先天性动脉导管未闭致病基因SOX18新突变的识别与功能研究

目的:探索先天性动脉导管未闭致病基因SOX18新突变。方法:入选134例散发性先天性动脉导管未闭(PDA)患儿和202名性别匹配的同种族健康者,对其SOX18基因进行Sanger测序分析以寻找致病新突变。克隆SOX18基因,构建野生型SOX18真核表达质粒,通过定点诱变制备突变型SOX18真核表达质粒,脂质体转染HeLa细胞后,双报告基因定量分析突变的功能效应。结果:在1例散发性先天性PDA患儿中发现了SOX18基因新突变,即NM_018419.3:c.313C>T;p.(Gln105^(*))突变。该突变不存在于其他PDA患儿和对照者。双报告基因分析显示突变型SOX18对靶基因NR2F2的转录激活作用丧失。结论:SOX18基因功能缺失性新突变可导致散发性先天性PDA,这对先天性PDA的精准医学防治有潜在的临床意义。

甲、乙型流感病毒两种方法检测结果的一致性分析

目的将胶体金免疫层析(以下简称胶体金)法和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法同时用于甲、乙型流感病毒的检测,比较两种检测方法结果的一致性,并初步评估外周血感染相关指标水平变化对于甲、乙型流感临床诊断的价值。方法收集2019年11月1日至2022年2月20日至复旦大学附属华山医院就诊的流感疑似患者的口咽拭子标本300例,所有受试者均被同时采集双份口咽拭子,分别用胶体金法和qPCR法同步进行检测,比较两种检测方法结果的一致性。采用测序法对检测结果进行验证,并根据测序法的检测结果将受试者分为甲型流感病毒阳性组、乙型流感病毒阳性组和阴性组(甲、乙型流感病毒检测均为阴性),比较3组受试者外周血感染相关指标水平,评估这些指标对甲、乙型流感临床诊断的价值。结果检出甲型流感病毒阳性44例,检出乙型流感病毒阳性122例,阴性134例。针对甲型流感病毒的检测,qPCR法的检测灵敏度和特异度分别为100.00%和99.61%,胶体金法的检测灵敏度和特异度分别为40.91%和100.00%。针对乙型流感病毒的检测,qPCR法检测的灵敏度和特异度分别为100.00%和98.88%,胶体金法的检测灵敏度和特异度分别为34.43%和100.00%。qPCR法与胶体金法的检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3组人群外周血中的C反应蛋白和血清淀粉样蛋白A水平比较,差异无统计学差异(P>0.05),阴性组人群外周血白细胞计数、中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值和单核细胞绝对值水平较甲型流感病毒阳性组和乙型流感病毒阳性组高,差异有统计学意义(P<0.05)。针对甲型流感病毒的检测,qPCR法与胶体金法检测结果的一致性一般(Kappa=0.531);针对乙型流感病毒的检测,qPCR法与胶体金法检测结果的一致性差(Kappa=0.375)。结论将胶体金法、qPCR法和外周血感染指标联合应用于流感的诊断,有助于兼顾临床工作中对报告时间与检测结果准确性的要求,提高临床实验室流感的诊断能力。