新型超声刀用于胃癌根治术的评价探讨

目的探讨新型超声刀用于胃癌根治术的临床作用价值。方法 50例行胃癌根治术的患者随机分为观察组和对照组,各25例。观察组采用新型超声刀,对照组采用传统的手术治疗,比较两组手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数量以及术后3 d引流量。结果观察组的手术时间、手术出血量、淋巴结清扫数量以及术后3 d引流量等考察指标均显著优于对照组(P<0.05)。结论对于胃癌根治术采用新型超声刀可以减少手术时间和手术出血量并增加淋巴结的清扫术野,安全有效,值得临床推广使用。

纳米胶束对高表达CD44的肝癌干细胞作用的实验研究

目的探讨抗肿瘤药物纳米胶束对肝癌干细胞及移植瘤的作用。方法培养Hep G2人肝癌细胞株,利用CD44的抗体对所获细胞样品进行免疫分拣,逆转录PCR检测CD44 mRNA水平。肝癌干细胞接种于Balb/c裸小鼠脾脏,建立人肝癌移植瘤模型。制备表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束。小鼠随机分为表阿霉素组、三氧化二砷组、表阿霉素纳米胶束组、三氧化二砷纳米胶束组及空白对照组(n=13)。用药后采用原位末端标记法检测肿瘤组织细胞凋亡;利用免疫组化观察移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,观察各组裸鼠移植瘤体积变化及抑瘤率。结果表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组细胞凋亡增加,与未用药对照组及表阿霉素及三氧化二砷组相比均差异显著(P<0.05);表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组传代移植瘤肿瘤新生血管生成减少,VEGF表达降低,与未用药对照组、表阿霉素及三氧化二砷组相比均差异有统计学意义(P<0.05)。表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束组移植瘤瘤体体积减小,抑瘤率升高。结论表阿霉素及三氧化二砷纳米胶束能诱导细胞凋亡,降低VEGF的表达,缩小肿瘤体积、增加抑瘤率。

bcl-XL反义寡核苷酸转染对结肠癌细胞增殖及裸鼠体内人结肠癌移植瘤生长的抑制作用

目的 观察bcl-XL反义寡核苷酸转染后,对结肠癌细胞增殖及裸鼠体内人结肠癌移植瘤生长的影响.方法 制备对数生长期的SW620单细胞悬液,裸鼠背侧皮下注射.当移植瘤体积平均50mm时,将裸鼠随机分为3组：对照组、N-ODN组和反义寡核苷酸组,每组5只.反义寡核苷酸组及N-ODN组瘤旁注射2ml/kg体重的反义寡核苷酸或N-ODN,对照组瘤旁注射等量生理盐水,第16天处死裸鼠,取部分肿瘤组织,提取RNA及蛋白,采用阳离子脂质体介导的反义寡核苷酸转染、实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot、噻唑蓝（MTT）法、原位缺口末端标记法（TUNEL）等方法观察了bcl-XL反义寡核苷酸转染对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及裸鼠体内人结肠癌移植瘤生长的影响.结果 （1）对细胞增殖活性的抑制率随反义寡核苷酸浓度的增加逐渐增高,具剂量依赖性.当浓度超过200nμmol/L后,对细胞活性的增殖抑制率递增幅度明显减小,差异有统计学意义（t=2.418、1.531和1.838,P=0.003、0.016和0.011）.（2）细胞对照组、空白对照组、N-ODN组及反义寡核苷酸组的mRNA相对表达量分别为0.96±0.25、0.97±0.48、0.78±0.32及0.41±0.13,抑制率分别为0.00%、-6.25%、18.75%及57.29%,与细胞对照组比较,除空白对照组有少量增高外,N-ODN组及反义寡核苷酸组的表达依次减弱,抑制率依次增加.反义寡核苷酸组与细胞对照组、空白对照组及N-ODN组比较,差异有统计学意义（P=0.025）;N-ODN组、空白对照组及细胞对照组间两两比较,差异无统计学意义（P=0.263）.（3）与细胞对照组比较,空白对照组无明显变化;N-ODN组稍有降低;反义寡核苷酸组明显降低（P=0.017）.（4）细胞对照组、空白对照组、N-ODN组及反义寡核苷酸组的阳性细胞的阳性率分别为3.7%、5.0%、7.0%及35.0%.经统计学分析,反义寡核苷酸组与细胞对照组、空白对照组及N-ODN组比较,差异有统计学意义（χ2=181.880,P=0.000）;细胞对照组、空白对照组及N-ODN组间两两比较,差异无统计学意义（χ2=1.410,P=0.084）.（5）治疗第1天,肿瘤体积各组间差异无统计学意义（P=0.162）.第6天,反义寡核苷酸组与对照组比较差异有统计学意义（t=2.410,P=0.027）.第11、16天,各组两两比较差异均有统计学意义（P=0.028、0.016）.（6）反义寡核甘酸体内治疗后,3组裸鼠肿瘤组织中均有bcl-XL基因的表达,但反义寡核甘酸组的表达明显减弱,而对照组及N-ODN组的表达未发生明显改变.结论 bcl-XL反义寡核苷酸可有效抑制结肠癌细胞增殖及裸鼠体内人结肠癌移植瘤的生长.通过反义寡核苷酸下调bcl-XL的表达,可治疗结肠癌.

Bortezomib对胃癌细胞增殖、细胞周期及核转录因子活性的影响

目的 观察Bortezomib对胃癌细胞周期、增殖、凋亡及核因子-κB（NF-κB）的影响。 方法采用噻唑蓝（MTT）法检测Bortezomib对细胞生长的抑制作用，流式细胞仪分析Bortezomib对细胞周期及凋亡的影响，Western blot检测Bortezomib对NF-κB、NF-κB抑制蛋白（IκB）和B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）表达的影响。结果（1）Bortezomib对胃癌细胞的抑制作用具有剂量依赖性，随浓度的增加抑制作用增强（t＝7.418、5.131和6.438，P＝0.001、0.001和0.005）。（2）95D细胞出现明显的凋亡峰，与对照组G2/M期细胞所占的比例分别为（36.97±11.46）%和（19.17±5.37）%，两者比较差异有统计学意义（P＝0.031）；973细胞没有凋亡峰，与对照组比较，G2/M期细胞所占比例分别为（40.34±13.83）%和（13.10±4.72）%明显增加，两者比较差异有统计学意义（P＝0.037）；GLC82细胞既没有出现凋亡峰，也没有出现细胞周期明显改变，G2/M期细胞比例与对照组分别为（20.37±6.14）%和（12.15±2.63）%,两组比较差异无统计学意义（P＝0.173）。（3）胃癌细胞中均有NF-κB的基础性表达，且胞核中NF-κB的表达水平与胞质IκB的表达水平呈反比。（4）Bortezomib能明显下调抗凋亡蛋白bcl-2的水平，且这种抑制作用呈时间和剂量依赖趋势。不同浓度的Bortezomib作用后，细胞核中NF-κB的表达水平发生不同程度下降，差异有统计学意义（t＝6.373、4.273、3.841和4.414，P＝0.006、0.018、0.026和0.015）。结论Bortezomib能够抑制胃癌细胞增殖，并诱导凋亡发生，可能是通过NF-κB通路发挥作用。