基于文献数据库分析中药特征与免疫效应的关系及其数学模型的建立

目的:据已发表的有关中药免疫研究文献为研究基础,分析中药特征与免疫效应的关系并建立相应的数学模型。方法:收集、筛选1980年以来国内公开发表的《中国药典》所载中药植物药免疫研究的文献,根据检索结果统计不同生物分类、不同药性、药味、归经、不同入药部位的中药数量和其中具有免疫作用的中药味数;用多元判别分析建立回归数学模型。结果:味辛的药物具有免疫作用的比例较低(P<0.05);地下部分入药的中药具有免疫作用的比例较高(P<0.05);归心经、肾经的药物具有免疫作用的比例较高(P<0.05);多元判别分析结果与原判定结果符合率为74.7%。结论:中药的药味、药物归经及入药部位与免疫调节作用有关,以此为基础建立的数学模型可以作为中药免疫药理研究的参考。

基于中药免疫组学对中药方剂免疫调节作用的评估

目的:探讨和建立对中药复方免疫调节作用的评估方法。方法:根据单味中药免疫效应评估数学模型计算出中药复方每味中药有免疫效应的概率和中药复方有免疫效应的概率;由CNK I文献数据库中调出实验证实具有免疫调节作用的中药复方,根据中药文献学原理验证评估结果。结果:共查及83篇文献符合要求,共计60个方剂,其中有53个中药方剂计算判别有免疫效应,符合率为88%(53/60);有2篇以上文献支持有免疫调节作用的中药复方有免疫调节作用的判别概率平均为0.89±0.03,随机中药组有免疫调节作用的判别概率平均为0.60±0.29,两者有统计学显著差异(P<0.05)。结论:初步证明本研究提出的中药复方免疫调节作用的评估方法对阐述中药方剂的免疫调节效应具有一定的指导意义。

基于中药信息学对三种中药免疫调节作用的实验研究

目的:探讨利用中药文献信息资源筛选具有免疫调节作用的中药的可能性。方法:于药典中随机选取10味中药分别查阅相关文献,选择有2个或2个以上单位独立完成并发表2篇以上支持具有免疫调节作用论文的中药进行实验研究,共计有3种中药(白芍、何首乌、山药)入选。将3种中药制成含20%生药的生药液,用该生药液给已经用卵清蛋白免疫过的小鼠灌胃,每天1次,每次0.5mL只/,连续7天,测血清中相应抗体水平。结果:3种中药均能使小鼠体内的卵清蛋白抗体显著升高,与生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)。结论:初步证明中医药信息库的中药信息资源具有较高的可靠性,本文提出的筛选原则对筛选具有免疫调节作用的中药具有一定的指导意义。

HLA-A、B等位基因多态性与“长寿”的相关性及其可能的免疫学机制

目的探讨HLA-A、B等位基因多态性与“长寿”的相关性及其可能的免疫学机制。方法应用微量聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对大连地区“长寿老年人”的40条染色体HLA-A、B等位基因进行分型,同时建立随机对照组。对20例“长寿老年人”的ANA和RF进行检测。结果“长寿老年人”的HLA-A29基因频率(5.00%)明显高于正常对照(0.33%)(P<0.05);HLA-B13基因频率(17.50%)明显高于正常对照(7.00%)(P<0.05)。而HLA-B61的基因频率(0.00%)明显低于正常对照组(12.00%)(P<0.05)。其他等位基因频率在实验组与对照组之间无显著性差异。“长寿老年人”ANA阳性率为90%,RF的阳性率为20%。结论HLA-A29和HLA-B13基因可能是人类长寿的有利基因,HLA-B61与长寿负相关,可能是长寿的不利基因。“长寿老年人”免疫学指标有特征性改变,可能与长寿有关。HLA-A、B等位基因的某些组合可能是二者的基因基础。

应激致免疫功能降低动物模型的建立

目的为探讨应激对免疫系统损伤的作用机制,建立了两种不同的应激导致机体免疫功能降低的动物模型。方法将小鼠分为三组,束缚应激组、热应激组和正常对照组,分别用束缚和高温刺激使小鼠处于应激状态,应激结束后将各组小鼠均分为两部分,一部分感染细菌,比较两种应激状态下小鼠与正常小鼠的死亡率,另一部分摘取脾脏,计算脾脏重量指数,制作脾脏病理切片,观察其组织病理学变化。结果注射大肠埃希菌后束缚应激组和热应激组小鼠死亡率显著高于正常对照组小鼠(P<0.005),束缚应激组和热应激组小鼠死亡率无明显差异(P>0.05)。束缚应激组小鼠和热应激组小鼠脾脏重量指数均较正常对照组明显降低(P<0.05),组织病理学观察显示束缚应激组和热应激组小鼠脾脏切片病理学改变相似,白髓比例减小,脾小体有不同程度的缩小、分布及结构不规则。结论本实验建立的应激导致小鼠免疫功能降低的动物模型,其免疫功能降低与脾脏变化间存在构效关系,与应激的类型关系不大。

海参免疫调节作用的实验研究

目的探讨海参对小鼠机体免疫机能的影响。方法将海参制成20%的生物液,给已经卵清蛋白免疫过的小鼠灌胃,连续7d,然后检测血清特异抗体水平。结果给药组小鼠抗卵清蛋白抗体水平有显著增高(P<0.05)。结论食用海参可显著提高小鼠的体液免疫应答功能。

不同应激对小鼠免疫防御功能的影响及其与H2-Eb基因多态性的关系

探讨两种应激对小鼠免疫防御功能的影响及其与H2-Eb基因多态性的关系。制备束缚应激和热应激动物模型,以大肠埃希菌攻击小鼠,比较应激状态下小鼠与正常小鼠的死亡率;采用PCR技术检测以MudoEb5和MudoEb7为代表的小鼠H2-Eb位点等位基因的多态性,分析应激免疫与H2-Eb基因多态性的关系。结果发现小鼠染菌后束缚应激组和热应激组小鼠死亡率均显著高于对照组小鼠(P<0.005),束缚应激组和热应激组小鼠死亡率无明显差异(P>0.05)。正常对照组和束缚应激组小鼠MudoEb5基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间均无明显相关性(P>0.05),热应激组小鼠MudoEb5基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间存在明显相关性(P<0.05),三组小鼠MudoEb7基因型与小鼠接受细菌攻击后生存状态间均无明显相关性(P>0.05),MudoEb5和MudoEb7交互作用对各组小鼠染菌后生存状态均无明显影响(P>0.05)。可见束缚应激和热应激均可降低小鼠的免疫防御功能,MudoEb5可能与热应激条件下免疫防御功能降低程度有关。

免疫球蛋白和补体24小时检测数值的个体基线漂移的定量分析

目的：对免疫球蛋白和补体标短期检测数值的个体基线漂移进行定量分析。方法：在对可能影响实验结果的因素严格控制的条件下间隔24小时两次采集志愿者的静脉血，将两次血标本同批于自动免疫生化分析仪上检测，检测项目包括：103、IgA、IgM和C3、C4。计算同一个体两次采血（实验组）和一份标本同批两次检测（对照组）指标的变化率（基线漂移率）。结果：同一个体两次采血5项免疫学指标检测结果有6．12％～7．97％（平均7．22％）的基线漂移率，和对照组比较均有统计学显著差异（P〈0．05）。免疫学指标个体基值漂移呈相关变化，漂移不独立。结论：免疫学指标间隔24小时有明显的检测数值个体基线漂移，其可能是构成正常人群检测数值变异的重要来源。

牡蛎散对小鼠免疫功能影响的研究

目的:探讨牡蛎散对小鼠免疫功能的影响。方法:把实验小鼠分为两组:实验组、对照组。用卵核蛋白(1:20)作为抗原给正常小鼠腹股沟皮下注射作为基础免疫后,实验组从当日起每日灌服中药煎剂牡蛎散,对照组当日起每日灌服5%葡萄糖液体,7天后再用卵核蛋白(1:100)作为抗原进行加强免疫,再7天后用ELISA法检测相应抗体生成水平。结果:实验组小鼠的抗体水平显著下降,与对照组相比较有明显差异,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:牡蛎散对小鼠免疫功能有抑制作用。

束缚和热应激小鼠内分泌免疫变化与H_2基因多态性的关系

目的 探讨不同类型的应激反应内分泌 免疫变化的特点及其与H2基因多态性的关系。方法 制备束缚应激(倾向于精神性应激和慢性应激 )和热应激 (倾向于躯体性应激和急性应激 )实验动物模型。采用碳粉廓清试验测定小鼠单核吞噬细胞系统的功能;通过放射免疫技术测定血清中皮质醇的水平。同时采用PCR技术检测MudoEb5和MudoEb7为H2 Eb位点遗传多态性标志,分析应激免疫和遗传的关系。结果 束缚组较对照组的吞噬指数有明显的下降(6. 54vs7. 89,P<0. 05),但血清皮质醇水平无统计学差异(9. 37vs7. 99,P>0. 05 );热应激组较对照组的吞噬指数有明显的下降 ( 6. 82vs7. 89, P<0. 05),血清皮质醇有显著性升高(17. 53vs7. 97,P<0. 05)。束缚组MudoEb5+与MudoEb5 的吞噬指数无显著性差异(6. 23vs6. 63,P>0. 05),MudoEb7+与MudoEb7 的吞噬指数有显著性差异(5. 85vs7. 39,P<0. 05);热应激组MudoEb5+与MudoEb5 的吞噬指数无显著性差异 (7. 29vs7. 36, P>0. 05),MudoEb7+与MudoEb7 的吞噬指数有显著性差异(7. 00vs8. 38,P<0. 05)。结论 在不同类型的应激条件下,小鼠的内分泌 免疫变化有所不同,其免疫变化与H2 Eb多态性有关。

因中药免疫组学而对中药四君子汤免疫调节作用的研究

目的:探讨和验证中药免疫组学研究基本思路和方法。方法:根据单味中药免疫效应评估数学模型计算出四君子汤每味中药有免疫效应的概率和四君子汤有免疫效应的概率;以SRBC激发小鼠的免疫系统,对小鼠ig四君子汤和生理盐水,检测小鼠抗SRBC抗体水平;比较对四君子汤免疫效应的计算判别和实验判别的结果。结果:四君子汤计算判别有免疫作用;实验组抗SRBC抗体生成水平高于对照组(P<0.05);计算判定结果与实验结果相符。结论:初步证明本文提出的中药免疫组学方法对阐述中药的免疫调节效应具有一定的指导意义。

HLA-DR、DQ座位等位基因与“慢性疾病”关联的研究

目的:探讨HLA基因系统某些特定的等位基因,其同一基因在各种疾病的发生中均起重要作用的可能性。方法:实验组为用于不同研究目的的各类慢性疾病的DNA储存标本,共收集8种疾病,分别是:肝硬化、乙型肝炎表面抗原携带者、青光眼、鼻息肉、精神分裂症、白内障、艾滋病和慢性肾衰。每种疾病随机采取15份标本,共计12 0份标本;对照组标本取自献血体检健康者血样,共计80份。HLA- DR、DQ座位等位基因检测采用PCR SSP法。结果:HLA -DR、DQ座位各等位基因在“慢性疾病”组中不同疾病的分布构成比均无统计学显著差异;“慢性疾病”组与对照组比较,HLA- DR座位的各等位基因分布构成比无统计学显著差异,DQ座位的各等位基因分布构成比有统计学显著差异(P <0 .0 5 ) ;HLA- DQ9在“慢性疾病”组的检出率为14 . 5 8% ,在对照组的检出率为6 .2 5 % ,两组有统计学显著差异(P <0 0 5 )。结论:在HLA- DQ座位上可能存在与各类疾病发生有关的基因,HLA- DQ9可能在各类疾病的发生中有一定作用或其与一类有普遍致病意义的基因连锁。

小鼠H2Eb位点的PCR-SSP检测与多态性

为探讨小鼠遗传背景的多态性,我们采用PCR SSP技术对60只昆明种(KM)小鼠的H2Eb位点第二个外显子的等位基因进行鉴定,得到78个PCR阳性结果,共检出65%的等位基因且43.3%小鼠此位点的基因型相同。KM小鼠具有一定程度的遗传多态性。

精神分裂症血清中自身抗体与Fas诱导因子活性关联

目的探讨精神分裂症自身抗体产生的特点和机制。方法以未使用任何抗精神病药物的精神分裂症患者为首发精神分裂症组;以经采用抗精神病药物治疗使精神分裂症症状缓解的患者为药物控制组;以健康者为对照组。采集各组血清标本,检测抗核抗体、类风湿因子和抗心磷脂抗体;将各组血清与正常淋巴细胞共育,检测淋巴细胞Fas蛋白的表达水平以确定各组血清中Fas蛋白诱导因子活性水平。结果首发精神分裂症患者的抗核抗体和抗心磷脂抗体水平显著高于对照组(P<0.01),类风湿因子与对照组相比无统计学显著差异(P>0.05);药物控制组各指标与对照组相比无统计学显著差异(P>0.05);首发精神分裂症患者血清中的Fas表达诱导因子的活性水平显著高于对照组(P<0.01);药物控制组血清中的Fas表达诱导因子的活性与对照组相比无统计学显著差异(P>0.05);抗核抗体和抗心磷脂抗体水平与Fas表达诱导因子的活性水平等级正相关(P<0.01)。结论精神分裂症血清中有促进Fas/FasL凋亡信息传导途径的因子存在,其可能是精神分裂症自身抗体产生重要环节。

乳腺癌患者外周血T细胞亚群检测

[目的 ]探讨乳腺癌患者外周血T细胞水平的变化。 [方法 ]用WuT系列单克隆抗体检测健康女性及乳腺癌患者外周血T细胞亚群 (T3、T4 、T8) ,并对乳腺癌患者术前术后T细胞亚群作一比较。 [结果 ]患者术前与正常人相比T3、T4 、T8以及T4 /T8均有显著差别 (P <0 .0 0 1) ;患者术前术后各T细胞亚群也有显著差别。 [结论

记忆性B细胞多克隆激活模式与激发抗原种属特异性

目的 :观察记忆性B细胞非特异性多克隆激活的规律性。方法 :首先用定量的卵清、牛乳、牡蛎提取液 ,分别简称A、B、C抗原 ,对家兔分别做基础免疫 ,再分别用A、B、C三种抗原对家兔做交叉免疫 ;采用酶联免疫方法定量检测各组交叉免疫前后的基础抗体的变化。结果 :采用与基础免疫不同的抗原交叉免疫家兔的各组 ,其基础抗体均有 10 %～ 2 5 %的提高 ,较对照组有显著差异 (P <0.0 5 ) ,其中A、C抗原对基础抗体C、A的非特异性激发的相对水平均大于 2 0 % ,对基础抗体B的激发相对水平都低于 15 % ,B抗原对基础抗体C、A的非特异性激发的相对水平亦均低于 15 %。结论

小鼠MHC-Ⅱ类分子表达水平检测的RT-PCR方法

目的建立小鼠MHC-Ⅱ类分子表达水平检测的RT-PCR方法。方法采用RT-PCR法检测昆明小鼠H-2IAb基因表达水平,同时运用流式细胞术法对小鼠淋巴细胞表面H-2IAb的表达进行定量检测;比较两种检测方法间的相关性。结果RT-PCR电泳结果显示所有小鼠均检测出H-2 IAb基因;流式细胞仪检测结果显示所有小鼠淋巴细胞表面均有H-2IAb的表达,同时与RT-PCR检测结果相关。结论RT-PCR法对小鼠MHC-II类分子的表达水平进行检测条件可行,方法成立。

HLA-DRB1和HLA—DQB1基因与肿瘤的关联性研究

目的通过对42例肿瘤患者HLA-DRBl和HLA—DQB1座位的18个等位基因位点的检测，探讨HLA—DRB1和HLA—DQB1基因多态性与肿瘤的关联性。方法采用PCR—SSP技术，检测42例肿瘤患者的HLA—DRB1l和HLA—DQB1基因位点18个，并以100例健康人作为对照。结果肿瘤HLA—DQB1＊03型频率的65．5％，高于对照组的42．0％，RR=2．62，P〈0．0001；肿瘤组HLA—DQB1％06型频率为10．7％，明显低于对照组的24．0％，RR=0．38，P=0．010。结论HLA-DQB1＊03可能是肿瘤的易感基因，HLA-DQB1＊06可能是肿瘤的抗性基因。