人体形态学教学中的哲学思维——以组织胚胎学为例

人体形态学是医学课程体系的重要组成部分,教师应该在传授人体形态学基本知识和技能的同时,传授给学生善于运用哲学思想来观察和研究人体的形态结构、组织发育及病变形成,培养学生科学的学习方法和创新思维,逐步养成用哲学思维认识人体世界,分析问题和解决问题。

胚胎学教学改革体会

为了改进胚胎学教学效果 ,我们首先在药学和检验专业的胚胎学教学中进行改革试点 ,把胚胎学的理论课和实验课合二为一 ,在实验室中进行“一体化”教学 ,结果经对比分析 。

医学留学生《胚胎学》全英语教学探索与实践

胚胎学属于形态学和发育生物学的范畴,针对医学留学生学习人体胚胎学的自身特点,采用小班授课,以多媒体结合传统教学方法为主,同时结合PBL、TBL及自主学习等多种教学模式,让留学生更好的理解正常的发育过程与异常的临床畸形及疾病的相关性,尽量体现"理论联系实际"的教学理念,取得了很好的教学效果,大大的提高了医学留学生胚胎学的教学质量。

脑源性神经营养因子基因修饰的胚胎大鼠皮质神经干细胞及其在体外的分化

目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰大鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)后BDNF的表达,并观察其对NSCs体外诱导分化的影响。方法体外分离、培养大鼠胚胎脑皮质神经干细胞并鉴定;构建BDNF基因重组质粒,非脂质体法转染NSCs,实验分为pcDNA3.1-BDNF组、pcDNA3.1组和未转染NSCs组。免疫细胞化学技术和RT-PCR检测转染后BDNF蛋白和mRNA的表达;在含5%胎牛血清的分化培养基中诱导分化,βIII-微管蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和突触素(SYP)免疫细胞化学染色对分化细胞进行鉴定,并观察pcDNA3.1-BDNF转染NSCs分化过程中SYP的表达变化。结果体外培养获得巢蛋白(nestin)阳性的NSCs。成功构建BDNF基因重组质粒,免疫细胞化学和RT-PCR检测均显示,与pcDNA3.1组和NSCs组比较,pcDNA3.1-BDNF组NSCs的BDNF表达明显增强(P<0.05)。pcDNA3.1组和NSCs组比较,无显著性差异(P>0.05)。分化后第4天,各组细胞均可分化为βIII-微管蛋白阳性和GFAP阳性细胞,pcDNA3.1-BDNF组可见少量SYP阳性表达细胞。分化后第7天,与pcDNA3.1组和NSCs组比较,pcDNA3.1-BDNF组NSCs分化为βIII-微管蛋白阳性神经元的比例明显增高,有显著性差异(P<0.05),SYP阳性细胞数增多,表达增强。结论 BDNF转染NSCs具有体外分泌BDNF的能力,能够促进NSCs定向分化为神经元,SYP表达增强,可能在促进神经元之间的突触发生中发挥作用。

应用组织芯片技术检测果糖二磷酸醛缩酶在肝癌与胰腺癌组织中的表达

目的探究果糖二磷酸醛缩酶ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用组织芯片和免疫组织化学方法检测ALDOA在肝癌、胰腺癌及其相应的正常组织中的表达。结果 ALDOA在肝癌组织中的阳性表达率为80%(24/30),在正常肝组织中的阳性表达率为33.3%(2/6),二者之间表达差异具有统计学意义(P<0.05)。ALDOA在胰腺癌组织中的阳性表达率为66.7%(20/30),在正常胰腺组织中的阳性表达率为0%(0/6),二者之间表达差异具有统计学意义(P<0.01)。ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度无关(P>0.05);胰腺癌组织中的ALDOA高表达与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中表达上调。

结缔组织生长因子在胃硬癌形成机制中的作用

目的研究结缔组织生长因子（CTGF）表达与胃癌大体分型的关系，并探讨其在胃硬癌间质纤维化形成中的作用。方法采用免疫组化染色SP方法，检测28例胃硬癌（胃硬癌组）、30例胃非硬癌（非硬癌组）及30例癌旁良性胃组织（对照组）中CTGF及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，应用苦味酸-天狼猩红染色方法检测Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维在以上三组中的表达。结果胃硬癌组中CTGF、Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维的表达水平均明显高于非硬癌组及对照组（P〈0．01）；与对照组相比，非硬癌组中CTGF、Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维的表达显著增强（P〈0．01）；CTGF的表达与胃壁组织的纤维化程度呈正相关（P〈0．01）；α-SMA在胃硬癌组与非硬癌组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；α-SMA表达与CTGF、Ⅰ型及Ⅲ型胶原纤维的含量无明显相关性（P〉0．05）。结论CTGF在以胶原纤维性间质增生为特点的胃硬癌形成过程中起促进作用，成肌纤维细胞不是胃硬癌纤维化间质的主要来源细胞。

提高组织学实验课教学质量的几点体会

组织学是一门重要的形态学基础课，是医学生最早接触的医学入门课程之一，它是研究正常人体的微细结构及其相关机能的科学，其内容抽象、枯燥，因而通过组织学实验课给学生以直观的感性认识是非常重要的，是理论课必要的辅佐和补充，是强化理论知识和增强形态概念的重要手段。本文就如何提高组织学实验课教学质量的几点体会与同行们交流。

Aurora-A基因在肺鳞癌组织中的表达

目的探讨Aurora-A基因在肺鳞癌组织中的表达。方法采用免疫组化方法检测Aurora-A基因蛋白在肺鳞癌及其癌旁组织中的表达水平。结果48例肺鳞癌中32例肿瘤组织Aurora-A基因表达率(66.67%)较其对应癌旁组织高,且表达水平与肺鳞癌的转移和临床分期相关。结论Aurora-A基因在肺鳞癌组织中呈过表达,因此,Aurora-A基因有望成为新的肺癌分子治疗靶点和肿瘤标记物。

人胚胎肌硬膜桥发育解剖学研究

肌硬膜桥(MDB)是存在于枕下区头后小直肌、头后大直肌、头下斜肌及项韧带与硬脊膜之间的致密结缔组织桥。众多研究提示MDB可能存在重要的生理作用。然而,目前关于人MDB的发育学研究还很少有报道。本研究采用石蜡切片、Masson和天狼星红染色等方法,对12~40周的人胚胎(E)进行组织学观察,以明确MDB及其相关结构的发育特点。观察人胚胎枕下区矢状切面,结果可见:①硬脊膜:从E12周开始就是多层结构,硬脊膜与寰枕和寰枢后膜紧贴附;随着发育,硬脊膜逐渐增厚;②枕下肌:寰枢间隙的肌细胞从E12周就已经很明显;而寰枕间隙的肌细胞发育明显晚于寰枢间隙,约从E13周开始才明显增多;约至20周,肌细胞形态接近成熟肌细胞;③寰枕后膜与寰枢后膜:在E12~E13周时寰枕后膜与寰枢后膜完全封闭寰枕间隙及寰枢间隙;E15周起,寰枕后膜的下方出现一个间隙,可以观察到有许多MDB纤维样结构从这个间隙通过,并融入硬脊膜;E15周MDB纤维也开始穿过寰椎后弓与头下斜肌之间的间隙,向前下走行穿过寰枢间隙进入椎管并融入硬脊膜;大约从E22周开始,穿过寰枢间隙的MDB纤维呈放射状附着在硬脊膜上;④MDB纤维成分:天狼星红染色、偏振光显微镜下,在E15周,可见微弱的Ⅰ型胶原纤维的红色双折光,在E21周强度明显增加,在之后的生长发育过程中,MDB纤维逐渐增强。

依托精品课程教学平台,建设组织胚胎学立体化教材

当今的医学正在迅猛发展，医学教学正在进行课程整合教学模式及PBL教学模式等改革，使得医学教育面临新的挑战，必须不断改革和探索，才能最大程度地应对挑战，培养高质量、高素质的医学生，为培养新一代合格的医生打好基础。而现在正处于知识信息爆炸的时代，信息化教学条件在飞速发展，人们获取知识的方式更便捷、更多样，传统纸质教材提供的有限信息，已远远落后于医学教育改革的要求，只有通过不断改革和完善，建设医学专业的立体化教材，才有可能有效解决早期接触临床与医学基础知识缺乏的矛盾，

青年教师从事留学生组织胚胎学全英文教学的优势

上个世纪50年代，我国接受了第一批来自东欧国家的33名留学生，掀开了新中国来华留学教育史的第一页。经过半个多世纪，随着我国高等教育国际化趋势的发展，我国已成为国际学生流动的重要目标国家之一。为了适应医学高等教育国际化的趋势，我校国际交流学院从2005年开始招收了印度、巴基斯坦和尼泊尔等十几个国家的留学生来我校学习。他们在本国已具有良好的英语基础，所以在校期间采用英语授课方式。组织胚胎学是医学生的一门非常重要的基础课，其教学效果的好坏不仅影响整体教学质量，同时也对中外医学教育交流产生影响。因此教师需要面临更大的挑战，而青年教师以他们独有的优势，已经逐渐在留学生的教学中崭露头角。

β-榄香烯乳剂逆转多药耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素耐药性研究

目的 :测定中药 β-榄香烯乳剂对 MCF- 7/ ADM细胞的无毒剂量 ,并检测此无毒剂量是否有逆转 MCF- 7/ ADM细胞对化疗药物阿霉素 (ADM)的多药耐药 (multidrug resistance,MDR)性。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定药物的细胞毒性及耐药细胞逆转倍数 ;荧光分光光度法测定细胞内药物浓度。结果 :无毒剂量的 β-榄香烯乳剂 (6 μg/ m l)能显著降低化疗药物 ADM对乳腺癌耐药细胞株 MCF- 7/ ADM细胞的 IC50 ,明显增加耐药细胞内药物浓度。结论 :初步研究表明β-榄香烯乳剂具有逆转 MCF- 7/ ADM细胞 MDR的作用。

川芎嗪对转基因多药耐药细胞K562/MDR耐药性的逆转作用

目的：研究川芎嗪（TMP）与环孢菌素A（CsA）单独及联合逆转人红白血病多药耐药细胞K562/MDR的多药耐药性（MDR）,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法：分别以倍比稀释后不同浓度的TMP（506 400 mg·L^-1）和CsA（0.5256 mg·L^-1）作用于体外培养的K562/MDR细胞72 h,采用MTT法检测细胞生长率,确定TMP和CsA的非细胞毒性剂量;采用非细胞毒性剂量,实验分为5组：G1组（TMP＋ADM＋K562/MDR）、G2组（CsA＋ADM＋K562/MDR）、G3组（TMP＋CsA＋ADM＋K562/MDR）、阴性对照组（以K562/S代替K562/MDR）、空白对照组（以1640培养基代替药物）,检测各组细胞生长抑制50%的ADM浓度,即IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;利用荧光分光光度法检测各组细胞内ADM浓度;流式细胞术检测跨膜糖蛋白P-gp的表达情况。结果：TMP及CsA的非细胞毒性剂量分别为320和2.0 mg·L^-1,K562/MDR细胞的耐药倍数为19.2倍;TMP及CsA均能降低K562/MDR细胞的耐药性,逆转倍数分别为5.2及9.6倍,并且两者联合应用,逆转倍数为15.6倍;TMP和CsA单独及联合应用均能明显增加K562/MDR细胞内ADM浓度;TMP及CsA单独应用均能降低K562/MDR细胞P-gp的表达,并且两者联合应用使K562/MDR细胞P-gp的表达率明显降低,与阴性对照组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论：TMP和CsA单独及联合应用可逆转K562/MDR细胞对化疗药物ADM的MDR,且两者具有协同作用。其逆转机制可能为降低P-gp水平,升高细胞内ADM浓度,增强对ADM的敏感性,从而发挥治疗肿瘤的作用。

DC-CIK过继性免疫疗法联合化疗治疗转移性结直肠癌患者的疗效

目的:研究DC-CIK(dendritic cell-cytokine induced killer cell)过继性免疫治疗联合化疗对转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)的疗效及安全性。方法:选取2010年11月至2011年11月在大连市中心医院治疗的80例mCRC患者,40例行DC-CIK治疗联合化疗(联合组),40例行单纯化疗(化疗组),评价两组患者治疗后免疫功能、疗效、毒副反应和生活质量(quality of life,QOL)。结果:共完成了160周期DC-CIK治疗,联合组治疗前后外周血T细胞亚群无显著变化(P>0.05),化疗组治疗后外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD56+细胞比例较治疗前显著下降,且明显低于联合组(P<0.05);联合组3周期治疗后CD4+T细胞中IFN-γ水平较治疗前显著升高(P<0.05),化疗组治疗后IFN-γ、IL-2、TNF-α水平著下降,且明显低于联合组(P<0.05)。联合组和化疗组总有效率(response rate,RR)未见明显差异(37.5%vs 22.5%,P>0.05);联合组疾病控制率(disease control rate,DCR)明显高于化疗组(77.5%vs 50.0%,P<0.05)。联合组Ⅲ～Ⅳ度白细胞减少及Ⅲ～Ⅳ度迟发性腹泻的发生率明显低于化疗组(17.5%vs 42.5%,5.0%vs 25.0;均P<0.05),其他相关不良反应无显著性差异,而且对症治疗后均可缓解。联合组患者的中位无进展生存(progression-free survival,PFS)较化疗组患者长(6.5个月vs 4.5个月,P<0.05),联合组和化疗组患者的总生存(overall survival,OS)比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组在躯体功能、情绪方面较治疗前明显改善,而且明显好于化疗组(P<0.05)。结论:DC-CIK过继性免疫治疗联合化疗可以明显改善mCRC患者的免疫功能,提高总体疗效,减轻化疗不良反应,延长无进展生存,改善mCRC患者生活质量。

蝎毒对人白血病细胞株的抑制作用

目的 :采用 3种人白血病细胞株 (人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL - 6 0、人红白血病细胞株K5 6 2 )作为实验模型 ,观察东亚钳蝎毒对人白血病细胞的生长抑制作用。方法 :台盼蓝排染法细胞计数观察细胞生长、MTT法检测蝎毒对细胞的毒性、流式细胞术分析凋亡细胞。结果 :蝎毒对Raji、HL - 6 0、K5 6 2 3种人白血病细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,并且其作用强度在一定范围内呈现浓度和时间依赖性。结论

川芎嗪逆转肿瘤多药耐药性及其机制的研究

目的:探讨川芎嗪(tetrameth-ylpyrazine,TMP)逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对多柔比星(adriamycin,ADM)的耐药及其P-糖蛋白(P-glycopro-tein,P-gp)表达的影响。方法:MTT法测定细胞的药敏性,荧光分光光度法检测细胞内多柔比星浓度的变化,流式细胞术检测耐药细胞凋亡率的变化,流式细胞术观测细胞P-gp的表达。结果:非细胞毒性剂量(320mg/L)川芎嗪能显著降低MCF-7/ADM的IC50(P=0·0031),逆转倍数为2·13倍;且能明显增加耐药细胞ADM的浓度(P=0·0042)和凋亡率(P=0·0026);320mg/L川芎嗪使耐药细胞的P-gp表达率由(90·6±0·41)%降低至(69·1±1·65)%。结论:川芎嗪具有部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对多柔比星的耐药性,其逆转机制可能与抑制该细胞P-gp的表达有关。

补骨脂素加长波紫外线照射对白血病K562细胞的杀伤作用

目的:探讨补骨脂的提纯物补骨脂素(psoralen)加长波紫外线(ultraviolet-A light)照射光化学疗法,亦称PUVA(psoralen plus ultraviolet-A light)疗法,对慢性粒细胞白血病红白病变细胞株K562细胞的杀伤作用。方法:以传代培养的K562细胞为模型,采用四甲基偶氮唑盐比色法(monotetrazolium test,MTT)测定单纯补骨脂素、单纯紫外线照射及PUVA疗法对白血病细胞的杀伤作用;采用流式细胞仪对其进行DNA含量分析,并用早期凋亡试剂盒Annexin-Ⅴ-FITC和碘化丙啶(propidine iodide,PI)双染法测定单纯补骨脂素对白血病细胞的作用;采用电镜技术对其进行形态学观察。结果:单纯补骨脂素或单纯紫外线照射对K562细胞均有杀伤作用,PUVA比单纯补骨脂素或单纯紫外线照射对K562细胞的杀伤作用有明显增强(P<0.05)。PUVA处理后的白血病细胞通过流式细胞仪可以检测到亚二倍体凋亡峰。电镜下可见:细胞体积变小,胞浆浓缩,胞核染色质聚集或边集,核小体碎裂,大部分细胞呈典型的凋亡形态。结论:中药补骨脂提纯物补骨脂素对人白血病细胞K562具有杀伤作用。补骨脂素具有光敏活性,结合360 nm波长紫外线照射治疗对K562细胞的杀伤作用有明显增强。紫外线照射时间以10 min为最佳;补骨脂素适宜的终浓度为40μg/ml。PUVA对人白血病细胞K562杀伤作用的机制主要是诱导细胞凋亡。

L-选择蛋白可能介导小鼠肝癌HCa-F细胞经淋巴道转移的研究

目的 观察L 选择蛋白是否介导小鼠肝癌HCa F细胞与淋巴结黏附 ,探讨HCa F细胞特异性向周围淋巴结转移的分子机制。 方法 应用免疫细胞化学方法验证小鼠肝癌HCa F细胞为非淋巴细胞来源 ;用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测L 选择蛋白在HCa F细胞的表达 ;并用L 选择蛋白的抗体抑制HCa F细胞与冰冻淋巴结切片间的黏附实验 (Stamper Woodruffmethod)检测L 选择蛋白的功能。 结果 HCa F细胞为非淋巴细胞来源的肝癌细胞 ,在其表面有L 选择蛋白的表达 ,且HCa F细胞与淋巴结之间的黏附可被L 选择蛋白的抗体抑制。结论 非淋巴细胞来源的HCa F细胞表面表达功能性L 选择蛋白分子 ,并可协助其与淋巴结黏附 ,从而可能介导HCa F细胞向淋巴道转移。

β-榄香烯对K562/阿霉素细胞多药耐药性的逆转及其对P-糖蛋白表达的影响

目的探讨β-榄香烯(-βelemene)对多药耐药细胞株K562/阿霉素(ADM)的耐药逆转及其对该细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法采用MTT法检测细胞的药敏性及耐药逆转,免疫组织化学及免疫电镜观察P-gp的表达,流式细胞术进行定量分析,应用SPSS(10.0 production pacility)软件包对实验结果进行统计学处理。结果1.非细胞毒性浓度的-βelemene(4.0 mg/L)可显著降低ADM对K562/ADM细胞的IC50(P<0.01),逆转倍数为2.18倍;2.P-gp在耐药细胞株K562/ADM中呈高表达,而在敏感细胞株K562中表达很低,进一步定位研究结果表明,P-gp主要分布于细胞膜上;3.非细胞毒性浓度的-βelemene(4.0 mg/L)能够显著降低耐药细胞P-gp的表达。结论-βelemene能够明显逆转K562/ADM细胞对ADM的耐药性,降低该细胞P-gp的表达是其主要逆转机制之一。