体内直接人胰岛素原基因转移对糖尿病小鼠治疗作用的研究

目的 研究人胰岛素原基因表达质粒直接转移至糖尿病小鼠体内后对其血糖和血浆胰岛素水平的影响。 方法 将人胰岛素原基因和大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 (PEPCK)启动子的重组质粒 p N - PEPCK- INS经脂质体介导 ,直接转入糖尿病小鼠体内 ,监测空腹血糖并测定血浆胰岛素水平 ,PCR法鉴定基因转入。 结果 人胰岛素原基因转移组小鼠血浆胰岛素为 (49.2 9± 14 .5 6 )ml U / L ,显著高于生理盐水对照组 (37.5 6± 8.4 ) m l U / L (P<0 .0 5 )和质粒 PL NC对照组 (33.5 4±13.35 ) ml U / L (P<0 .0 5 ) ,生理盐水组与质粒 PL NCX组差别无显著性 (P>0 .0 5 ) ,人胰岛素原基因转移组空腹血糖显著低于基因转入前 (P<0 .0 5 )。生理盐水组和质粒 PL NCX组空腹血糖基因转入前后差异无显著性。

甲状腺转录因子-1在喉癌及喉良性病变中的表达

目的研究甲状腺转录因子-1(TTF-1)在喉癌及喉良性病变中的表达,探讨TTF-1在喉癌发生发展中的意义。方法采用EnV ison方法检测喉癌及其癌旁组织各39例、声带小结13例及声带息肉17例中TTF-1的表达情况。结果喉癌组TTF-1表达强阳性率(48.7%)与喉癌癌旁组织组(12.8%)和对照组(0)比较差异均有统计学意义(P<0.01);喉癌T1N0M0-T1N1M0组TTF-1强阳性率(32.9%)与T2N1M0、T3N2M0组(55.6%、100%)比较差异均有统计学意义(P<0.05);T2N1M0组TTF-1强阳性率(55.6%)与T3N2M0组(100%)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论TTF-1在喉癌中有表达,提示TTF-1可能参与了喉癌的发生和发展。

荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。

人胰岛素原基因在体外培养的NIH3T3细胞中的基因转移和表达的研究

目的 研究人胰岛素原基因在体外培养的小鼠成纤维细胞NIH 3T3细胞系的基因转移和表达情况 ,进而为 1型糖尿病的基因治疗提供实验依据。方法 采用脂质体转染法分别将未携带外源基因的反转录病毒载体 pLNCX和携带大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 (PEPCK)启动子 人胰岛素原基因 (INS)的重组反转录病毒载体pN PEPCK INS转染到体外培养的NIH 3T3细胞系中。转染后 72小时 ,用G418筛选出阳性细胞克隆并培养至 2 4天 ,提取细胞的染色体DNA ,行PCR扩增 ,电泳检查转入基因情况。同时用放射免疫分析方法监测培养液的胰岛素水平及转染后 2 4天的细胞内胰岛素水平。结果 PCR证实pLNCX和 pN PEPCK INS均整合到NIH 3T3细胞的染色体中。培养液的胰岛素水平在转染前后均无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而转入 pN PEPCK INS的NIH 3T3细胞内的胰岛素水平则于转染后 2 4天明显高于未转染组 (P <0 .0 1)及pLNCX转染组 (P <0 .0 5 )。结论人胰岛素原基因在NIH 3T3细胞系的转移成功和在细胞内的高效表达说明基因治疗有望成为 1型糖尿病的有效治疗途径之一。