三维耳郭导板的制作及其在耳郭再造术中的应用

目的参照小耳畸形患者健侧耳郭影像数据,制作三维耳郭导板,并打印为三维实体模型,为患侧耳郭再造提供手术指导。方法应用Mimics软件对患者健侧耳郭CT数据进行分割、镜像、膨胀等处理,获得患侧耳郭和导板的三维虚拟模型,将其导入3D打印机生产三维实体模型,并应用于临床。结果成功制作出个体化仿真度较高的患侧重建耳郭和导板的三维实体模型,并应用于临床耳郭再造术,用以指导术中精细雕刻耳郭软骨支架,并协助患侧再造耳定位。结论基于Mimics软件和3D打印技术制作的耳郭和导板的数字与实体三维模型,有助于指导术中精细雕刻耳郭软骨支架和定位。

MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用

目的:构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法:PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag(HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒;MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化。利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位。MTT法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响。结果:成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒,MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E.coliBL21的包涵体内。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长,1mg/mlMDA-7/IL-24-HT7融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96h后,细胞凋亡率分别为(34.7±1.3)%和(22.1±0.9)%,显著高于未处理的肿瘤细胞(P<0.01)。结论:带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。

壁冠状动脉血流动力学体外模拟

目的研究心肌桥压迫对壁冠状动脉内血流、正压力、周向应力、切应力的影响。方法对原有的壁冠状动脉模拟装置进行较大改进,使其测量的血流动力学参数从单一应力(正应力)扩展到多种应力,以便更全面准确地模拟在正压力、周向应力、切应力共同作用下的真实血流动力学环境,从而综合考虑在多种应力共同作用下血流动力学规律与壁冠状动脉粥样硬化之间的关联。结果壁冠状动脉模拟装置实验结果表明,应力的异常主要位于壁冠状动脉近端,随着心肌桥压迫程度加剧,近端的应力平均值与波动值明显增大,正应力平均值升高27.8%,波动值升高139%。结论心肌桥压迫造成壁冠状动脉近端血流动力学发生异常,对认识冠脉粥样硬化发病的血流动力学机理具有重要意义,对于心肌桥的病理影响及治疗具有潜在的临床价值。

耳蜗三维建模及其应用研究进展

20世纪80年代开始，国内外相继出现了医学三维重建的报道，90年代进行了虚拟人体形态结构的研究，国内耳蜗的三维建模也随之开展。医学三维重建是借助计算机对多途径所获得的器官组织连续图像进行分割处理、提取轮廓，构建其三维图形并进行定量测量的一种形态学研究方法。随着计算机硬件的不断升级，以及图形图像工具软件的更新换代，使得在二维图像上无法呈现的复杂空间构筑，在三维可视化屏幕上得以实现。

计算机辅助设计在先天性中外耳畸形整复术中的应用

探讨了计算机辅助设计技术在先天性中外耳畸形整复术中的应用,方法是收集108例单侧先天性中外耳畸形患者Dicom格式的CT资料,在Mimics12.0中进行图像处理、重要结构三维重建与虚拟手术设计。所有患者均可根据对侧正常耳廓镜像,并对镜像进一步处理后获得耳廓软骨支架的三维模型,用于指导医生在术中对肋软骨的雕刻制作;108例患者中,51例根据虚拟手术结果提示适合做外耳道成形与听力重建手术,虚拟手术技术可协助医生判断患者是否适合手术及准确定位新建外耳道;其中50例可通过新建外耳道方位的微调达到与耳廓良好的美学匹配效果。由此得出结论:计算机辅助设计技术对先天性中外耳畸形手术整复具有重要的指导意义和实用价值。

人工中耳研究进展

由于传统助听器存在诸多弊端,人工中耳植入成为目前治疗传导性聋和中重度感音性聋的替代手段之一。该文就人工中耳发展历史,对已进入临床使用的7种人工中耳进行了介绍,并提出了植入式骨导助听装置将是人工中耳的发展方向。

糖皮质激素受体在豚鼠耳蜗的分布及声损伤对其表达的影响

目的研究糖皮质激素受体(GR)在豚鼠耳蜗的分布及声损伤对豚鼠耳蜗GR表达的影响。方法将豚鼠随机分为2组:实验组豚鼠在强度115dBSPL的白噪声中暴露3h。暴露结束后2h,断头取耳蜗。对照组豚鼠不做处理,取耳蜗。制备耳蜗冷冻切片,采用免疫荧光技术观察豚鼠耳蜗的GR表达情况,并进行荧光强度半定量分析。结果①豚鼠耳蜗GR主要的阳性部位:螺旋韧带、血管纹、骨螺旋缘、Corti器及螺旋神经节。螺旋韧带、血管纹、骨螺旋缘及螺旋神经节等区域的GR荧光强度差异无统计学意义(P>0.05),上述各区域的GR荧光强度与Corti器的GR荧光强度差异有统计学意义(P<0.05)。②声损伤后,豚鼠耳蜗的GR荧光强度在骨螺旋缘、Corti器及螺旋神经节较对照组差异无统计学意义(P>0.05);螺旋韧带、血管纹区域荧光强度较对照组明显减低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 GR分布于豚鼠耳蜗的螺旋韧带、血管纹、Corti器和螺旋神经节,其中螺旋韧带、血管纹表达最强,Corti器表达最弱;声损伤降低耳蜗各区域GR的表达,以血管纹、螺旋韧带最明显。

缝隙连接蛋白connexin 26基因条件性敲除小鼠血管纹超微形态研究

目的观察不同年龄缝隙连接蛋白26(Connexin 26,Cx26)基因条件性敲除小鼠血管纹的超微病理形态学改变,探索Cx26突变的致聋机制。方法将Cx26 loxP/loxP与foxg1-cre转基因小鼠进行杂交,获得Cx26条件基因敲除小鼠模型(Foxg1-Cre cCx26ko条件性敲除小鼠,简称为cCx26ko小鼠),与野生型小鼠(wild type,WT)进行对比。分离出小鼠耳蜗标本,先制作半薄切片定位,再行超薄切片,采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察血管纹细胞的超微病理改变。结果血管纹各种细胞在早期未见异常;出生后120天(postnatal day 120,P120)起细胞内出现溶酶体增多,P180天见巨大吞噬细胞,P360天见色素颗粒。结论 Connexin 26基因条件性敲除小鼠出生后早期血管纹超微形态基本正常。成年转基因动物的血管纹出现超微病理学改变,推测其与细胞异常代谢和衰老有关,这可能是Cx26突变致聋的病理机制之一。

Mfn2在环孢素A诱导HeLa细胞生长停滞中的作用

目的:探讨环孢素A(TSA)对He La细胞中线粒体融合蛋白2(Mfn2)表达水平极其下游通路的影响。方法:运用不同浓度的TSA处理He La细胞,分别检测细胞增殖、细胞凋亡以及细胞的周期改变;Western blot检测Ras、p-Raf、Raf、p-ERK、ERK、p-Akt、Akt和Mfn2的蛋白水平;real-time PCR检测Mfn2 mRNA的表达水平;用免疫共沉淀法检测Mfn2与Ras结合的水平。将He La细胞过表达Mfn2后,观察上述指标的改变。结果:TSA对He La的抑制作用呈剂量依赖和时间依赖的特点。He La细胞经TSA处理后,Mfn2的mRNA和蛋白表达水平均显著增高,Mfn2与Ras的结合升高,Raf和ERK的磷酸化水平降低。过表达Mfn2抑制了Ras-Raf-ERK通路并诱导了He La细胞的生长阻滞,但对细胞的凋亡水平影响较小。结论:Mfn2参与了TSA诱导的He La细胞生长阻滞,其效应可能是通过抑制Ras-Raf-ERK通路实现的。

全听骨赝复物重建听骨链的有限元分析

目的观察在声压激励下,锤骨柄与镫骨足板之间放置钛全听骨赝复物(total ossicular replace-ment prosthesis,TORP)有限元模型的力学行为特性。方法在ABAQUS有限元软件中构建左耳镫骨足板直接放置钛TORP的三维实体模型,并进行静力学与动力学分析。结果钛TORP模型与正常听骨链位移响应不同;钛TORP模型锤骨柄与镫骨足板有活塞方向位移,同时伴有斜行位移;模态频率与振型在700Hz以上有类似趋势,700Hz以下TORP模型频率随频阶递增较缓慢。结论钛质听骨赝复物做桥接体可能有较好的高频响应;放置赝复物时应考虑力线方向,赝复物镫骨端应与镫骨足板面垂直,以增加活塞运动的有效能量传递,避免向其他方向倾斜产生分力运动。

数字解剖学在中、内耳微观形态研究中的应用

1 数字解剖学在中耳的基础研究与临床应用 中耳鼓室内有3对听小骨、7对细小韧带肌肉,其主要功能是通过听骨链的杠杆作用有效的将声波传递进入内耳.在听骨链运动过程中,上方的锤骨上韧带及砧骨上韧带悬吊听骨,抵抗重力;前方的锤骨前韧带与后方的砧骨后韧带平衡,起到合理约束作用.锤骨前韧带与砧骨后韧带之间构成了听骨链的转轴、支点.

耳蜗血流调节及其与内耳疾病的关系

正常耳蜗血流对维持耳蜗内环境稳定和听功能至关重要。耳蜗血流通过神经体液调节、自动调节、局部代谢物调节共同起作用。耳蜗血流异常在噪音性聋、老年性聋、突发性聋、梅尼埃病的发生及发展过程中起着重要的作用。本文就近年来国内外对耳蜗血流调节及其与内耳疾病关系的研究进行综述,进一步提高对噪音性聋、老年性聋、突发性聋、梅尼埃病的认识,为临床研究治疗提供新的思路与依据。

颗粒酶B在慢性鼓膜穿孔炎症损伤修复中的应用

鼓膜穿孔延缓愈合可导致声波传递增益减少。文献报道颗粒酶B通过细胞内、外途径介导炎症反应,影响或延缓皮肤等伤口愈合;颗粒酶B基因敲除的小鼠则不发生迟缓愈合。鼓膜结构与皮肤有相似性,但在正常鼓膜与损伤延迟愈合鼓膜中颗粒酶B的表达差异鲜有报道。本文总结了慢性鼓膜穿孔产生和延迟愈合的机制及颗粒酶B可能对其影响的途径,为研究颗粒酶B抑制剂在促进慢性鼓膜穿孔炎症损伤修复中的作用,为临床探索新的治疗手段提供依据。

用于神经突导向研究的螺旋神经元培养体系初步观察

目的探寻适用于螺旋神经元神经突导向研究的螺旋神经元培养体系。方法取新生SD大鼠的螺旋神经节,分别进行分离培养和组织块培养,比较神经突的生长模式。组织块培养时,采用不同底物(包括多聚赖氨酸、层粘连蛋白和I型胶原蛋白等)铺片,观察对螺旋神经元组织块贴壁和神经突生长的影响。用微管相关蛋白2(MAP2)抗体和微管聚合蛋白1(Tau-1)抗体鉴别神经突的极性。结果组织块培养体系中,部分神经突长出细胞毯,在无干扰的环境中生长。以多聚赖氨酸加层粘连蛋白为底物铺片时,组织块贴壁率高,神经突数量多、生长较快,有利于获取更多适于神经突导向研究的神经突。培养体系中的神经突可被Tau-1抗体标记,而不能被MAP2抗体标记。结论在多聚赖氨酸加层粘连蛋白包被的可移动玻片上,进行螺旋神经元组织块培养获取自由神经突的方法适合螺旋神经元神经突的导向研究。

基于Matlab精确测量分析耳蜗在颅底中的位置及其年龄趋势

为测量耳蜗在颅底的精确位置与蜗轴方位,并分析其在不同年龄组、侧别和性别中的差异,研究将46例正常人(92侧耳)的CT序列图像数据导入Mimics软件,读取蜗顶、蜗底中心点以及为确定以法兰克福平面为基准的标准空间坐标系的关键结构标志点的三维坐标,并基于Matlab软件编制计算程序LabyCalculation,确定标准空间坐标系的相关方程,计算蜗顶、蜗底中心点以及蜗轴在标准坐标系下的空间位置和方位,最后对数据进行统计分析。结果表明,耳蜗的位置与方位在不同年龄组、侧别和性别中具有一定差异。研究可为耳蜗发育研究提供形态数据,并对相关人工耳蜗手术提供依据和帮助。

钙结合蛋白在C57BL/6小鼠内耳细胞发育过程中的表达特点

目的探讨在小鼠内耳发育过程中,钙结合蛋白(CB)在内耳耳蜗内的表达是否存在时限性。方法获取C57BL/6小鼠E8开始至出生后一直到成年的内耳标本:E8,E9,E10,E12,E14,E15-E21,D1-D21,成年,进行冷冻切片,进行CB的荧光免疫组织化学染色并观察其在内耳表达的变化情况。结果在C57BL/6小鼠,除了在E16可辨认出螺旋神经元有CB部分表达外,以后直到成年都没有CB的染色表达,而在Scarpa神经元则从E8开始就有表达,其从E19开始先在内毛细胞开始有表达,逐渐在内外毛细胞都有表达,直到成年时表达消失。结论 CB在C57BL/6小鼠内耳耳蜗的表达具有时限性,因而可推测出对CB行免疫组织化学染色观察能有效鉴别C57BL/6小鼠及其他动物的再生毛细胞和原有毛细胞,但目前尚无法解释CB一些表达特点的相应机制。

基于有限元方法对钛板改制全听骨赝复物听骨传音特性的理论分析

目的设计用钛板改制的低成本人工听骨,并对其进行传音特性的有限元分析。方法首先裁剪一条钛板并折叠得到全听骨赝复物(TORP)人工听骨的初步几何形状;在中耳三维有限元模型中置入人工听骨模型替换原听骨链,得到置换听骨后的人中耳模型;利用此模型分析重建听骨后的传音效果,再根据响应的特征对人工听骨几何形状做出相应的调整。结果经过数次分析与模型改进,最终得到一个较为合理的简易人工听骨形状;置换该人工听骨后的镫骨足板位移曲线和镫骨足板振动模式与正常中耳模型曲线比较接近。结论利用钛板合理地改制为低成本人工听骨可用于听骨重建手术;有限元模拟分析结果可为设计新型简易的钛板改制人工听骨提供参考依据。

豚鼠鼓膜超谐振动的初步观察

目的通过激光多普勒测振法观察活体与死亡后豚鼠鼓膜超谐振动的差异,以阐明鼓膜振动失真对传音的影响。方法麻醉豚鼠后,分别给予85 d B SPL声强,0.5、1、2、4、6、8 k Hz频率纯音刺激,采用紧凑式单点激光多普勒测振仪测量活体及死亡3 h后豚鼠鼓膜脐部振幅。结果在各种刺激频率下,豚鼠鼓膜脐部均记录到不同幅值的响应。死亡3 h后,在0.5 k Hz和1 k Hz声刺激下,观察到超谐振动响应;但是在活体豚鼠中未观察到此现象。活体与死亡3 h后豚鼠鼓膜超谐振动的差异有统计学意义(P=0.002)。结论豚鼠鼓膜的超谐振动是一种振动失真,活体状态下,可能存在中耳的某种生理功能抑制了这种振动失真,这样更有利于声音的清晰传递。