遗传性妇科肿瘤综合征人群的风险评估及遗传咨询和生育策略

遗传性肿瘤综合征(hereditary cancer syndromes,HCS)是指一类具有家族遗传倾向的特殊肿瘤类型,通常由一个或多个基因的可遗传致病性变异引起。HCS患者往往对多种肿瘤的易感性增加,肿瘤发病年龄早,并且还可出现家族内多人罹患同一器官肿瘤的情况。据统计,大约5%~10%的癌症属于HCS[1],多数呈常染色体显性遗传。

PGT在遗传性肿瘤生殖干预中的应用进展

遗传性肿瘤本质上是遗传物质缺陷导致的疾病,大多数呈现出孟德尔常染色体显性遗传规律,不仅危害患者的健康,而且对后代构成严重威胁。遗传性肿瘤胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)是利用外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)和遗传学检测技术,对卵母细胞的极体、第3天的胚胎或第5天的囊胚进行遗传性肿瘤致病基因的检测,选择无遗传性肿瘤易感基因致病性变异的胚胎移植到子宫中,从而阻断遗传性肿瘤的子代传递并降低后代患病风险。本文简要介绍目前常见的遗传性肿瘤及其特征,总结PGT技术在家族性腺瘤性息肉病、遗传性乳腺癌/卵巢癌综合征等常见遗传性肿瘤及罕见遗传性肿瘤生殖干预中的应用,探讨遗传性肿瘤PGT技术的发展和伦理问题,并对其未来发展方向进行展望。

基于胎儿游离DNA的无创产前筛查新进展

无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)由于规避了有创操作的潜在流产风险,且检测准确性高,一经出现就迅速在世界范围内得到广泛应用,并深刻改变了当前产前诊断的临床实践。新一代测序技术、游离DNA(cell-free DNA,cfDNA)富集扩增技术的快速发展以及新型生物信息算法的诞生进一步提高了NIPT的性能,NIPT的检测范围从常见的染色体非整倍体扩展到全基因组范围的染色体非整倍体。

无创产前筛查“专业版”,遗传病检出率高六成

生一个健康的宝宝是每个孕妈的追求,产前筛查如今已成为孕期最重要的体检项目之一,可以有效帮助孕妈们提早知道孩子是否存在染色体非整倍体和染色体微缺失/微重复综合征异常,并进行下一步的妊娠决策。但即便如此,现有技术仍然对显性单基因病(如软骨发育不良、努南综合征)的筛查束手无策。数据表明,遗传因素导致的出生缺陷约占80%,而由单基因病引起的就占7.5%~12.0%。填补这一产前筛查技术的空白,实现更全面精准的产前和围产期管理,是复旦大学附属妇产科医院妇产科遗传中心副主任徐晨明及研究团队一直以来努力攻克的目标。

针对生育人群的携带者筛查实验室和临床实践专家共识

作为一项孕前/孕早期筛查技术,携带者筛查已经由最初仅针对特定人群、特定疾病发展为现如今的针对一般人群、多种疾病的筛查,在防控常染色体隐性或X连锁遗传病引起的出生缺陷方面表现出了显著的临床效用,增加了受检夫妇的生育自主权。为规范携带者筛查的实验室检测和临床实施,经中国妇幼保健协会生育保健分会专家讨论,结合我国实际情况,制定本专家共识,供临床应用参考。

单精子测序技术在新发突变单基因遗传病家系胚胎植入前遗传学检测中的应用

目的探讨单精子测序技术在新发突变单基因病家系胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)中的应用效果和价值。方法针对3个携带新发突变的常染色体遗传病家系,采用多重置换扩增技术(multiple-displacement amplification,MDA)对单精子进行全基因组扩增(whole genome amplification,WGA),通过检测扩增产物的变异位点以及目的基因上下游2M范围内有效单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP)位点信息,构建携带突变的风险单体型与不携带突变的正常单体型。对待测胚胎进行WGA,产物进行高通量测序,结合单体型信息判断胚胎致病位点的携带状态,选择不携带致病变异的胚胎进行移植。结果共挑取16份有效单精子样本,在原发性高草酸尿症、Kabuki综合征、遗传性大疱性表皮松解症3个新发突变单基因病家系中成功构建单体型。胚胎植入前单基因遗传病检测(PGT for monogenic disorders,PGT-M)结果提示有10枚胚胎携带父源致病变异;6枚胚胎不携带父源致病变异,其中2枚胚胎检出染色体拷贝数变异。除原发性高草酸尿症夫妇外,其余两个家系的夫妇共获得4枚正常胚胎,移植后均未妊娠。结论对于家系中男性携带新发突变的夫妇,可以利用单精子测序技术构建单体型,进而进行PGT。

RNA测序综合分析唐氏综合征胎儿中mRNA和长链非编码RNA表达谱

目的 探讨唐氏综合征胎儿的羊水细胞与匹配妊娠胎儿的羊水细胞中mRNA和长链非编码RNA的差异表达。方法 通过羊膜腔穿刺获得羊水细胞,采用RNA测序进行转录组分析,并将差异表达的转录本进行富集分析。结果测序结果发现,与正常妊娠胎儿相比,唐氏综合征胎儿中存在1432个转录本差异表达,其中779个转录本表达下调(611个蛋白质编码的mRNAs和168个lncRNAs),653个转录本表达下调(543个蛋白质编码的mRNAs和110个lncRNAs)。这些转录本在唐氏综合征的免疫系统、血管发育、衰老及癌症发展等多方面中发挥作用。结论 唐氏综合征胎儿中mRNA和lncRNA表达谱发生显著变化,其可能在唐氏综合征发病进程中发挥重要作用。

利用高通量测序的方法实现对母源印记基因的产前诊断

目的 对1例超声提示多发异常产前胎儿进行表型分析及基因检测,明确其遗传学病因。方法 对胎儿及父母行捕获高通量测序,筛选出潜在致病变异位点并行Sanger验证及生物信息学分析。结果 先证者IGF2基因3号外显子存在一个杂合错义突变c.224G>A(p.Cys75Tyr),遗传自无表型的父亲。该变异为尚未报道的新变异。单体型分析结果证实变异所在染色单体遗传自不携带该突变的祖母,多种在线软件预测结果均提示为“有害变异”,蛋白预测模型显示变异可能影响蛋白正常结构,按照ACMG指南判读为可能致病变异(PM1+PM2_Supporting+PM6+PP3)。结论IGF2基因c.224G>A(p.Cys75Tyr)变异可能为该家系胎儿的致病原因,该病例为我国首例开展银罗素综合征的产前诊断报道,新变异的检出拓展了IGF2基因的变异谱,为该疾病的遗传咨询和产前诊断提供理论依据。

不同PTH、PTHrP多肽对MDA-MB-231乳腺癌细胞系增殖的影响

目的探究甲状旁腺激素(PTH)1-34、甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)1-33、PTHrP 1-36、PTHrP 1-86多肽对乳腺癌细胞系增殖的影响。方法使用多肽对乳腺癌细胞系MDA-MB-231进行处理。结果培养条件为2%FBS、处理时间为24 h时,PTH 1-34、PTHrP 1-33、PTHrP 1-36、PTHrP 1-86都对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.001);加入PTHrP 1-86多肽处理48 h时,10 nmol/L、25 nmol/L处理组别对细胞增殖有促进作用(P<0.05)。结论本实验证明PTH 1-34、PTHrP 1-33、PTHrP 1-36、PTHrP 1-86皆对乳腺癌细胞系MDA-MB-231的生长有调控作用,可能参与细胞增殖的信号通路。长远来看,本研究有助于开发通过抑制乳腺癌细胞增殖进行癌症治疗的新疗法。