单次尿铜比值诊断儿童肝豆状核变性意义初探

目的探讨单次尿铜比值测定代替24h尿铜定量用于诊断肝豆状核变性(WD)的可行性。方法测定正常儿童24小时内多次尿标本的铜肌酐(Cu/Cr)、铜/锌(Cu/Zn)比值,了解其稳定性;收集15例肝病患儿(其中2例WD)的晨尿和24h尿,研究单次尿Cu/Cr、Cu/Zn值与24h尿铜相关性;测定9例初发WD患儿和22例其它肝病患儿的单次尿铜比值和24h尿铜,研究其诊断儿童肝病中的WD的敏感度和特异度。结果2例正常儿童24h内尿Cu/Cr值和Cu/Zn值的变异系数分别为12.5%、9.3%。单次尿Cu/Cr值和Cu/Zn值与24h尿铜的相关系数分别0.767和0.891(P<0.001)。24h尿铜定量诊断WD的敏感度55.5%、特异度77.3%;晨尿Cu/Zn值的敏感度77.8%、特异度86.4%。结论单次尿铜比值1d内波动小,尿Cu/Zn值与24h尿铜定量相关性好,诊断WD的敏感度和特异度较高,可望代替24h尿铜定量用于WD诊断。

婴儿肝内胆汁淤积症SLC25A13基因突变分析

目的探讨SLC25A13基因突变在中国婴儿肝内胆汁淤积症患儿中的检出率,初步了解突变患儿血生化及氨基酸谱特征,肝脏活组织病理变化。方法2003年12月至2006年12月就诊于复旦大学附属儿科医院的婴儿肝内胆汁淤积症患儿,满足本研究入选条件者共115例进行了血氨基酸质谱分析,伴血浆瓜氨酸明显升高的患儿进行SLC25A13基因全部外显子及邻近序列测序,不伴血浆瓜氨酸明显升高的患儿进行SLC25A13基因常见突变851del4(突变Ⅰ)及突变1638ins23(突变Ⅲ)筛查,突变851del4采用实时荧光定量PCR双标记探针法检测,突变1638ins23采用PCR产物直接电泳法检测,对仅检出单个位点突变的筛查对象,继续进行其余已报道的10种突变位点检测。检测结果仍为单个杂合突变的对象进行SLC25A13基因所有外显子区及其邻近序列分析。对确诊突变患儿的临床表现、血生化及血氨基酸特征等进行分析。结果5例伴血瓜氨酸明显升高的患儿共检出突变4例,其中纯合突变851del4/851del41例,复合杂合突变851del4/1638ins231例,杂合突变851del42例;110例不伴血浆瓜氨酸明显升高患儿共检出突变6例,其中纯合突变851del4/851del41例,复合杂合突变851del4/1638ins231例,杂合突变851del44例。115例婴儿肝内胆汁淤积症患儿共检出SLC25A13基因突变10例,占8.7%。突变患儿血生化改变包括胆红素、γ-谷氨酰转移酶以及碱性磷酸酶等明显升高,AST升高较ALT明显。血串联质谱发现5例突变患儿有特征性氨基酸瓜氨酸、苏氨酸及蛋氨酸升高,另5例突变患儿并无血氨基酸改变。10例患儿中有7例行肝脏活组织病理学检查,4例有显著的脂肪变性。结论SLC25A13基因突变是中国婴儿肝内胆汁淤积症的重要原因之一。肝脏活组织病理、血生化及氨基酸谱等检查对诊断SLC25A13基因突变患儿有重要意义,但最终仍需通过基因检测确诊。

血氨基酸异常婴儿肝内胆汁淤积症患者SLC25A13基因的突变谱

目的探讨血氨基酸异常婴儿肝内胆汁淤积症中是否存在SLC25A13基因突变及其突变谱特征。方法对2003年6月2007年6月就诊于复旦大学附属儿科医院的不明原因婴儿肝内胆汁淤积症患儿进行血氨基酸质谱分析，将检测有瓜氨酸、蛋氨酸至少一项2倍以上升高者共14例进行基因研究。全部入选对象先行SLC25A13基因的12种突变位点（[I]851del4、[Ⅱ]IVS11＋1G〉A、[Ⅲ]1638ins23、[Ⅳ]S225X、[V]IVS13＋1G〉A、[Ⅵ]1800ins1、[Ⅶ]R605X、[Ⅷ]E601X、[Ⅸ]E601K、[Ⅹ]IVS6＋5G〉A、[Ⅺ]R184X及[ⅩⅣ]IVS6＋1G〉C）的检测。对仅检出单个位点突变的研究对象，继续进行所有外娃子区及其邻近序列分析。结果检出SLC25A13基因突变8例，包括复合杂合突变851de14／1638ins232例，纯合突变851de14／851del4、复合杂合突变851del4／R184X及纯合突变IVS6＋1G〉A／IVS6＋1G〉各1例，杂合突变851del43例，其中纯合突变IVS6＋1G〉A／IVS6＋1G〉A是一种新型突变。结论血氨基酸异常婴儿肝内胆汁淤积症中存在SLC25AI3基因突变。[I]851del4、[Ⅲ]1638ins23是中国SLC25A13基因的常见突变形式，新发现1例纯合突变IVS6＋1G〉A／IVS6＋1G〉A，和国外报道突变谱存在明显区别。

进行性家族性肝内胆汁淤积症3型

进行性家族性肝内胆汁淤积症3型（progressive familial intrahepatic cholestasis type3，PFIC3）是一种常染色体隐性遗传性疾病，由编码多药耐药蛋白3（multidrug resistance protein 3，MDR3）的ABCB4（ATP binding cassette，subfamily B，member4）基因突变引起。PFIC3临床上可表现为反复瘙痒、黄疸、白陶土样便、肝脾肿大及胃肠道出血等，常在成年前进展为肝硬化和肝衰竭。