血液科医院感染致病菌分布及耐药性分析

目的:分析血液科住院病人医院感染致病菌分布及耐药情况。方法:回顾性研究我院发生医院感染的血液病住院病人2003年11月～2007年11月细菌送检阳性的390份标本,药敏试验用Kirby-Bauer法。结果:390株细菌依次分布于呼吸道分泌物、尿液、血液等标本。G^-菌占62.05%,G^+菌37.95%。单纯的头孢类和青霉素类抗生素除头孢他啶外,对G^-菌的敏感性不高,而碳青霉烯类、加β^-内酰胺酶抑制剂的头孢三代类和青霉素类对G^-菌敏感性较高。G^+菌对万古霉素、替考拉宁100%敏感,而对各种头孢类、青霉素类和喹诺酮类抗生素均显示出很高的耐药性;咽拭子及血标本中的金黄色葡萄球菌100%耐甲氧西林,仅万古霉素及替考拉宁100%敏感。结论:我院血液科医院细菌感染仍以G^-菌为主,G^+菌的比例处于上升趋势。呼吸道感染最常见。金黄色葡萄球菌100%耐甲氧西林。

补骨脂与鸦胆子对感染卡氏肺孢子虫大鼠IL-2水平和NK细胞活性的影响

中药补骨脂(10.0mg/kg)、鸦胆子(1.2mg/kg)及两药合剂(补骨脂5.0mg/kg,鸦胆子0.6mg/kg)治疗PCP卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)大鼠。通过检测脾NK细胞活性和血清IL-2水平,探讨两药对PCP大鼠的免疫调节作用。结果表明,与PCP模型对照组比较,补骨脂治疗组血清IL-2诱生水平(526.1±5.5)pg/ml和脾NK细胞活性(27.1%±0.8%)均显著升高(P<0.01),两药合剂组其次[(314.7±6.7)pg/ml,(22.9%±0.9%)(P<0.05)],鸦胆子组较低[(285.4±6.1)pg/ml,(20.7%±1.0%)(P<0.05)]。补骨脂和鸦胆子具有增强PCP大鼠免疫调节的作用。

M蛋白血症90例临床分析

目的提高对M蛋白血症的认识。方法分析90例M蛋白血症的M蛋白类型及原发疾病病种分布,以及多发性骨髓瘤(MM)的M蛋白类型和M蛋白含量。结果90例M蛋白血症病例中,IgG型40例(占44.4%)、IgA型15例(占16.7%)、IgM型12例(占13.3%)、轻链型14例(占15.6%)、IgD型4例(占4.4%)、双克隆型5例(占5.6%);90例M蛋白血症病种分布,MM59例、华氏巨球蛋白血症(WM)4例,B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)4例,意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)8例,其余包括慢性肾炎、骨转移癌、POEMS综合征等。59例MM中,IgG型30例(占50.8%)、IgA型11例(占18.6%)、轻链型12例(占20.4%)、IgD型和双克隆型各3例(占5.1%);相应的免疫球蛋白显著升高。结论M蛋白血症常见于MM、WM等恶性浆细胞,也可见于MGUS、POEMS综合征、NHL等多种疾病。

MDR1、GSTπ特异性siRNA真核表达载体的构建及表达

目的构建多药耐药基因(MDR1)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTπ)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其表达。方法参照siRNA模板设计原则,设计并化学合成2条siRNA模板序列,退火后将其插入质粒pSilencer2.1-U6,限制性酶切和基因测序进行鉴定。脂质体介导下转染K562/Adr细胞,实时荧光定量PCR分析MDR1、GSTπmRNA的表达,荧光免疫组化检测Pgp、GSTπ蛋白的表达。结果重组质粒pSilenc-er2.1-MDR1、GSTπ经酶切、测序分析表明siRNA模板序列成功插入预计位点,并且序列正确。用pSilencer-mdr1、pSilencer2.1-GSTπ分别转染K562/Adr细胞株,mdr1mRNA表达量下降了71.5%,GSTπmRNA表达量下降了39.8%,荧光免疫组化显示Pgp、GSTπ表达均显著减少(P<0.01)。结论成功构建了MDR1、GSTπ特异性siRNA真核表达载体,该载体可不同程度逆转K562/Adr细胞的多药耐药。

多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白型别的检测及分析

【目的】研究多发性骨髓瘤(MM)患者血清单克隆免疫球蛋白(M蛋白)的分型,以提高认识和诊断水平。【方法】对2006年1月至2007年12月间本院确诊为MM患者、并通过免疫固定电泳发现有M蛋白者共55例患者的血清固定电泳结果和血清免疫球蛋白定量结果进行分析总结。【结果】55例中,IgG型29例(52.73%),IgA型10例(18.18%),轻链型11例(20%),IgD型3例(5.45%),双克隆型2例(3.64%)。IgG和IgA型MM患者血清球蛋白水平升高明显,而IgD型和轻链型血清球蛋白水平升高不明显甚至降低。【结论】血清免疫固定电泳检测M蛋白对MM诊断有重要意义。

siRNA真核表达载体对白血病K562/ADR细胞凋亡的实验研究

目的特异性siRNA真核表达载体pSilenceneoMDR1和pSilenceneoGSTπ对白血病多药耐药细胞K562/ADR凋亡的影响。方法特异性siRNA真核表达载体pSilenceneoMDR1、pSilenceneoGSTπ共转染K562/ADR细胞,同时以空载体pSilencer2.1U6转染K562/ADR细胞(mock)作为对照。流式细胞仪检测细胞凋亡;MTT法检测阿霉素的半数抑制浓度(IC50)。结果流式细胞仪显示空载体pSilencer2.1U6转染细胞凋亡率为(11.65±4.06)%,pSilenceneoMDR1和pSilenceneoGSTπ共转染组细胞凋亡率(44.98±11.27)%,重组质粒转染组与空质粒转染组比较,差异有统计学意义,P<0.01。K562/ADR细胞对阿霉素的耐药指数为24,空载体转染后耐药指数为23,pSilenceMDR1、pSilenceGST共转染后耐药指数降低为7,半数抑制浓度(IC50)值分别从转染前(1.16±0.38)mol/ml下降为(0.33±0.04)mol/ml,重组质粒转染组与空质粒转染组比较,差异有统计学意义,P<0.01。结论siRNA真核表达载体pSilenceMDR1和pSilenceneoGSTπ可以诱导K562/ADR细胞发生凋亡,并且可有效逆转K562/Adr细胞株的多药耐药。

血液肿瘤患者化疗后院内血行感染细菌分布特点及药敏分析

目的了解血液肿瘤化疗患者院内血行感染细菌分布特点及药物敏感性。方法采用Kirby-Bauer法进行药敏试验，分析血液中分离得到的56株细菌。结果革兰阴性菌（G-）占69．64％，革兰阳性菌（G＋）占30．36％。以大肠埃希菌最为常见（37．50％），其次为肺炎克雷伯菌（10．71％）。葡萄球菌全部为耐甲氧西林葡萄球菌，仅对万古霉素敏感。结论血液肿瘤化疗患者院内血行感染仍以G-菌为主；大肠埃希菌最常见；葡萄球菌全部为耐甲氧西林葡萄球菌，仅对万古霉素100％敏感。