灯盏细辛注射液对大鼠肝微粒体CYP3A的抑制作用

目的:研究灯盏细辛注射液对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的抑制作用。方法:在体外大鼠肝微粒体孵育体系中加入底物睾酮和不同体积的灯盏细辛注射液,用高效液相色谱法测定睾酮的羟化代谢产物6β-羟基睾酮的生成量反映CYP3A酶的活性。酮康唑用作阳性对照药。结果:在体外孵育体系中,灯盏细辛注射液对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性有抑制作用,IC50和Ki值分别为0.40%和0.24%(V/V)。结论:体外给药灯盏细辛注射液对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性有抑制作用,符合混合型抑制模型。

黄连解毒汤对人细胞色素P450酶6个亚型的体外抑制作用研究

目的:研究黄连解毒汤对人肝微粒体6个亚型CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的体外抑制作用。方法:采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定对乙酰氨基酚、6α-羟基紫杉醇、4-羟基双氯芬酸、4-羟基美芬妥英、右啡烷、1-羟基咪达唑仑和6β-羟基睾酮,分别代表CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的活性;黄连解毒汤提取物和7种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育,并计算其IC50值表示对CYP450酶的抑制程度。结果:在人肝微粒体体外孵育体系中,黄连解毒汤对CYP2D6的IC50值为3.54μg/mL,对CYP1A2的IC50值为10.8μg/mL,对CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4_T和CYP3A4_M亚酶的IC50值依次为67.7、299、530、199和607μg/mL。结论:在正常剂量下,黄连解毒汤对人肝微粒体CYP2D6和1A2可能有抑制作用,对人肝微粒体CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用。

血塞通注射液对鼠肝CYP3A体外抑制作用研究

目的:研究血塞通注射液对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的体外抑制作用。方法:在大鼠肝微粒体体外孵育体系中加入CYP3A酶的底物睾酮和不同体积的血塞通注射液,用高效液相色谱法测定睾酮的羟化代谢产物6β-羟基睾酮的生成量反映CYP3A酶的活性。酮康唑为阳性对照药。结果:在大鼠肝微粒体体外孵育体系中,血塞通注射液对CYP3A酶的IC_(50)和K_1值分别为血塞通注射液原液的0.87%和0.43%。结论:血塞通注射液在体外对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性有抑制作用,符合混合型抑制模型。

体外肝代谢模型的优缺点及其应用

在所有参与药物生物转化的器官中,肝脏是最主要的场所。药物在肝脏或者肝外的代谢是药物消除的一种主要方式。由于药物在肝脏的代谢直接与其药理活性和毒性特征相关,进而影响药物在临床上的安全性和有效性,因此药物在肝脏的代谢是临床前新药研发过程中的一个非常重要的环节。近年来,相对于整体模型来说,体外研究模型以其快速、准确、高通量的优势在药物的肝脏生物转化研究中被药物研发的科学工作者广泛使用。目前常用的体外研究模型包括重组酶、微粒体、胞质溶胶、肝脏S9(S9)、细胞株、转基因细胞株、原代肝细胞、干细胞诱导分化的肝细胞、精密肝切片和肝脏灌流。笔者将对这些方法进行详细的概述,并对各自的优缺点进行比较并阐述其具体应用方向,方便研究人员选择合适可行的代谢模型,研究药物在肝脏中可能的生物转化模式,最终对药物在人体内的消除方式作出科学的预测。

胰岛素注射液与红花注射液的配伍稳定性研究

红花注射液是由菊科植物红花（Carthamustinctorius L.）提取加工精制而成的灭菌水溶液,羟基红花黄色素A（HSYA）为其主要有效成分[1]。红花注射液是中药注射剂的一种,具有活血化瘀之功效,主要用于心血管疾病的治疗。由于心血管疾病患者对钠离子摄入有严格的限制,如用氯化钠注射液作为溶媒,不但会增加患者的心脏负荷,而且可能会影响中药注射剂的稳定性,

胰岛素注射液与盐酸川芎嗪注射液配伍稳定性考察

川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）是中药川芎根茎中的主要活性生物碱,可以从天然药材中提取,但主要来源于人工合成,作为药用的主要有盐酸川芎嗪（TMPH）和磷酸川芎嗪（TMPP）两种形式。TMPH又名四甲基吡嗪,经药理研究证明,是一种新型钙离子拮抗剂,具有活血化瘀、抗血小板凝聚、扩张小动脉、改善微循环等作用,临床上广泛用于心血管疾病的治疗。

沉默乙酰肝素酶基因对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响及机制

目的探究沉默乙酰肝素酶(Heparanase)基因对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响及机制。方法选取60只SD大鼠,随机分为Control组、I/R组、I/R+shRNA-NC组和I/R+Heparanase-shRNA组各15只。除Control组外,其余各组制备I/R模型;设计Heparanase靶向RNA干扰序列合成靶序列的双链DNA,转染至大鼠体内;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Heparanase mRNA及蛋白表达,确定干扰成功;分别检测各组胱天蛋白酶心脏功能及心肌损伤标志物、氧化应激物质及炎症因子指标;采用苏木素-伊红(HE)和TUNEL染色观察各组心肌病理变化;采用Western检测凋亡蛋白胱天蛋白酶(Caspsae)-3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果Control组心肌组织、心肌纤维及其肌外膜均结构完整且形态正常;I/R组和I/R+shRNA-NC组心肌纤维呈现弯曲状态,肌红蛋白出现溶解,同时心肌肌细胞核固缩、溶解,肌束膜出现明显破裂;I/R+Heparanase-shRNA组心肌组肌外膜较为完整、心肌纤维弯曲显著改善。相比Control组,I/R组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白(cTn)I、心肌细胞凋亡指数、切割后Caspase-3/Caspase-3(cleaved cas3/cas3)、Bax/Bcl-2比值、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著升高,心率(HR)、左心室射血分数(LVEF)、左室壁厚度(LVWT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.05);相比I/R+shRNA-NC组,I/R+Heparanase-shRNA组CK-MB、Mb、cTnI心肌细胞凋亡指数、cleaved cas3/cas3、Bax/Bcl-2比值、MDA、IL-6、TNF-α水平显著降低,HR、LVEF、LVWT、SOD水平明显升高(P<0.05)。结论沉默Heparanase基因可缓解I/R大鼠心肌细胞凋亡情况,其作用机制可能是通过抑制氧化应激及炎症反应,下调Caspase-3、Bax表达,上调Bcl-2表达,从而减轻心肌细胞凋亡。