目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPKs）的亚通路信号蛋白-细胞外信号调节蛋白激酶（extracellularsignal-regulatedkinase，ERKI／2）、P38和c-氨基末端蛋白激酶（c—JunN-terminalkinase，JNK）在...目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPKs）的亚通路信号蛋白-细胞外信号调节蛋白激酶（extracellularsignal-regulatedkinase，ERKI／2）、P38和c-氨基末端蛋白激酶（c—JunN-terminalkinase，JNK）在大鼠光气吸入肺损伤组织中的表达及各通路在光气吸人性肺损伤中的作用。方法选取30只雄性Wistar大鼠随机分成空气对照组、光气吸入组、PD98059（ERK1／2特异性阻断剂）、SB203580（P38特异性阻断剂）和SP600125（JNK特异性阻断剂）干预组，每组6只，应用定向流动光气吸入装置，复制大鼠光气（8．33Umg）吸人性肺损伤的模型，空气对照组吸人空气，3个干预组均在光气（8．33L／mg）吸入前给予PD98059、SB203580、SP600125。分别采用免疫组化及蛋白质印迹（Westernblot）法检测肺组织MAPKs（ERK1／2、P38、JNK）蛋白及磷酸化蛋白p-MAPKs（p．ERK1／2、P—P38、p-JNK）的定性定量表达。观察肺组织病理学改变、计数支气管灌洗液（BALF）中中性粒细胞数、测定肺湿干比。结果空气对照组仅肺泡上皮细胞及气道上皮细胞见少量p-ERKl／2、p-P38、p-JNK阳性表达；光气吸人组p-ERK1／2、p-P38、p-JNK阳性细胞数明显增多，广泛分布于肺内细胞：肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、胸膜间皮细胞、浸润炎细胞及间质纤维细胞；干预组p-ERK1／2、p-P38、p-JNK阳性细胞数减少。各组ERK、P38、JNK的表达无明显变化；光气吸人组较空气对照组p-P38、p-JNK蛋白表达增强，3个干预组的p-ERK1／2、p-P38、p-INK的蛋白表达水平均低于光气吸入组，差异均有统计学意义（／9〈0．05，P〈0．01）。与空气对照组[中性粒细胞计数：（2．05±0．75）×10^4，肺湿干比：（3．64％±0．72％）]比较，光气吸入组肺损伤程度严重，表现出肺损伤的典型病理学特征，且BALF中中性粒细胞数[（10．78±2．16）×10^4增多，肺湿干比（7．65％±0．58％）升高，SP600125干预组和SB203580干预组BALF中中性粒细胞数ISP600125组：（7．86±2．12）×10^4，SB203580组：（8．43±1．51）×10^4和肺湿干比[SP600125组：（6．10％±0．97％），SB203580组：（6．09％±1．43％）1降低，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论光气吸人可能激活MAPK信号通路，通过p-MAPKs表达增加在光气吸入后的肺损伤中发挥作用，其中以p-P38、p-JNK活性变化为主。展开更多
文摘目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPKs）的亚通路信号蛋白-细胞外信号调节蛋白激酶（extracellularsignal-regulatedkinase，ERKI／2）、P38和c-氨基末端蛋白激酶（c—JunN-terminalkinase，JNK）在大鼠光气吸入肺损伤组织中的表达及各通路在光气吸人性肺损伤中的作用。方法选取30只雄性Wistar大鼠随机分成空气对照组、光气吸入组、PD98059（ERK1／2特异性阻断剂）、SB203580（P38特异性阻断剂）和SP600125（JNK特异性阻断剂）干预组，每组6只，应用定向流动光气吸入装置，复制大鼠光气（8．33Umg）吸人性肺损伤的模型，空气对照组吸人空气，3个干预组均在光气（8．33L／mg）吸入前给予PD98059、SB203580、SP600125。分别采用免疫组化及蛋白质印迹（Westernblot）法检测肺组织MAPKs（ERK1／2、P38、JNK）蛋白及磷酸化蛋白p-MAPKs（p．ERK1／2、P—P38、p-JNK）的定性定量表达。观察肺组织病理学改变、计数支气管灌洗液（BALF）中中性粒细胞数、测定肺湿干比。结果空气对照组仅肺泡上皮细胞及气道上皮细胞见少量p-ERKl／2、p-P38、p-JNK阳性表达；光气吸人组p-ERK1／2、p-P38、p-JNK阳性细胞数明显增多，广泛分布于肺内细胞：肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、胸膜间皮细胞、浸润炎细胞及间质纤维细胞；干预组p-ERK1／2、p-P38、p-JNK阳性细胞数减少。各组ERK、P38、JNK的表达无明显变化；光气吸人组较空气对照组p-P38、p-JNK蛋白表达增强，3个干预组的p-ERK1／2、p-P38、p-INK的蛋白表达水平均低于光气吸入组，差异均有统计学意义（／9〈0．05，P〈0．01）。与空气对照组[中性粒细胞计数：（2．05±0．75）×10^4，肺湿干比：（3．64％±0．72％）]比较，光气吸入组肺损伤程度严重，表现出肺损伤的典型病理学特征，且BALF中中性粒细胞数[（10．78±2．16）×10^4增多，肺湿干比（7．65％±0．58％）升高，SP600125干预组和SB203580干预组BALF中中性粒细胞数ISP600125组：（7．86±2．12）×10^4，SB203580组：（8．43±1．51）×10^4和肺湿干比[SP600125组：（6．10％±0．97％），SB203580组：（6．09％±1．43％）1降低，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论光气吸人可能激活MAPK信号通路，通过p-MAPKs表达增加在光气吸入后的肺损伤中发挥作用，其中以p-P38、p-JNK活性变化为主。
