姜黄素对人胚胎干细胞向视网膜色素上皮样细胞定向诱导效率的促进作用

背景 来源于多能干细胞的视网膜色素上皮（RPE）细胞移植治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）和视网膜色素变性（RP）是近年研究热点,但RPE体外分化诱导效率低下、成本高等一直是难以克服的障碍.研究表明,姜黄素（curcumin）可促进人胚胎干细胞（ESCs）的定向诱导分化,但其对人ESCs向RPE样细胞的定向分化的作用机制尚不清楚. 目的 研究体外培养的人ESCs向视网膜色素上皮（RPE）样细胞的诱导分化过程,探讨curcumin对人ESCs向RPE细胞定向诱导效率的影响及其机制. 方法 将人ESCs株进行体外培养,将处于对数生长期的ESCs传代至基质膜（Matrigel）包被的6孔板中,以mTeSRTM1培养基培养至过渡融合状态后更换为含质量分数87％ KnockOutTM DMEM、质量分数10％血清替代物（SR）、质量分数1％非必需氨基酸和质量分数1％谷氨酰胺及青链霉素双抗的分化诱导体系,同时加入终浓度为1 μmol/L的curcumin处理24 h,对照组培养基中未加入curcumin.分别于诱导培养3周及5周时提取细胞RNA及蛋白,采用荧光定量逆转录PCR（RT-PCR）法检测诱导RPE（iRPE）细胞中干细胞标志物、RPE相关标志物及Wnt/β-catenin信号通路相关因子mRNA的相对表达水平;采用Western blot法及免疫荧光染色检测人ESCs、iRPE细胞及人RPE细胞中相关标志物蛋白的表达水平;通过细胞吞噬实验检测iRPE细胞的吞噬功能. 结果 Curcumin组诱导后3周时即可见iRPE细胞色素化,随着时间延长色素化程度更高,而对照组细胞在诱导后5周时开始出现细胞色素化.RT-PCR结果显示,curcumin诱导后3周及5周,curcumin组iRPE细胞中ESCs标志物NANOG mRNA的相对表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义（t=13.086,P=0.022;t=34.186,P=0.004）,而RPE标志物Pax6、RX、CRALBP及RPE65 mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.Western blot检测显示,CRALBP、RPE65和MITF蛋白在iRPE细胞中表达,表达强度与人RPE细胞相近,而人ESCs不表达上述蛋白.免疫荧光染色显示,iRPE细胞中Pax6、MITF和ZO-1蛋白表达阳性,分别定位于细胞质和细胞膜,可见curcumin组得到的细胞为iRPE细胞,纯化效率达到100％,体外细胞吞噬实验显示,iRPE细胞的细胞质内呈现的聚苯乙烯荧光微球接近阳性对照组,而阴性对照组iRPE细胞中未见到聚苯乙烯荧光微球.诱导培养后第3周和第5周时,curcumin组细胞中Wnt信号通路下游靶因子Lef1、MYC和TCF7,Wnt受体FZD3及Wnt配体Wnt2B和Wnt7B的mRNA相对表达水平明显高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）. 结论 Curcumin能提高人ESCs向RPE样细胞的定向诱导效率,其主要机制可能是通过促进Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而促进iRPE细胞的分化和成熟。

1398名医务人员体检尿液常规检测结果分析

目的了解牡丹江地区医务人员尿常规异常指标检出情况,分析异常指标出现的原因。方法采用干化学分析和显微镜镜检方法,对1398名医务人员的尿液标本进行检测,同时,随机选取1299名全市其他行业从业人员尿常规为对照组,对比分析检测结果。结果 1398份医务人员的尿液标本中异常总检出率为35.69%,其中白细胞检出率为14.32%,潜血检出率为7%,亚硝酸盐检出率为1.79%,酮体为0.72%,胆红素5%,蛋白质检出率为4.29%,葡萄糖检的出率为2%,管型检出率为0.50%。所选标本中有305名退休人员,退休组人员尿液分析各参数的阳性检出率明显高于非退休组,差异有统计学意义。所选标本中有866名女性,女性尿液分析各参数的阳性检出率明显高于男性组,差异有统计学意义。医务人员组尿液标本中异常总检出率明显高于对照组,差异有统计学意义。结论牡丹江地区医务人员尤其是女性医务人员泌尿系统情况不容忽视,体检可以及早发现泌尿系统疾病,及时采取有效干扰措施。

儿童反复呼吸道感染与IgG亚类相关性的研究

目的分析儿童反复呼吸道感染(RRTI)与免疫球蛋白G(Ig G)亚类的相关性,旨在为临床有效治疗RRTI提供相应的实验室诊断指标相关性依据。方法选取RRTI患儿60例,包括男性32例,女性28例,年龄1~1.5岁,平均年龄1.2岁;另设60例正常儿童为正常对照组,包括男性30例,女性30例,年龄1~1.5岁,平均年龄1.1岁。所选取的两组患儿其总Ig G水平在正常参考范围内。采用免疫散射比浊法检测血清总Ig G及Ig G亚类水平。结果 RRTI组患儿血清Ig G2和Ig G4水平显著降低,与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。两组间Ig G1、Ig G3水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);RRTI患儿检出Ig G亚类缺乏27例,百分率为45.0%,单纯缺乏以Ig G4所占百分率最高,为37.3%;联合缺乏以Ig G2+Ig G4所占百分率最高,为25.9%。结论 RRTI患儿同时检测总Ig G及Ig G亚类水平具有重要的临床意义。