地榆槐花汤通过调控p38 MAPK/p53通路对人结直肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨地榆槐花汤对人结直肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将HCT116细胞分为空白对照组(空白血清)、阳性对照组(奥沙利铂含药血清)、地榆槐花汤低、中、高剂量组(10%、15%、20%地榆槐花汤含药血清),给予相应含药血清干预,MTT检测细胞增殖活性;平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力;Annexin V-FITC/PI法检测细胞的凋亡水平;Hoechst 33258染色观察细胞形态变化;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、p38MAPK、p-p38MAPK(Thr180/Tyr182)、MDM2和p53等蛋白表达水平。进一步将HCT116细胞分为空白对照组(空白血清)、地榆槐花汤组(20%地榆槐花汤含药血清)、p38MAPK抑制剂TAK-715组(10 mmol·L^(-1) TAK-715)和联合组(20%地榆槐花汤含药血清+10 mmol·L^(-1) TAK-715),采用20%地榆槐花汤含药血清和10 mmol·L^(-1) TAK-715进行干预,MTT检测各组细胞增殖活性;AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡水平;Westernblot检测细胞中p38MAPK、pp38MAPK、MDM2、p53等蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,地榆槐花汤中、高剂量组及阳性对照组HCT116细胞的增殖活性和克隆形成能力显著降低(P<0.01),细胞核呈皱缩、碎块状变化,细胞凋亡水平显著增加(P<0.01),Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、p-p38MAPK/p38MAPK和p53等蛋白表达水平显著上调(P<0.05),MDM2蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。然而,联合TAK-715处理可明显降低地榆槐花汤对HCT116细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用(P<0.05)。结论地榆槐花汤可通过调控p38 MAPK/p53通路抑制HCT116细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。

地榆槐花汤沉默KRT17基因调控结肠癌细胞迁移、侵袭、糖酵解的机制研究

目的:探究地榆槐花汤通过沉默KRT17基因对人结肠癌细胞活力、迁移侵袭能力和糖酵解的影响。方法:用空白对照组和低、中、高(10 %、15 %、20 %)体积分数(V/V)地榆槐花汤含药血清作用于体外培养的人结肠癌HCT116细胞,CCK8法检测细胞的活力,Transwell检测迁移和侵袭,糖酵解试剂盒检测葡萄糖及乳酸水平;通过GEO、GEPIA数据库筛选结肠癌中的差异表达基因KRT17,检测地榆槐花汤对KRT17的影响及KRT17对结肠癌细胞活力、迁移、侵袭和糖酵解水平的影响;检测地榆槐花汤/KRT17轴对细胞的活力、迁移、侵袭及糖酵解水平的影响;结果:地榆槐花汤可抑制结肠癌细胞活力、迁移、侵袭及糖酵解水平(P<0.05),且呈剂量依赖性;KRT17基因在结肠癌中高表达并可以促进结肠癌细胞活力、迁移、侵袭及糖酵解水平(P<0.05);地榆槐花汤可以抑制KRT17的表达(P<0.05),且过表达KRT17可以逆转地榆槐花汤对结肠癌细胞活力、迁移、侵袭及糖酵解的抑制作用(P<0.05)。结论:地榆槐花汤可以通过调控KRT17基因表达抑制结肠癌细胞活力、迁移、侵袭,促进糖酵解。

生物强化菌系添加量对不同食微比餐厨垃圾厌氧发酵性能影响

为考察生物强化菌系添加剂量对餐厨垃圾厌氧发酵性能影响,确定不同食微比(F/M)下最佳菌剂添加量,进行了批式厌氧发酵实验。以实验室已获得的丙酸产甲烷菌系为生物强化菌系,对不同F/M(0.5、1.0、2.0)进行生物强化,菌剂添加量设置为5%、10%、15%、25%、35%比,通过产气性能及中间代谢产物的对比,结合产甲烷动力学评价生物强化效果。结果表明:各剂量的生物强化均可促进餐厨垃圾产气,提高累积产甲烷率1~3倍;各F/M下,累积产甲烷率均随生物强化剂量增加而增大,35%的添加量产气效果最佳。就生物强化效率而言,3组F/M发酵中,F/M为1.0且菌系添加量为15%时,单位质量菌剂获得最大甲烷提升效率(1706 mL/gVS_(菌剂));中间代谢产物分析显示,生物强化可促进丙酸和乙酸的降解,避免酸抑制,从而提高产甲烷能力。修正Gompertz模型对产甲烷潜力动力学分析表明,生物强化可以缩短不同食微比下的发酵延滞期,加快反应进程。

基于HS-SPME-GC-MS对五常稻花香米挥发性指纹图谱构建

利用顶空固相微萃取技术(HS-SPME)结合气相色谱质谱联用仪(GC-MS)对五常稻花香米(五优稻4号)的挥发性成分进行定性、定量分析,建立挥发性成分指纹图谱,并利用方法学验证指纹图谱的重复性与精密性。结果表明:在恒定平衡温度条件下,最佳试验条件为萃取头材质50/30μm PDMS-DVB-CAR、样品量15 g、平衡时间40 min、萃取时间30 min、解吸温度230℃、解吸时间1.0 min;共检测出相对含量大于0.01%的挥发性有机化合物118种,占总挥发性成分的98.41%;以峰面积、总相对丰度、特征峰值为重复性验证指标,相对标准偏差均小于0.50%;通过皮尔逊相关系数法和夹角余弦法对特征峰相似度分析,结果均大于0.980,说明该方法具有较好的重复性和精密性。