几种性传播微生物与人工流产术后不孕关系的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、单克隆抗体免疫荧光法和特异性培养等方法对３０例人工流产术后不孕妇女和３９例正常妇女进行了五种性传播微生物包括ＨＳＶ－２、ＨＰＶ、ＣＴ、ＵＵ、ＮＧ进行了检测。研究表明：五种ＳＴＭ在人工流产术后不孕妇女生殖道中的混合感染、不论隐性或显性感染，不论是五种ＳＴＭ中任何两种或两种以上的感染，都可能在人流术后不孕中起着重要作用。尤其是性传播病毒ＨＳＶ－２和ＨＰＶ在其中的作用机理值得进一步探讨。

哺乳仔猪断奶前后肠道微生物培养组学研究

近年来国内外研究人员通过下一代测序和分离培养技术,结合宏基因组学相关的生物信息学手段证实了猪肠道微生物的组成及其代谢物活性对宿主的健康具有重要作用。受限于传统培养方法,猪肠道中大多数细菌仍无法培养,因此,为了突破研究人员研究宿主-菌株相互关系及益生菌株开发应用的限制,本研究对仔猪断奶前后回肠和结肠内容物微生物进行高通量培养组学研究。结合需氧和厌氧条件、不同培养时间以及25种不同培养基,共筛选获得1385株厌氧、好氧和兼性厌氧菌株,并全部进行了16S rRNA全长测序鉴定和菌株保存,共计获得5个门、29个属和86个种菌,其中包含梭杆菌、拟杆菌等在以前的研究中较难分离获得的菌株,以及一些如乳酸菌等具有潜在应用价值的益生菌,更为重要的是其中包含116株疑似新菌种。本研究获得的菌株信息可以进一步完善猪肠道微生物物种数据库,为后续宿主-菌株相互关系研究垫定了基础,对猪饲用益生菌相关产品开发研究具有重要意义。

香菇C_(91-3)转录本Unigene14872基因Pkinase结构域的克隆表达及其生物信息学分析

旨在克隆香菇C91-3转录本Unigene 14872基因中的Pkinase结构域,并对其进行生物信息学分析。提取香菇C91-3菌丝体中总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得Unigene 14872基因全长。用NCBI对其进行生物信息学分析,预测其具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Pkinase)结构域。设计引物PCR扩增Pkinase结构域,然后克隆至pET32a(+)载体,再热转化至JM109中保存并进行质粒测序。重组质粒pET32a(+)-Pkinase构建成功,并成功诱导表达重组蛋白,初步鉴定该蛋白具有抗肿瘤活性,为进一步研究重组蛋白的活性及作用机制奠定基础。

香菇C_(91-3)转录本Unigene 24277基因克隆表达及其生物学活性的研究

通过对香菇C91-3转录本Unigene 24277基因的生物信息学分析,克隆表达含RCC1结构域的Unigene24277基因,并研究其抗肿瘤活性。从香菇C91-3菌丝体中提取总RNA,反转录合成c DNA,并利用Rapid Amplification of c DNA Ends(RACE)技术获得基因全长。NCBI数据库分析提示其含有RCC1结构域。PCR扩增RCC1结构域,将其克隆产物与p ET-32a(+)载体连接,热转化至E.coil Rosetta-gami(DE3)中诱导表达,纯化、复性后,通过MTT法研究其抗肿瘤活性。结果显示原核表达载体构建成功,重组蛋白成功诱导表达,并初步证明了重组蛋白具有抑制肿瘤细胞增殖活性的功能,为后续抗肿瘤机制的探究奠定了基础。

综合设计性实验在医学微生物实验教学中的应用

在医学微生物实验教学中选择合适的时机、安排合理的实验内容来开展综合设计性实验有效的调动了学生的学习积极性、培养了学生的临床思维能力,为培养新型医学人才奠定了基础。

寻常性痤疮患者粉刺与脓疱皮损中细菌的分离研究

共采集４２例寻常性痤疮患者标本１２８份，其中粉刺７２份，脓液５６份，进行需氧和厌氧培养。结果发现从痤疮皮损中分离出的细菌，最多的是需氧的革兰阳性球菌和厌氧的革兰阳性杆菌，其它种类仅为少数。从粉刺和脓液中培养出的细菌种类差异不明显，而细菌的阳性率有一定差异，其结果对我们探讨寻常性痤疮的发病机理及研究治疗方法有一定意义。

香菇C_(91-3)菌发酵液的抑菌作用的初不探讨

香茹 C91 - 3 菌是课题组经过多年筛选出的一株经生物发酵后 ,其发酵液具有明显的抗菌作用的真菌。研究结果表明该菌发酵液与青霉素、链霉素对比试验证明 ,该菌发酵液具有明显的抑制革兰阴性菌的作用 ,对大肠埃希菌、伤寒沙门菌。

基于灰度共生矩阵的大鼠肝细胞癌、肝硬化结节超顺磁性氧化铁MR增强图像纹理特征分析

目的基于灰度共生矩阵分析大鼠肝细胞癌(HCC)结节及肝硬化超顺磁性氧化铁(SPIO)增强图像纹理特征。方法建立大鼠HCC及肝硬化模型,获取大鼠HCC、肝硬化结节SPIO增强图像,手动选取161个(HCC结节81个,肝硬化80个)感兴趣区(ROI),通过生成灰度共生矩阵,提取两组图像的二阶矩、对比度、相关、逆差矩、熵、方差6种纹理特征参数,并进行统计学分析。结果大鼠HCC结节呈相对均匀的高信号,较大HCC灶(>2 cm)呈高、低混杂信号,肝硬化结节在SPIO增强图像呈低信号。HCC组的相关及熵均值高于肝硬化组(P<0.05),二阶矩、对比度、逆差矩及方差的均值低于肝硬化组(P<0.05)。结论通过灰度共生矩阵提取的二阶矩、对比度、相关、逆差矩、熵、方差6种纹理特征参数,可进一步用于基于纹理特征的大鼠HCC、肝硬化结节SPIO增强图像的计算机辅助诊断。

成人正畸患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌的变化

目的研究成人正畸患者在固定矫治器戴入后,其牙周临床指标和龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的早期变化。方法选择成人正畸患者11例,分别在矫治器戴入前,戴入后第1、3个月检查牙周临床指标(包括菌斑指数、龈沟出血指数、探诊深度和附着丧失),同时采集龈下菌斑样本,利用荧光实时定量聚合酶链反应检测样本中P.gingivalis和总细菌的数量,计算出P.gingivalis的检出率和构成比。分析牙周临床指标和P.gingivalis的检出率、构成比在不同观察时点的变化情况。结果菌斑指数、龈沟出血指数在矫治器戴入后均比戴入前明显升高(P<0.05)。探诊深度在矫治器戴入1个月后升高(P<0.05),3个月后下降至基线水平。试验中未发现有探诊深度大于2mm的患者,也未发现有附着丧失的患者。在3次检测中,P.gingivalis检出率均为45.5%,而P.gingivalis构成比的变化也无统计学差异(P>0.05)。结论固定矫治器戴入早期可引发成人正畸患者口内局部菌斑堆积,菌群中P.gingivalis增殖,出现轻度牙龈炎。

参杞合剂对荷瘤小鼠免疫功能及细胞周期的影响

目的 :研究参杞合剂 (SQ)对小鼠腹水型肝癌细胞免疫功能及细胞周期的影响。方法 :用参杞合剂对荷瘤鼠进行连续胃饲治疗 10天 ,观察其抑瘤率及免疫学指标的改变。流式细胞仪结合电镜观察其细胞周期的改变。结果 :荷瘤小鼠抑瘤率为 6 5 6 8% ,SQ能增强荷瘤小鼠的免疫功能 (P <0 0 5 ) ;流式细胞仪检测肿瘤细胞形成S期阻滞。病理可见大片坏死 ,电镜可见坏死及凋亡。结论 :参杞合剂可显著抑制肿瘤生长 ,其机理与提高机体免疫功能 ,阻滞肿瘤细胞增殖有关。

香菇C_(91-3)菌丝发酵液蛋白抑制小鼠宫颈癌细胞株U14生长及诱导凋亡的实验研究

目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白LFP91-3对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用。方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法LFP91-3浓度5、10、15μgml和流式细胞仪对经LFP91-3作用的U14进行观察和检测。结果LFP91-3能明显延长U14所致荷瘤小鼠的生存期。对体外培养的U14有直接杀伤作用,抑制率随LFP91-3浓度的增加和作用时间的延长而升高。流式细胞仪检测结果显示LFP91-3阻滞U14于细胞周期的分裂中期。结论LFP91-3能抑制小鼠宫颈癌细胞株的生长并诱导其凋亡。

溃疡膏外敷治疗皮肤溃疡的细菌学研究及临床

目的 为了深入探讨溃疡膏治疗皮肤溃疡的机理。方法 对 110例臁疮创面感染的细菌进行分离鉴定 ,选出出现频率较高的五种细菌 ,进行抑菌试验 ,并与临床疗效平行观察。结果 溃疡膏对常见皮肤感染性细菌具有较好的抑菌作用 ,除对大肠埃希菌无抑制作用外 ,对表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、铜绿假单胞菌具高度敏感性 (抑菌圈直径ф≥ 2 5 mm ) ,对金黄色葡萄球菌为中度敏感 ( 2 0 m m≤抑菌圈ф≥ 2 5 mm ) ,且与临床疗效基本相符。结论 :溃疡膏对创面感染菌具有较强的抑菌作用 。

妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型和人乳头瘤病毒的感染及其相关关系的研究

为探讨妇女生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｓＶｉｒｕｓ２，ＨＳＶ２）和人乳头瘤病毒（ＨｕｍａｎＰａｐｉｌａｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）的感染及其相关关系，我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４８例患有性病、生殖道感染的妇女和３９例正常妇女进行了下生道ＨＳＶ２、ＨＰＶ的检测。ＨＳＶ２在实验组和对照组妇女中的感染率分别是７２９％和２５６％，两组有极显著性差异（Ｐ＜００１）；ＨＰＶ在实验组和对照组妇女中的感染率分别是５３３％和３３３％，两组无显著性差异（Ｐ＞００５）；两组中ＨＳＶ２、ＨＰＶ双阳性率分别是４５８％（２２／４８）和２３１％（９／３９），有显著性差异（Ｐ＜００５）；在两组共８７份标本中，ＨＳＶ２和ＨＰＶ双阳性者占３１例，阳性率是３５６％。统计学分析表明：ＨＳＶ２和ＨＰＶ感染之间有极显著的相关性（Ｘ２＝２４０８，Ｐ＜００１）。研究表明：患有生殖系感染和性病妇女其ＨＳＶ２或ＨＰＶ和ＨＳＶ２混和感染的机率显著高于正常妇女，ＨＳＶ２和ＨＰＶ的感染具有协同作用。由于这两种病毒均与宫颈癌的发生有关，它们在生殖道中感染的相互作用机理有待于进一步研究。

参杞合剂对人鼻咽癌细胞CNE细胞周期及凋亡的影响

目的研究参杞合剂(SQ)在体外对CNE细胞周期及凋亡的影响。方法应用MTT法观察参杞合剂对细胞的抑制作用,流式细胞术观察不同浓度参杞合剂作用不同时间后CNE细胞周期的改变,电镜结合DNA电泳分析参杞合剂诱导凋亡的作用。结果SQ对CNE细胞生长有明显抑制作用,且其作用强度呈现出对浓度和时间的依赖性。CNE细胞在SQ作用下随着时间的延长和浓度的增加,G0/G1期比率下降,S期比率升高,出现S期阻滞。0.0625 g.生药/ml的SQ作用48 h后诱导出凋亡,凋亡率随着浓度的增加、时间的延长而增加,电镜下可见典型凋亡小体。琼脂糖凝胶电泳呈现出凋亡特征性的DNA条带。结论参杞合剂可直接杀伤肿瘤细胞,其机制可能通过阻滞细胞周期S期,诱导肿瘤细胞凋亡实现的。

宫颈癌HPV-16感染对P53蛋白表达的影响

目的 探讨宫颈癌HPV 16感染对P5 3蛋白表达的影响。方法 采用免疫组化SP法分别检测 75例宫颈癌和 81例宫颈炎组织的HPV 16蛋白和P5 3蛋白表达情况。结果 HPV 16蛋白在宫颈癌组织的表达率(73 3% ,5 5 / 75 )与宫颈炎组织 (81 5 % ,6 6 / 81)差异无显著性 ;P5 3蛋白在宫颈癌组织的表达率 (4 6 7% ,33/ 75 )高于宫颈炎组织 (2 9 6 % ,2 4 / 81) (P <0 0 5 )。宫颈癌组织HPV 16阳性组的P5 3蛋白阳性率 (4 9 1% ,2 7/ 5 5 )高于HPV 16阴性组 (4 0 0 % ,8/ 2 0 ) (P <0 0 5 ) ;宫颈炎组织HPV 16阳性组的P5 3蛋白阳性率 (36 4 % ,2 4 / 6 6 )高于HPV 16阴性组 (0 % ,0 / 15 ) (P <0 0 5 )。宫颈癌和宫颈炎组织HPV 16蛋白与P5 3蛋白表达呈正相关 (P <0 0 5 )。结论 HPV 16感染在宫颈癌和宫颈炎组织普遍存在 ,突变型P5 3蛋白的表达上调可作为宫颈癌发生的预警信号 ,HPV 16可能通过导致 p5 3基因突变促使宫颈癌发生。

红藻氨酸癫痫大鼠海马GFAP基因调控蛋白表达的变化

目的和方法 :用Southwestern印迹从红藻氨酸 (KA)癫痫大鼠海马结构中筛选调控胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)基因表达的DNA结合蛋白 ;并观察其在海马内表达变化的规律 ,旨在从基因调控水平深入探讨癫痫反复发作形成的神经病理学机制。结果 :Southwestern印迹的实验显示海马结构内有两种调控GFAP基因表达的序列特异的DNA结合蛋白 ,分子量分别为 39kDa和 35 .5kDa ;KA后 1d ,两种调控蛋白的表达即开始增加 ,5～ 7d时表达显著增加 ,3周时表达最多 ,3个月时表达仍很高。结论 :KA通过上调调控GFAP基因表达的转录因子 ,使海马GFAP过量表达 。

亚低温治疗对急性呼吸窘迫综合征犬肺功能的影响

目的探讨亚低温治疗对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)犬呼吸功能的影响。方法 25只健康杂种犬随机分为常温感染组(12只)和亚低温感染组(13只)。2组均通过股静脉泵入活大肠埃希菌制成高动力型感染性休克模型。常温感染组在常温下继续观察,亚低温感染组通过血管内降温实施亚低温治疗(33℃±1℃)。2组0、24、48 h通过PICCO采集肺血流动力学参数,呼吸机监测呼吸力学参数。72 h后处死动物,拍摄胸片及留取肺组织病理切片,判断是否发生ARDS。结果观察至72 h时,亚低温感染组及常温感染组分别有4只及7只发生ARDS。2组氧合指数(OI)、氧分压[p(O_2)]及肺静态顺应性(Cst)均随观察时间的延长逐渐降低,血管外肺水指数(EVLWI)、肺血管通透性指数(PVPI)、气道平台压(Pplat)及气道阻力(Raw)则随之逐渐升高(均P<0.05)。亚低温感染组上述指标均明显优于常温感染组。结论亚低温治疗可以改善感染性休克犬的肺功能和肺血流动力学状态,降低ARDS的严重程度。

针阵列对板电晕放电对副流感病毒灭活的研究

副流感病毒(PIV)液膜或气溶胶经过针阵列对板电晕放电处理,对收集处理前后的病毒液进行血凝效 价和血红蛋白值(OD值)分析,确证非热放电对病毒的灭活作用．结果显示,液膜中87．5％以上的病毒经15 min 放电处理即被灭活;气溶胶中50％以上的病毒经一次放电处理后即被灭活．分析认为,非热放电产生的高能电 子、紫外光及自由基对空气中携带的PIV病毒具有高效的灭活作用;针阵列对板电晕放电电场同时有利于高效 捕获空气中的PIV病毒载体,从而在放电场中灭活PIV病毒．

CpG ODN增强rHBsAg疫苗对小鼠免疫应答影响的研究

通过CpG寡核苷酸(CpG ODN)与重组HBsAg蛋白疫苗(rHBsAg)联合免疫C57BL/6BL/6小鼠,观察CpG ODN对小鼠免疫状况的影响。试验分对照、乙肝疫苗以及用乙肝疫苗加CpG三组,MTT法分别进行HBsAg特异性刺激淋巴细胞转化试验、HBsAg特异性刺激细胞毒性T细胞杀伤试验、自然杀伤细胞非特异性杀伤试验,以及ConA刺激淋巴细胞转化试验;ELISA测定HBsAb、INF-γ、IL-12和IL-4结果中,疫苗加CpG组抗原特异性转化试验指数为4.05±0.31;疫苗加CpG组抗原特异性CTL率为82.27±22.64,在统计学上差异显著(P<0.05);而HBsAb、INF-γ、IL-12的结果分别为51.85±14.41、802.25±104.25和373.62±66.58,与对照组及疫苗组比较,差异显著(P<0.05)。CpG ODN能作为一种新的免疫佐剂更好地增强重组乙肝表面抗原蛋白疫苗诱导小鼠产生高效的体液和细胞免疫应答。

转变医学思维模式看朊病毒之谜

朊病毒是一种特殊的传染性病原体,与普遍意义上的病原体不同的是,它不含生命最基本的遗传物质核酸,可引起多种传染性的中枢神经系统退行性病变,如库鲁病、牛海绵状脑病等。必须转变固有的医学思维模式来看待朊病毒之谜,并从哲学角度探讨了朊病毒病的出现。