不同RNA抽提方法对激光显微切割分离小鼠牙胚样品总RNA浓度及完整度影响的研究

目的观察不同RNA抽提方法对激光显微切割(laser microdissection,LMD)分离牙胚样品总RNA浓度及完整度影响。方法本实验按照RNA抽提的不同方式分为试剂盒组、经典Trizol法组以及改良Trizol法组。以LMD技术获取胚胎17d(embryonic 17,E17)和出生后2 d(postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;以3种不同方法提取各组总RNA后再以安捷伦公司的2100生物分析仪所提供的核糖体RNA 28 S/18 S比值(28 S/18 S ratio)、RNA完整度数值(RNA in-tegrity number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。比较各组RNA的浓度和完整度,以SPSS软件进行统计分析。结果改良Trizol法所获得RNA浓度最高,与其余2组相比,差异均有显著性;经典Trizol法组RNA浓度略高于试剂盒组,但差异并无显著性;3组间以RIN值、28 S/18 S以及样品电泳图的图形为完整度指标进行比较,均无显著性差异。结论3种RNA抽提方式对样品总RNA获得率和完整度的影响,以改良Trizol法提取的总RNA获得率最高,而3种方法对所提取总RNA完整度影响无统计学差异。改良Trizol法将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。

不同乙醇预处理方式对LMD分离牙胚组织总RNA完整度的影响

目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响。以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求。方法:本实验按照LMD切割前是否乙醇预处理的方式分为无预处理LMD组、梯度乙醇处理组以及100%乙醇处理组三组。以LMD技术获取胚胎17天(Embryonic 17,E17)和出生后2天(Postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织;提取各组总RNA,再以核糖体RNA 28s/18s比值、RNA完整度数值(RNA Integrity Number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度。数据进行统计分析。结果:100%乙醇处理组,RIN值最高且与另两组相比差异有显著性,梯度乙醇处理组RIN值与无预处理LMD组相比,并无显著性差异;以28s/18s比值为指标,100%乙醇预处理组高于其它两组,但差异并无显著性;梯度乙醇处理组与无预处理LMD组间差异亦无统计学意义。结论:100%乙醇直接处理方式更适合用于LMD切割样品的防降解预处理,可显著减少切割过程中的组织RNA完整度破坏。该步操作将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本。

人工种植牙的临床疗效观察

人工种植牙作为一种特殊的牙列缺损修复治疗方式，因具有美观、舒适等优点已被越来越多的患者所接受。我科从2006年开始使用北京莱顿生物公司生产的BLB种植系统、国产修复基台及配件，对临床使用效果等进行了观察。

锥束CT在正颌外科中的应用

目的:探讨锥束CT(cone beam computer tomography,CBCT)在正颌外科中的应用价值。方法:对20例正颌手术患者术前行CBCT扫描,提取不同的影像资料,定位正颌手术重要解剖结构位置。结果:该成像技术对正颌手术患者上颌骨翼腭管和下颌管的位置关系等重要结构均有良好的显示,为正颌手术方案设计提供了放射学的颌骨评估基础,指导了临床正颌外科的定位设计。结论:CBCT可为正颌外科提供更精准的结构解剖影像,极大地提高了手术的准确性与安全性。

螺旋CT三维重建在诊断颌骨骨折中的应用

目的探讨螺旋CT三维重建对颌骨骨折的诊断价值。方法对18例颌骨骨折患者采用螺旋CT扫描及曲面断层摄片,进行比较分析。结果螺旋CT三维重建能清楚显示颌骨骨折的立体解剖图像及其与周围解剖结构关系。结论螺旋CT三维重建有利于确定颌骨骨折的类型与骨折的移位情况,对颌面部骨折做出正确的术前诊断和优化手术方案。

温度与辅助器械对玷污层清除效果的影响

目的:比较不同温度与辅助器械对根管内玷污层的清除效果。方法:对60颗离体单根牙进行根管预备,20℃或60℃的NaOCl作为冲洗液,被动超声(PUI)或声波冲洗装置EndoActiator(EA)或侧方开口冲洗针辅助冲洗,随机分组(n=10):20℃-PUI组、20℃-EA组、20℃对照组、60℃-PUI组、60℃-EA组和60℃对照组。用热场发射扫描电镜观察,Hulsmann标准评估玷污层清除效果。结果:60℃组玷污层清除效果优于20℃组(P<0.05);20℃-PUI组、20℃-EA组效果均优于20℃对照组(P<0.05)。结论:NaOCl的温度是影响玷污层清除效果的主要因素,60℃NaOCl比20℃NaOCl更有效。

牙周病与全身疾病相关性的研究进展

牙周病是口腔常见病、多发病,是导致成人失牙的最主要原因。近年来,越来越多的研究证明牙周病也能影响全身健康或疾病,牙周病与全身健康的关系越来越引起人们的关注。本文通过对牙周病与全身疾病,如心血管疾病、糖尿病、低体质量早产儿、肺部感染、疱疹病毒感染、消化道疾病等的关系予以综述,结果表明牙周病与许多系统性疾病存在相关性,全身系统性疾病可能促进或加剧牙周病的发生、发展,而牙周病是系统性疾病的潜在危险因素,甚至可能是某些系统性疾病的独立危险因素。

牙冠延长术后上前牙修复的疗效观察

对13例16颗患牙应用根管治疗术、冠延长术,重建正常的生物学宽度后行全冠修复。结果经0.5~1年追踪随访,15颗修复效果满意。采用牙冠延长术后冠修复是保留上前牙龈下残根的一种有效方法。

应用两种激光显微切割系统获取小鼠牙胚特异组织的比较与体会

目的:探索2种激光显微切割(laser microdissection)系统应用于切割分离小鼠牙胚特定组织的不同特点。方法:以莱卡LMD6000和蔡司PALM激光显微切割系统分别获取CD1小鼠胚胎期17 d和出生后2 d的下颌第一磨牙牙囊和牙乳头组织。以Trizol法提取2套切割系统获取组织中总RNA,再以RT-PCR法检测两者中管家基因GAPDH表达量的差异。结果:应用莱卡LMD系统获得小鼠下颌第一磨牙牙胚组织中GAPDH基因表达量显著高于以蔡司的PALM系统获得组织中相同基因表达量。莱卡LMD6000激光显微切割系统操作界面友好,切割组织迅速。结论:莱卡LMD6000更适合于下游芯片实验对提取组织RNA完整度较高的要求。

发际后缘切口治疗髁颈及髁颈下骨折的临床研究

目的:探讨发际后缘切口治疗髁颈及髁颈下骨折的临床实用性。方法回顾性分析2008年1月~2012年12月沈阳医学院附属中心医院口腔科收治的15例髁颈及髁颈下骨折患者的临床资料,治疗方法和预后情况,与传统手术方法进行对比研究。结果15例患者切口均Ⅰ期愈合,咬合关系良好,开口型不偏,开口度逐渐恢复至3.0~4.0cm。发生轻度上颊支损伤1侧,发生率4.76%。结论发际后缘切口治疗髁颈及髁颈下骨折术野清晰,暴露充分,固定方便,面神经损伤发生率低。对于光头及鬓角较高患者存在瘢痕明显的问题,髁头骨折及伴有髁状突脱位需行关节盘复位的患者不适用本术式。

CAD/CAM氧化锆全瓷冠与钴铬合金烤瓷冠修复的临床应用比较

目的:探讨CAD/CAM氧化锆全瓷冠修复体的临床应用效果、美学性、稳定性和生物相容性。方法:应用计算机辅助设计和计算机辅助制作技术,对30例患者的50颗牙齿采用氧化锆全瓷冠修复设为治疗组。依据年龄相仿、牙位相同的原则采用钴铬合金烤瓷冠为对照组,随访12个月,对两组修复体色彩的口内适应性、冠体有无破损和脱落及修复前后局部龈沟液水平和龈沟液中骨钙素水平进行监测。结果:氧化锆全瓷修复体的色彩更接近口内自然环境,无破损及脱落。结论:通过CAD/CAM技术完成的氧化锆全瓷冠修复增加了冠修复的美学效果,其稳定性及生物相容性均佳,值得在临床上推广。

使用微钛钉关闭牙间隙47例效果评价

目的评价微钛钉在正畸治疗中的临床使用效果。方法对47例Ⅱ类或Ⅰ类错颌患者进行两侧上颌尖牙牵引时,一侧采用微钛钉种植牵引(种植侧),另一侧使用传统牵引法作为对照(对照侧),比较两侧尖牙移动情况及间隙丢失情况。结果共33例患者完成治疗,牵引4周两侧尖牙移动速度比较,差异无统计学意义(P>0.05),种植侧间隙丢失率为2.7%,对照侧间隙丢失率为10.8%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论微钛钉种植用于正畸治疗可有效避免间隙丢失,临床使用效果稳定。

蔗糖环境影响寡发酵链球菌抑制变形链球菌

目的:探讨环境蔗糖对寡发酵链球菌(So)抑制变形链球菌(Sm)作用及对So产过氧化氢能力的影响。方法:用平板培养法观察不同蔗糖环境下So与Sm之间的相互作用;用4-氨基安替吡啉-辣根过氧化物酶法测定So过氧化氢的初始产生速率和产量。结果:500 mmol/L蔗糖环境下未见So对Sm的抑制作用,其它浓度蔗糖环境下So对Sm的抑制作用为:50mmol/L>0 mmol/L和1 mmol/L(P<0.05);不同蔗糖环境下So过氧化氢初始产生速率为:50 mmol/L>0 mmol/L和1 mmol/L>500 mmol/L(P<0.05);过氧化氢总产量为:0 mmol/L和1 mmol/L>50 mmol/L>500 mmol/L(P<0.05)。当So先接种时对Sm的抑制能力优于同时接种。结论:蔗糖浓度影响So对Sm的抑制能力及So产过氧化氢的能力。

种植体周围炎与吸烟的相关性研究

随着当前种植牙技术的不断发展与普及，以及与此相关材料的持续改进与完善，种植修复业已成为了口腔科临床治疗牙缺失患者的常规且重要的方法之一。与此同时，不少纵横向临床研究均已证实．对多种牙周疾病尤其是某些重度牙周炎而言，吸烟已被确认为其最常见的高危因素之一，与非吸烟者比较，吸烟者在牙周炎的患病率、病情程度、失牙率以及无牙率等方面均表现的更为突出与显著，同时种植体周围炎有着与牙周炎极为相似的情况，但鉴于目前临床尚未对种植体周围炎与吸烟的关系展开深入探讨，且尚存某些争议，故本研究拟将在此方面通过一定的病例展开相关分析与讨论，旨在探讨种植体周围炎与吸烟的相关性，现报道如下。

锥形束CT在下颌阻生第三磨牙拔除术前设计中的应用

目的探讨锥形束CT(cone beam CT,CBCT)在下颌阻生第三磨牙(impacted mandibular third molar,IMTM)拔除术前设计中的应用价值。方法选择2012年9月至2013年3月在沈阳医学院附属中心医院口腔科门诊就诊,根尖片或曲面平展片检查显示下颌管(MC)与IMTM根尖相邻或相重叠的病例55例(60颗牙),行CBCT检查,根据CBCT所提供的影像资料,判断IMTM周围组织情况,采用涡轮钻分牙拔除IMTM。结果 55例患者均未出现下牙槽神经损伤情况。结论 CBCT较传统影像学检查方法成像更清晰,定位更准确,尤其有利于颊舌向位置关系的显示。对于中低位的IMTM应行CBCT检查以避免拔牙过程中损伤相邻组织结构。

慢性牙周炎患者血清炎性因子水平的变化

目的探讨慢性牙周炎患者血清IL-8、IL-6、IL-1β和TNF-α的变化规律。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）对60例慢性牙周炎患者治疗前后进行血清IL．8、IL-6、IL-1β和TNF-α水平检测，并与同期健康体检者60例作比较。结果慢性牙周炎患者治疗前血清IL-8、IL-6、IL-1β和TNF—Q水平分别为（836．5±23．7）（、7．2±1．0）、（1156．8±58．5）和（76．5±7．2）ng／L，均显著高于健康体检组（409．8±22．5）、（1．9±1．0）、（582．4±38．6）、（55．8±6．3）（均P〈0．01）；治疗3个月后，IL-8、IL-6、IL-1β和TNF-α水平分别为（443．6±16．6）、（2．2±0．9）、（605．4±42．2）和（58．2±6．5）ng/L，与健康体检者比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在慢性牙周炎的发生发展中，IL-8、IL-6、IL-1β和TNF-α发挥了重要的致炎作用，其水平的变化可从一定程度上反映疾病的情况，为预防和指导临床用药提供参考。

口底鳞癌患者血管内皮生长因子受体和Periostin的检测及其临床意义

目的通过检测口底鳞癌患者癌组织中血管内皮生长因子受体（VEGFR）和Pefiostin的表达水平，探讨其相关的临床意义。方法选取口底鳞癌患者手术切除癌组织标本64例（观察组），每例另取手术切除癌组织旁非癌组织标本（对照组）。采用荧光定量PCR检测VEGFR和Pefiosfin mRNA的表达量。结果观察组VEGFR和Pefiostin mRNA的表达量分别为0．514±0．142、0．502±0．125，显著高于对照组的0．204±0．086、0．184±0．064，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。VEGFR和Pefiostin mRNA的表达量与性别无相关性（P〉0．05），但与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况、临床分期显著相关（P〈0．05）。相关性分析显示口底鳞癌组织中VEGFR和Pefiosfin mRNA的表达呈显著正相关（r=0．624，P〈0．01）。结论VEGFR和Pefiostin在口底鳞癌的发生、发展中起到一定的作用，联合检测对于口底鳞癌的诊断、分级以及预后评估具有一定的临床指导意义。