c-fos及基质金属蛋白酶13在人口腔鳞状细胞癌发生中的表达及病理意义

目的:检测c-fos和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)在OSCC、癌旁组织和正常口腔上皮中的表达,探讨其与OSCC发生发展的关系。方法:免疫组化法检测和统计学分析。结果:c-fos表达在胞核内,MMP13表达在胞浆中,二者在OSCC中的阳性表达分别为67.3%及63.3%。c-fos和MMP13在有、无颈淋巴结转移组的阳性表达率分别为65.2%、69.2%(P(0.05)和78.3%、50%(P(0.05)。结论:c-fos表达与OS-CC病理分级相关,但与颈淋巴结转移无关。MMP13表达与OSCC病理分级和颈淋巴结转移均相关。

Y27632条件培养基体外扩增口腔黏膜上皮细胞

目的:通过优化条件培养基用于非牙源性上皮细胞的体外扩增,为进一步开展组织工程牙提供上皮种子细胞来源奠定基础。方法:获取出生后1 d C57BL鼠原代口腔黏膜上皮细胞,接种于含有Y27632的上皮条件培养基的培养瓶内。细胞长满后,消化传代,采用条件培养基与3T3饲养层细胞共培养进行扩增并连续传代,观察细胞生长情况及连续传代后的生物学特性,免疫组织化学进行干细胞鉴定。结果:与传统上皮细胞培养方式相比,含Y27632的条件性培养基加3T3饲养层方式培养的上皮细胞生长迅速,细胞呈立方形或多角形,呈铺路石样排列。免疫组织化学染色表明这些干细胞表达CK14,SOX2和LGR5。连续传代至第7代后,细胞形态、生长曲线和干细胞标志没有明显变化。结论:含有Y27632的条件培养基可有效用于体外大量扩增非牙源性上皮细胞,并能保持干细胞生长特性,有望用于组织工程牙的种子细胞来源。

耳后动脉的解剖学观测

目的 :观测耳后动脉的起始、管径、行程、分支和分布。方法 :利用动脉内注入红色乳胶的 2 0侧成人头颈标本 ,解剖出耳后动脉进行观测。结果 :耳后动脉在茎突舌骨肌上方起于颈外动脉 18侧 (90 % ) ,在二腹肌后腹深面起于枕动脉 2侧 (10 % ) ,耳后动脉的主要分支有茎乳动脉 ,乳突支 ,耳支等 ;当耳后动脉起于枕动脉时 ,茎乳动脉由枕动脉发出。结论 :耳后动脉是供应面神经 (茎乳段 )和耳后皮肤的主要动脉。

腭发育不同时期维甲酸对腭突细胞增殖和凋亡的影响

目的研究维甲酸对小鼠腭突融合期细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法在SPF级C57BL/6J近交系母鼠妊娠10d和12d给予维甲酸(RA)建立小鼠腭裂模型,利用BrdU免疫组化方法和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测胚胎15d(即腭突融合期)小鼠腭突中细胞增殖及细胞凋亡的表达和分布。结果10d给药组腭胚间充质细胞及腭中嵴上皮细胞中BrdU阳性细胞率和TUNEL阳性细胞率均低于对照组,12d给药组和对照组BrdU阳性细胞率和TUNEL阳性细胞差异无统计学意义。结论维甲酸作用于腭发育的不同时期对腭突细胞增殖及凋亡水平有不同的影响,作用于腭突发生前期可引起腭间充质细胞增殖抑制、凋亡过度而发生腭裂,作用于腭突快速生长期可能影响腭中嵴上皮细胞的上皮间充质转化和迁移等其他转归形式。

大鼠三叉神经痛模型中痛阈及胶质细胞源性神经营养因子的变化

目的研究SD大鼠三叉神经痛模型对机械刺激的痛阈和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的变化。方法建立大鼠三叉神经痛样动物模型,选取SD大鼠36只,随机分为手术组、假手术组和空白对照组。手术组经口内切口行右侧三叉神经的眶下神经结扎术,假手术组只分离暴露右侧眶下神经不予以结扎,空白对照组未接受手术干预。记录大鼠术前及术后的痛阈,并在不同时间点解剖三叉神经节,通过免疫组织化学方法观察GDNF的变化。结果手术组于术后2周出现痛觉超敏反应,一直持续到术后6周才逐渐恢复,术后10～12周才恢复到术前水平。手术组大鼠术后三叉神经节中GDNF的表达量增高,且表达量随着时间的推移而改变。结论大鼠眶下神经的慢性压迫性损伤（CCI-ION）可建立三叉神经痛样的动物模型。GDNF可能通过促进神经纤维的修复再生方式参与调控三叉神经痛。

利用大型动物模型研究牙发育及再生的优劣势

哺乳动物牙发育研究已经取得了很大的进展,相关的调控机制研究正逐渐深入[1,2]。当前,有关牙发育调控的信息,主要是基于啮齿类动物中的小鼠模型,小鼠模型因易于建立基因敲除模型来研究其分子调控机理,又方便管理,经济实用等优点被广泛采用[3,4]。但小鼠模型的牙齿数量、类型、种类与人差别明显,更重要的是小鼠模型前牙终生不断生长,且无乳恒牙列的替换[5-7],

面神经颅内部的动脉供应

目的 :研究面神经颅内部的动脉供应。方法 :采用大体解剖法显露并观测了 49侧面神经颅内部的动脉来源。结果 :面神经小脑脑桥角段、内耳道段主要由小脑下前动脉发出的迷路动脉供应 ;面神经迷路段由脑膜中动脉发出的岩浅支供应 ;面神经鼓室段、锥曲段、乳突段由耳后动脉发出的茎乳动脉供应。结论

头颈部癌肿瘤干细胞候选标志物的研究进展

确定特异性的肿瘤干细胞标志物是筛选与鉴定肿瘤干细胞的首要工作。近年来利用肿瘤干细胞标志物已从多种上皮来源实体瘤中筛选出了肿瘤干细胞,但头颈部癌干细胞尚缺乏特异性表面标志物。本文就近年来头颈部癌肿瘤干细胞候选标志物的研究现状作一综述。

MyomiRs在维甲酸诱导舌发育异常中对舌肌分化调控的机制研究

目的:检测维甲酸(Retinoic acid,RA)诱导小鼠胚胎腭裂模型中胎鼠舌体发育过程中肌相关microRNAs(MyomiRs)、成肌调节因子(Myogenic regulatory factors,MRFs)以及Pax基因的表达变化,探究MyomiRs在舌肌分化过程中的调控作用,推测RA致胎鼠腭裂伴发舌异常的可能机制。方法:建立RA诱导小鼠胚胎腭裂模型,分别在E13.5、E14.5、E15.5收集胎鼠舌体组织,用SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测舌体中MRFs和Pax基因的表达;用Taq Man探针实时定量PCR检测舌体中MyomiRs的表达。结果:胎鼠舌体发育过程中,正常组miR-1和miR-206相对表达量均持续上升,RA诱导组二者变化趋势与正常组相似,但相对表达量均低于正常组,miR-1的结果在E14.5和E15.5具有统计学意义(P<0.01),miR-206的结果在E13.5具有统计学意义(P<0.05)。正常组和RA诱导组胎鼠舌体中Myo D和Myf5相对表达量都在E14.5达到峰值,随后下降。RA诱导组Myo D的表达在E14.5显著低于正常组(P<0.05),在E15.5显著高于正常组(P<0.01);RA诱导组Myf5的表达在E15.5显著低于正常组(P<0.05)。正常组和RA诱导组胎鼠舌体中Pax3表达均在E14.5达到峰值,Pax7表达均在E15.5达到峰值。RA诱导组Pax3的表达在E14.5显著高于正常组(P<0.05);Pax7的表达则在E13.5显著高于正常组(P<0.01)。结论:在舌肌分化过程以及RA诱导腭裂胎鼠的舌发育异常中,miR-1/miR-206与Pax3/Pax7及Myf5/Myo D的表达趋势具有相关性。RA可能通过下调miR-1/miR-206而靶向上调Pax3/Pax7,进而下调Myo D/Myf5表达,从而抑制舌肌分化,导致舌肌发育异常。

小鼠舌肌发育相关基因的功能聚类分析

目的:研究小鼠舌肌发育的分子调控机制。方法:取胚胎第13.25天(E13.25)及E15.5小鼠舌组织。应用Affymetrix Mouse Gene Chip,对胎鼠舌发育过程中的差异基因进行筛选。应用DAVID网络分析工具对基因进行功能和聚类分析。结果:基因功能和聚类分析表明,在E13.25高表达的基因主要与细胞周期相关因子(Exo1、Gsk3B、Kif20b、Skp2)和细胞粘附因子(Neo1、lama1)等相关。在E15.5高表达的基因主要与细胞骨架(titin、Hspb7)相关。结论:小鼠舌组织增殖和特化与细胞周期和细胞粘附基因相关,舌组织分化和成熟主要与细胞骨架相关。

维甲酸诱导腭裂相关wnt和成纤维细胞生长因子配体表达的动态变化

目的筛选与维甲酸诱导腭裂相关的wnt和成纤维细胞生长因子(FGF)信号分子,观察其在正常腭突发育和维甲酸诱导腭裂形成不同阶段的表达动态变化。方法建立维甲酸诱导腭裂小鼠模型,制作基因芯片并筛选wnt和FGF信号通路相关基因。根据芯片结果选出wnt经典通路配体wnt3和wnt8a、FGF通路配体fgf9和fgf10,并应用半定量逆转录-PCR(RT-PCR)技术检测其在胚胎天数(ED)13.5～15.5中表达变化。结果 1)ED14.5实验组腭突组织芯片分析结果显示:wnt3和fgf10表达水平上调,wnt8a和fgf9表达水平下降。2)在ED13.5～15.5正常对照组腭突发育的不同阶段,上述基因呈现持续性高表达,表达水平呈动态变化。3)在ED13.5～15.5的实验组腭裂发生的不同阶段,上述基因的表达水平与正常对照组均有差异(P<0.05)。结论 wnt和FGF信号分子通路参与小鼠胚胎继发腭的正常发育过程,在维甲酸诱导的腭裂发生过程中,存在维甲酸通路与wnt和FGF通路的相互作用。

Wnt家族基因敲除小鼠胚胎发育异常的研究现状

Wnt信号分子家族调控着多个组织脏器的胚胎发育。本文对目前已建立的Wnt经典传导通路的代表基因Wnt1以及Wnt非经典通路的代表基因Wnt5a等Wnt家族基因敲除小鼠模型的胚胎发育异常进行综述。

味觉出汗综合征

味觉出汗综合征是在腮腺或颌下腺手术或损伤数月之后,患者耳前下区皮肤在进餐时出现血管扩张、潮红、出汗现象。其机理是腮腺手术损伤了交感神经和副交感神经的节后纤维,副交感神经的节后纤维错位再生并长入汗腺和皮肤血管壁;在进餐时,副交感神经兴奋,释放乙酰胆碱,促发了汗腺的病理性分泌和皮肤血管的扩张、潮红。味觉出汗综合征的治疗方法主要有局部应用抗胆碱能药物,手术切断相关的副交感神经和用肉毒杆菌毒素A浸润注射味觉出汗区。

原发性三叉神经痛发病机制的研究进展

原发性三叉神经痛（TN）是指有临床症状但无与发病有关的器质性或功能性病变。其疼痛特点是难以忍受的阵发性剧痛且随病程的延长而加重，疼痛次数增加，疼痛程度加重，严重影响患者的生活，可导致焦虑、抑郁甚至自杀。

面神经根与邻近血管的关系

目的 观测面神经根与邻近血管的关系。方法 解剖和观测 4 9侧面神经根与邻近血管间的关系。结果 面神经根受邻近血管压迫的占 2 4 5 % (12 / 4 9) ,与邻近血管发生接触的占 14 3%(7/ 4 9)。压迫和接触面神经根的主要血管为小脑下前动脉 (AICA) ,其次是小脑下后动脉 (PICA) ,移位的椎动脉 (VA)和小脑下前静脉。

经典三叉神经痛的治疗新进展

各种病因导致的三叉神经痛严重影响患者的生命健康,因对其发病机制不甚清楚,所以目前尚缺乏有效的治疗方法。临床中主要的治疗方法有药物治疗、手术治疗、放射治疗、中医治疗、基因治疗和其他疗法等,每种方法各有利弊,其中基因治疗是研究的热门方向。本文对各种方法治疗三叉神经痛的进展作一综述。

颌面部发育畸形与维甲酸及信号分子通路

以唇腭裂为代表的颌面部发育畸形是由多重环境因素与多个基因交互作用所引起的,其中腭裂的发生既可以来自腭突自身的缺陷,又可以继发于颌面部其他组织的缺陷,比如与腭的组织结构、生理功能及生长发育密切相关的舌的发育异常。维甲酸(retinoic acid,RA)作为治疗肿瘤的常见药物,已被公认为颌面部发育的较常见致畸因子,并与WNT、TGF、FGF及SHH等信号分子通路相互作用共同参与颌面部发育的调控。

维甲酸诱导腭裂小鼠舌发育异常研究

目的通过检测生肌决定因子基因家族成员Myf5和MyoD在维甲酸诱导腭裂小鼠舌肌发育中的表达,探究维甲酸是否在舌肌发育早期影响其肌向分化。方法建立维甲酸诱导腭裂小鼠模型,利用免疫组化染色法和实时定量PCR法,检测胚胎13天即舌肌发育早期实验组和对照组小鼠舌肌中Myf5和MyoD的分布和表达水平。结果免疫组化结果显示Myf5和MyoD在舌肌细胞的细胞核中表达,实验组Myf5和MyoD的蛋白表达均低于对照组,且差异有显著性意义(P<0.01)。实时定量PCR结果显示实验组Myf5和MyoD的mRNA表达水平均低于对照组,且差异有显著性意义(P<0.01)。结论 Myf5和MyoD的异常低表达提示了维甲酸可能直接导致舌肌发育和分化的延迟,进而导致腭裂的发生或使其表型加重。