色荧光蛋白(GFP)基因分别转染至高、低转移人肝癌细胞株MHCC97-H／L内,经 G418反复筛选并单克隆化,得到两株新细胞株MHCC97-HG／LG,对新细胞株GFP表达稳定性、生物学特性、体内外侵袭转移能力及肿瘤血管生成等进行鉴定。结果 MHCC97-HG／LG在体外培养或裸鼠体内接种36 d后均能稳定表达绿色荧光。MHCC97-HG肝、肺转移率均为100％,较 MHCC97-LG及其父系体内外侵袭转移能力显著增强(P<0．01),其原位肿瘤微血管密度较 MHCC97-LG显著增加[(121．0±15．9)／HP vs(87．0±14．2)／HP,P<0．01]。体视荧光显微镜可实时观察裸鼠体内MHCC97-HG／LG种植瘤生长、转移及血管形成情况。结论 MHCC97-HG／LG及其动物模型在肝癌转移机制、肿瘤血管生成等诸多研究领域可能有较广阔的应用前景。

缺氧微环境在肿瘤进展中的作用

缺氧微环境是实体肿瘤的重要特征。在缺氧条件下,肿瘤细胞会分泌多种血管生长因子以促进异常血管的形成。同时为了寻找更佳适宜的土壤,肿瘤细胞的侵袭与转移能力也会得到进一步的提高。此外,缺氧微环境对肿瘤细胞具有筛选作用,使肿瘤的恶性程度进一步提高,导致肿瘤细胞对化疗药物或放射治疗不敏感。由此可见,缺氧微环境是肿瘤的不良预后的重要因素。相较于肿瘤组织,正常组织中很少存在缺氧区域,所以缺氧微环境也为肿瘤的靶向治疗提供了有利条件。本文就缺氧微环境的成因、与肿瘤的相互关系和干预策略等进行综述,以期为靶向肿瘤缺氧微环境的治疗提供一些理论依据。

肝脏储备功能评价对巨大肝脏肿瘤解剖切除的应用价值

手术切除是肝脏肿瘤获得根治性疗效的主要手段。但切除肿瘤(特别是巨大肿瘤)后,若剩余肝脏储备功能不足,术后易发生肝功能衰竭,这也是肝外科围手术期死亡的重要原因。因此,准确评估病人术前肝脏储备功能,对病人能否耐受手术、判断术中肝脏切除范围、避免术后出现肝功能衰竭具有重要意义。目前评价肝脏储备功能的主要方法:基于血清(浆)学的肝脏功能动态检测如吲哚氰绿(ICG)试验、单乙基甘氨酸二甲苯胺(MEGX)试验等;系统评分如Child-Pugh评分等;以及肝脏体积测定。术后肝功能恢复取决于剩余肝脏的体积、质量及病人全身情况等多方面。因此,术前要结合多项指标全面、准确、综合评估肝脏储备功能。

神经系统在肿瘤发生和发展中的作用

肿瘤在机体内不是一个孤立的结构,肿瘤组织内有神经纤维分布,肿瘤细胞表面存在着多种神经递质受体,神经递质触发受体后信号通路可调控肿瘤细胞的增殖、血管生成、侵袭和转移。神经系统还可通过调节免疫细胞的分化、增殖和活化,影响抗肿瘤免疫。肿瘤细胞释放的细胞因子可刺激感觉传入纤维或穿过血脑屏障,影响中枢神经系统的功能。心理社会应激会影响交感神经系统或下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,改变儿茶酚胺类神经递质和脑源性神经营养因子的水平而影响肿瘤的生长和发展。基于肿瘤发生和发展中神经系统的潜在作用,神经系统干预在肿瘤的全身干预疗法中是一个颇有前景的新领域。

肝星状细胞和肝细胞癌的相互作用

肝星状细胞（HSC）是肝纤维化及正常肝脏中细胞外基质的主要来源。慢性肝损伤时，HSC发生表型变化转变成肌纤维母细胞，引起肝纤维化。肝细胞癌是多因素疾病，基质中有明显星状细胞浸润。探讨肝细胞癌与HSC相互作用关系可为肝细胞癌的治疗提供新思路。

骨桥蛋白表达和翻译后修饰与肿瘤生物学行为的关系

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型磷酸化糖蛋白。研究表明OPN在肿瘤中高表达,并通过与CD44突变体CD44v6及整联蛋白αvβ3作用参与肿瘤的发生发展。近年来发现OPN存在磷酸化、糖基化、硫酸化、唾液酸化等多种翻译后修饰,在肿瘤发生发展过程中,这些修饰状态的改变和生物学意义已成为研究关注的热点之一。