创新型人才培养模式下高校实验室开放管理与建设研究

实验室开放为学生的实践能力、创新精神和创新能力的培养提供了必要条件。结合工作实际,以大理大学为研究对象,就实验室开放过程中出现的问题进行了分析,并就加强实验室开放管理的举措方面进行了研究和探索。为高校实验室开放管理提供了重要参考。

地方院校大型仪器设备开放共享管理研究与探索

结合工作实际,分析地方院校大型仪器设备开放共享管理使用中存在的问题,并结合高校管理体制的特点,从共享管理模式、平台建设、有偿开放、队伍建设等方面探讨开放共享体制的构建,为高校大型仪器设备开放共享管理提供参考。

美洲大蠊多肽PAP-2对肝癌血管生成、侵袭及转移能力的影响

目的:通过体内实验探讨美洲大蠊多肽PAP-2对肝癌血管生成、侵袭及转移能力的影响和作用机制。方法:建立Balb/c小鼠荷瘤模型,观察美洲大蠊多肽PAP-2、CⅡ-3和脱脂膏对肿瘤生长能力的影响;苏木精-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织的病理变化;分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学染色(IHC)法检测小鼠血清中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、CD34分子、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β(TGF-β)的含量,肿瘤组织中的相应蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time qPCR)测定肿瘤组织中bFGF、MMP-9、TGF-β的mRNA表达水平。结果:PAP-2处理后肿瘤的生长受到抑制,脏器指数增加,肿瘤HE染色显示在不同剂量组均出现不同程度坏死;PAP-2可下调小鼠血清中的bFGF含量;PAP-2下调肿瘤组织中bFGF、CD34、MMP-9和TGF-β蛋白的表达作用优于CⅡ-3和脱脂膏(P<0.05),不同剂量的PAP-2对肿瘤组织中M MP-9 mRNA、bFGF mRNA、TGF-βmRNA的表达有一定的促进作用。结论:PAP-2可以抑制H22荷瘤小鼠的肿瘤生长,其作用机制与下调肝癌组织中bFGF、CD34、MMP-9和TGF-β蛋白的表达有关,PAP-2的作用优于CⅡ-3和脱脂膏。

美洲大蠊提取物逆转人肝癌细胞HepG2/ADM多药耐药的机制研究

目的:研究美洲大蠊提取物脱脂膏及CⅡ-3(分别简称"脱脂膏""CⅡ-3")逆转耐阿霉素(ADM)人肝癌细胞HepG2/ADM多药耐药的作用机制。方法:采用MTT法考察不同质量浓度索拉非尼(阳性对照)、脱脂膏和CⅡ-3对HepG2/ADM细胞的毒性作用,并计算20%抑制浓度(IC20)。试验设置敏感组、耐药组、索拉非尼组、脱脂膏组和CⅡ-3组,敏感组使用HepG2细胞,后4组均使用HepG2/ADM细胞。敏感组和耐药组细胞给予常规培养基,其余3组细胞给予相应药物(浓度均为IC20)。采用激光扫描共聚焦显微技术测定细胞中ADM含量;采用Western blotting法测定细胞中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、剪切型胱天蛋白酶9 p37(Cleaved-Caspase-9 p37)]的表达水平;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和免疫细胞化学染色法检测细胞中多药耐药相关基因mRNA及蛋白[P-糖蛋白(P-gp)(MDR1基因表达产物)、肺耐药蛋白(LRP)、乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)]和酶介导多药耐药途径中相关基因mRNA及蛋白[谷胱甘肽转移酶(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)]的表达水平。结果:索拉非尼、脱脂膏、CⅡ-3对HepG2/ADM细胞的IC20分别为(2.40±0.16)、(200.44±27.52)、(18.00±1.82)μg/mL。与敏感组比较,耐药组细胞中Bcl-2、P-gp、LRP、BCRP、TopoⅡ蛋白表达水平以及MDR1、LRP、BCRP、GST-πm RNA表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与耐药组比较,脱脂膏组和CⅡ-3组细胞中ADM含量显著增加(P<0.05或P<0.01),MDR1 m RNA表达水平和LRP、BCRP、GST-πm RNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);CⅡ-3组细胞中Bcl-2蛋白表达水平、TopoⅡmRNA表达水平均显著降低(P<0.01),Cleaved-Caspase-9 p37蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:脱脂膏、CⅡ-3可通过减少药物外排、促进细胞凋亡、减少多药耐药相关基因和酶介导多药耐药途径中相关基因的mRNA及其蛋白的表达等方式,逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,且CⅡ-3的效果优于脱脂膏。

磷酸、膦酸酯类农药的质谱裂解规律研究

在对23种磷酸、膦酸酯类农药及其氧化物的质谱数据进行归纳整理的基础上,明确了这类农药质谱裂解规律。结果表明:电子轰击离子化条件下,磷酸、膦酸酯类农药分子极易裂解,且分子离子峰较弱。发现C_2H_6O_3P^+(m/z109)是其最具代表性的特征碎片离子。磷酸酯类农药裂解规律是二甲氧基磷酸酯P-0键易发生a断裂,生成m/z 109特征碎片离子。二乙氧基磷酸酯易脱去中性碎片C_2H_4,形成m/z81的特征离子。R'含有烯烃结构,易产生m/z127的特征碎片离子。膦酸酯类农药裂解规律与磷酸酯类似,特征性弱,膦键容易发生a断裂。选定了磷酸、膦酸酯类农药在质谱分析中常见的碎片离子,为农药残留筛查、确证分析提供参考。

ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中的应用

目的利用美国METI公司生产的生理驱动高仿真模拟人(ECS),对学生进行危重病例的抢救技能训练,评估ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中的效果。方法根据相应临床病例处理,并通过受训医学生的问卷评价结果,评估ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中的效果。结果 ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中,训练效果最佳的主要包括"加强团队协作能力"、"强化"时间就是生命"的急救理念"和"激发学习的热情"。ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中,训练效果最佳的病例主要包括"前壁心肌梗"、"消化道出血"和"充血性心力衰竭"。结论 ECS模拟人在危重病例抢救技能训练中获得了相对一致且较为理想的效果。

防腐剂亚硝酸钠对小鼠的免疫毒性研究初探

目的探究亚硝酸钠对小鼠的免疫损伤。方法选用昆明种小鼠,雌雄各半,随机分5组,为阴性、阳性对照组,低、中、高剂量亚硝酸钠组,持续给药21 d,测定小鼠体质量,脾脏、胸腺的质量及其脏器系数,血液学指标,脾脏的生化指标(MDA、SOD、GSH含量)。结果染毒后,各组间小鼠的体质量变化存在统计学差异(F=3.982,P=0.01;F=50.317,P<0.001;F=29.875,P<0.001);亚硝酸钠对胸腺的影响,阴性与阳性对照组间比较胸腺绝对质量和相对质量,差异有统计学意义(t=2.608,P=0.028;t=2.375,P=0.042),各实验组与阴性对照组间无差异,与阳性对照组间有统计学差异;亚硝酸钠对脾脏的影响,在各组间均无统计学差异;亚硝酸钠对小鼠血液学指标的影响,最敏感的指标是粒细胞(GR),各实验组与阳性组间有统计学差异;亚硝酸钠对脾脏生化指标的影响,波动较大的主要是MDA,GSH和SOD在各组间无差异。结论由于受试物、染毒剂量等因素的影响,本次实验未得到亚硝酸钠对小鼠的免疫毒性的确切证据,这也为以后的研究提供了参考和线索。

美洲大蠊多肽PAE2逆转BEL-7402/5-FU细胞多药耐药性的作用及机制研究

本研究探讨了美洲大蠊多肽PAE2逆转人肝细胞肿瘤耐药细胞株BEL-7402/5-FU的多药耐药性作用及机制。以人肝细胞肿瘤敏感细胞株BEL-7402、人肝细胞肿瘤耐5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞株BEL-7402/5-FU和Balb/c-nude小鼠为研究对象,采用噻唑蓝比色分析法检测BEL-7402/5-FU细胞的多药耐药性和交叉耐药性,通过激光共聚焦显微镜观察阿霉素在BEL-7402/5-FU细胞中的累积。使用实时荧光定量聚合酶链式反应和免疫细胞化学染色法检测BEL-7402/5-FU细胞中P-糖蛋白1(P-glycoprotein 1,P-gp1)、多药耐药相关蛋白1(multi-drug resistance protein 1,MRP1)、肺耐药相关蛋白1(lung resistance protein 1,LRP1)以及乳腺癌耐药蛋白1(breast cancer resistance protein 1,BCRP1)的mRNA和蛋白的相对表达量,确定美洲大蠊多肽PAE2逆转多药耐药性的机制。此外,在Balb/c-nude小鼠中,建立BEL-7402/5-FU细胞的腋下移植瘤模型,观察美洲大蠊多肽PAE2对腋下移植瘤小鼠的免疫器官、肝肾功能、肿瘤抑制与诱导肿瘤细胞调亡、调节肿瘤组织多药耐药相关蛋白等环节的影响。结果显示,美洲大蠊多肽PAE2能有效逆转BEL-7402/5-FU细胞的多药耐药性和交叉耐药性,作用机制可能与下调多药耐药相关蛋白的表达水平有关,降低了多药耐药细胞对抗肿瘤药物的外排能力、影响抗肿瘤药物分子代谢,从而达到逆转人肝细胞癌多药耐药的作用。

基于线粒体16SrRNA序列和线粒体基因组裂化程度分析吸虱亚目系统发育

【目的】吸虱亚目是真兽类哺乳动物体表的专性吸血寄生虫和潜在的病原传播媒介昆虫。吸虱亚目线粒体基因组具有不同于两侧对称动物线粒体基因组传统认识的典型性,其线粒体基因组呈现出剧烈的裂化现象,形成多个线粒体微环染色体。目前针对吸虱亚目16SrRNA基因序列和线粒体基因组裂化程度分析吸虱亚目系统发育的研究很少,亟需对吸虱亚目的亲缘关系进行研究和探讨。【方法】采用非加权组平均法(UPGMA)、邻近法(NJ)和最大简约法(MP)对6科6属13种吸虱的16SrRNA基因长片段序列进行进化关系分析。采用高通量测序法测定2科2属4种吸虱的线粒体基因组,并分析5科5属10种吸虱线粒体基因组裂化程度与吸虱亚目的系统发育关系。【结果】进化树结果表明吸虱的6个科均为单系群,猴虱科较另外5个科相对原始,结果支持形态分类地位。对5科5属10种吸虱线粒体基因组裂化程度分析结果表明裂化速率最快的是3种人虱(体虱、头虱和阴虱),最慢的是3种血虱(猪血虱、野猪血虱和驴血虱),4种鼠虱(亚洲多板虱、棘多板虱、红姬甲胁虱和克氏甲胁虱)处于中间。在进化树上,进化程度由低到高依次为血虱<鼠虱<人虱,与线粒体基因组裂化所显示的由慢到快的顺序一致。【结论】系统进化树中不同谱系的吸虱基本上形成单系群,结果与形态学研究结果非常吻合。吸虱亚目线粒体基因组的裂化程度或许与类群(分类单元)的进化程度具有一致性。