固定化胰蛋白酶的性质研究

目的 测定固定化胰蛋白酶的催化特性和部分稳定性。方法 在相同的条件下,测定固定化和可溶性胰蛋白酶的活力,得其最适作用pH值和最适作用温度,再测定活力,得到各自的米氏常数(Km)值;测得两种状态酶的热稳定性和酸碱稳定性。同时测定了固定化胰蛋白酶的低温稳定性。结果 固定化和可溶性胰蛋白酶的最适作用pH值分别为8 .0～9. 0和7. 0～9.0 ,最适作用温度分别为6 0℃和5 5℃,Km值分别为2 . 32 6、1 42. 9mg·ml-1 ;固定化胰蛋白酶在5 5℃条件下,保温5h ,仍有78 92 %的活性;在4℃条件下,8d后,活性才略微下降,两周活性保留达90 %以上;在pH 9.0的活性未下降,在pH 7.0～1 0 .0范围内也比较稳定(相对活性>80 %)。结论 胰蛋白酶经固定化后,最适作用pH值范围变窄,最适作用温度和Km值升高;

固定化胰蛋白酶的制备

目的 制备一种高活力的固定化胰蛋白酶 ,通过优化其制备条件提高活力回收。方法 将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体 ,以戊二醛为交联剂 ,通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果 优化后制得的固定化胰蛋白酶的活力单位 (AU)高达 6 84 8.4U·g-1 ,活力回收 (AR)为 2 1 .8%。回收再利用实验得到的固定化胰蛋白酶活力单位仍高达 5 90 7.2 0U·g-1 。结论 制备的固定化胰蛋白酶活力单位高 ,活力回收也较高 。

杭州地区肺炎链球菌耐药性及遗传背景研究

目的 了解杭州地区肺炎链球菌儿童株的耐药性和流行特征。方法 用Kirby Bauer法和Etest法对 32 3株肺炎链球菌致病株和携带株进行耐药性分析 ,并对青霉素耐药株及部分相关菌株用BOX PCR技术进行遗传背景研究。结果 青霉素敏感株 136株 ,占 4 2 1% ,青霉素中介株和耐药株分别占 4 0 2 %和 17 7%。青霉素的最低抑菌浓度范围为 0 0 12～ 4 0 μg/ml。所有菌株都对头孢噻肟和万古霉素敏感。 90 7%的菌株对红霉素耐药 ,对四环素、甲氨苄啶 磺胺异噁唑的耐药率也分别高达 87 6 %和 4 8 6 % ,对氯霉素的耐药率为 14 9%。多重耐药率 6 1 0 % ,多数对红霉素、四环素和甲氨苄啶 磺胺异噁唑联合耐药。 99 4 %的菌株对利福平和氧氟沙星敏感。BOX PCR分析耐青霉素肺炎链球菌的临床株 ,未发现高度集中分布的BOX图谱 ,同一标本中分离到的表型不同的菌株或同一病人多次分离到的菌株BOX图谱可以不完全相同。结论 杭州地区肺炎链球菌耐药现象比较严重 ,头孢噻肟等第三代头孢菌素是治疗肺炎链球菌感染的理想药物。