人体形态学教学中的哲学思维——以组织胚胎学为例

人体形态学是医学课程体系的重要组成部分,教师应该在传授人体形态学基本知识和技能的同时,传授给学生善于运用哲学思想来观察和研究人体的形态结构、组织发育及病变形成,培养学生科学的学习方法和创新思维,逐步养成用哲学思维认识人体世界,分析问题和解决问题。

胚胎学教学改革体会

为了改进胚胎学教学效果 ,我们首先在药学和检验专业的胚胎学教学中进行改革试点 ,把胚胎学的理论课和实验课合二为一 ,在实验室中进行“一体化”教学 ,结果经对比分析 。

应用组织芯片技术检测果糖二磷酸醛缩酶在肝癌与胰腺癌组织中的表达

目的探究果糖二磷酸醛缩酶ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用组织芯片和免疫组织化学方法检测ALDOA在肝癌、胰腺癌及其相应的正常组织中的表达。结果 ALDOA在肝癌组织中的阳性表达率为80%(24/30),在正常肝组织中的阳性表达率为33.3%(2/6),二者之间表达差异具有统计学意义(P<0.05)。ALDOA在胰腺癌组织中的阳性表达率为66.7%(20/30),在正常胰腺组织中的阳性表达率为0%(0/6),二者之间表达差异具有统计学意义(P<0.01)。ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、分化程度无关(P>0.05);胰腺癌组织中的ALDOA高表达与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 ALDOA在肝癌、胰腺癌组织中表达上调。

ER、EGFR、p53在乳腺癌组织中的比较研究

采用免疫组化染色技术，检测７５例原发乳腺癌组织中雌激素受体（ＥＲ），表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及ｐ５３的表达。结果表明：ＥＲ、ＥＧＦＲ、ｐ５３的阳性表达率分别为４９．３％、４１．３％和３７．３％。ＥＲ、ＥＧＦＲ的表达与腋淋巴结转移、临床分期有明显相关性（Ｐ＜０．０５）；与年龄及肿瘤大小无明显相关性（Ｐ＞０．０５）。ＥＧＦＲ与ＥＲ有负相关性（Ｐ＜０．０５）。在有４个以上腋淋巴结转移的２１例病例中，ＥＧＦＲ阳性者１４例，占６６．７％。２０例临床Ⅲ期的病例，ＥＧＦＲ阳性者１５例，占７５．０％。ｐ５３的表达与腋淋巴结转移、临床分期、年龄及肿瘤大小均无明显相关性（Ｐ＞０．０５）；与ＥＲ呈负相关性（Ｐ＜０．０５）；与ＥＧＦＲ呈正相关性（Ｐ＜０．０５）。研究认为ＥＧＦＲ蛋白表达阳性的乳腺癌病人预后不良，ｐ５３蛋白表达阳性与乳腺癌病人的预后无明显相关性。

提高组织学实验课教学质量的几点体会

组织学是一门重要的形态学基础课，是医学生最早接触的医学入门课程之一，它是研究正常人体的微细结构及其相关机能的科学，其内容抽象、枯燥，因而通过组织学实验课给学生以直观的感性认识是非常重要的，是理论课必要的辅佐和补充，是强化理论知识和增强形态概念的重要手段。本文就如何提高组织学实验课教学质量的几点体会与同行们交流。

医学留学生《胚胎学》全英语教学探索与实践

胚胎学属于形态学和发育生物学的范畴,针对医学留学生学习人体胚胎学的自身特点,采用小班授课,以多媒体结合传统教学方法为主,同时结合PBL、TBL及自主学习等多种教学模式,让留学生更好的理解正常的发育过程与异常的临床畸形及疾病的相关性,尽量体现"理论联系实际"的教学理念,取得了很好的教学效果,大大的提高了医学留学生胚胎学的教学质量。

人胚胎肌硬膜桥发育解剖学研究

肌硬膜桥(MDB)是存在于枕下区头后小直肌、头后大直肌、头下斜肌及项韧带与硬脊膜之间的致密结缔组织桥。众多研究提示MDB可能存在重要的生理作用。然而,目前关于人MDB的发育学研究还很少有报道。本研究采用石蜡切片、Masson和天狼星红染色等方法,对12~40周的人胚胎(E)进行组织学观察,以明确MDB及其相关结构的发育特点。观察人胚胎枕下区矢状切面,结果可见:①硬脊膜:从E12周开始就是多层结构,硬脊膜与寰枕和寰枢后膜紧贴附;随着发育,硬脊膜逐渐增厚;②枕下肌:寰枢间隙的肌细胞从E12周就已经很明显;而寰枕间隙的肌细胞发育明显晚于寰枢间隙,约从E13周开始才明显增多;约至20周,肌细胞形态接近成熟肌细胞;③寰枕后膜与寰枢后膜:在E12~E13周时寰枕后膜与寰枢后膜完全封闭寰枕间隙及寰枢间隙;E15周起,寰枕后膜的下方出现一个间隙,可以观察到有许多MDB纤维样结构从这个间隙通过,并融入硬脊膜;E15周MDB纤维也开始穿过寰椎后弓与头下斜肌之间的间隙,向前下走行穿过寰枢间隙进入椎管并融入硬脊膜;大约从E22周开始,穿过寰枢间隙的MDB纤维呈放射状附着在硬脊膜上;④MDB纤维成分:天狼星红染色、偏振光显微镜下,在E15周,可见微弱的Ⅰ型胶原纤维的红色双折光,在E21周强度明显增加,在之后的生长发育过程中,MDB纤维逐渐增强。

β-榄香烯乳剂逆转多药耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素耐药性研究

目的 :测定中药 β-榄香烯乳剂对 MCF- 7/ ADM细胞的无毒剂量 ,并检测此无毒剂量是否有逆转 MCF- 7/ ADM细胞对化疗药物阿霉素 (ADM)的多药耐药 (multidrug resistance,MDR)性。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定药物的细胞毒性及耐药细胞逆转倍数 ;荧光分光光度法测定细胞内药物浓度。结果 :无毒剂量的 β-榄香烯乳剂 (6 μg/ m l)能显著降低化疗药物 ADM对乳腺癌耐药细胞株 MCF- 7/ ADM细胞的 IC50 ,明显增加耐药细胞内药物浓度。结论 :初步研究表明β-榄香烯乳剂具有逆转 MCF- 7/ ADM细胞 MDR的作用。

川芎嗪对转基因多药耐药细胞K562/MDR耐药性的逆转作用

目的：研究川芎嗪（TMP）与环孢菌素A（CsA）单独及联合逆转人红白血病多药耐药细胞K562/MDR的多药耐药性（MDR）,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法：分别以倍比稀释后不同浓度的TMP（506 400 mg·L^-1）和CsA（0.5256 mg·L^-1）作用于体外培养的K562/MDR细胞72 h,采用MTT法检测细胞生长率,确定TMP和CsA的非细胞毒性剂量;采用非细胞毒性剂量,实验分为5组：G1组（TMP＋ADM＋K562/MDR）、G2组（CsA＋ADM＋K562/MDR）、G3组（TMP＋CsA＋ADM＋K562/MDR）、阴性对照组（以K562/S代替K562/MDR）、空白对照组（以1640培养基代替药物）,检测各组细胞生长抑制50%的ADM浓度,即IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;利用荧光分光光度法检测各组细胞内ADM浓度;流式细胞术检测跨膜糖蛋白P-gp的表达情况。结果：TMP及CsA的非细胞毒性剂量分别为320和2.0 mg·L^-1,K562/MDR细胞的耐药倍数为19.2倍;TMP及CsA均能降低K562/MDR细胞的耐药性,逆转倍数分别为5.2及9.6倍,并且两者联合应用,逆转倍数为15.6倍;TMP和CsA单独及联合应用均能明显增加K562/MDR细胞内ADM浓度;TMP及CsA单独应用均能降低K562/MDR细胞P-gp的表达,并且两者联合应用使K562/MDR细胞P-gp的表达率明显降低,与阴性对照组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论：TMP和CsA单独及联合应用可逆转K562/MDR细胞对化疗药物ADM的MDR,且两者具有协同作用。其逆转机制可能为降低P-gp水平,升高细胞内ADM浓度,增强对ADM的敏感性,从而发挥治疗肿瘤的作用。

蝎毒对人白血病细胞株的抑制作用

目的 :采用 3种人白血病细胞株 (人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL - 6 0、人红白血病细胞株K5 6 2 )作为实验模型 ,观察东亚钳蝎毒对人白血病细胞的生长抑制作用。方法 :台盼蓝排染法细胞计数观察细胞生长、MTT法检测蝎毒对细胞的毒性、流式细胞术分析凋亡细胞。结果 :蝎毒对Raji、HL - 6 0、K5 6 2 3种人白血病细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,并且其作用强度在一定范围内呈现浓度和时间依赖性。结论

川芎嗪逆转肿瘤多药耐药性及其机制的研究

目的:探讨川芎嗪(tetrameth-ylpyrazine,TMP)逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对多柔比星(adriamycin,ADM)的耐药及其P-糖蛋白(P-glycopro-tein,P-gp)表达的影响。方法:MTT法测定细胞的药敏性,荧光分光光度法检测细胞内多柔比星浓度的变化,流式细胞术检测耐药细胞凋亡率的变化,流式细胞术观测细胞P-gp的表达。结果:非细胞毒性剂量(320mg/L)川芎嗪能显著降低MCF-7/ADM的IC50(P=0·0031),逆转倍数为2·13倍;且能明显增加耐药细胞ADM的浓度(P=0·0042)和凋亡率(P=0·0026);320mg/L川芎嗪使耐药细胞的P-gp表达率由(90·6±0·41)%降低至(69·1±1·65)%。结论:川芎嗪具有部分逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对多柔比星的耐药性,其逆转机制可能与抑制该细胞P-gp的表达有关。

丹皮酚对MDR逆转作用的研究

具有钙拮抗作用的中药制剂丹皮酚在非细胞毒性剂量下能降低化疗药物阿霉素 (ADM)、柔红霉素 (DAU )、长春新碱 (VCR)及长春花碱 (VL B)对多耐药 (m ulti drug resistance,MDR)肿瘤细胞株 K5 6 2 /ADM细胞的 IC5 0 ,且能提高细胞内化疗药物的浓度 ,但对细胞膜 P-糖蛋白的表达没有影响 ,表明丹皮酚具有逆转人红白血病细胞株 K5 6 2 /ADM细胞

补骨脂素加长波紫外线照射对白血病K562细胞的杀伤作用

目的:探讨补骨脂的提纯物补骨脂素(psoralen)加长波紫外线(ultraviolet-A light)照射光化学疗法,亦称PUVA(psoralen plus ultraviolet-A light)疗法,对慢性粒细胞白血病红白病变细胞株K562细胞的杀伤作用。方法:以传代培养的K562细胞为模型,采用四甲基偶氮唑盐比色法(monotetrazolium test,MTT)测定单纯补骨脂素、单纯紫外线照射及PUVA疗法对白血病细胞的杀伤作用;采用流式细胞仪对其进行DNA含量分析,并用早期凋亡试剂盒Annexin-Ⅴ-FITC和碘化丙啶(propidine iodide,PI)双染法测定单纯补骨脂素对白血病细胞的作用;采用电镜技术对其进行形态学观察。结果:单纯补骨脂素或单纯紫外线照射对K562细胞均有杀伤作用,PUVA比单纯补骨脂素或单纯紫外线照射对K562细胞的杀伤作用有明显增强(P<0.05)。PUVA处理后的白血病细胞通过流式细胞仪可以检测到亚二倍体凋亡峰。电镜下可见:细胞体积变小,胞浆浓缩,胞核染色质聚集或边集,核小体碎裂,大部分细胞呈典型的凋亡形态。结论:中药补骨脂提纯物补骨脂素对人白血病细胞K562具有杀伤作用。补骨脂素具有光敏活性,结合360 nm波长紫外线照射治疗对K562细胞的杀伤作用有明显增强。紫外线照射时间以10 min为最佳;补骨脂素适宜的终浓度为40μg/ml。PUVA对人白血病细胞K562杀伤作用的机制主要是诱导细胞凋亡。

DC-CIK过继性免疫疗法联合化疗治疗转移性结直肠癌患者的疗效

目的:研究DC-CIK(dendritic cell-cytokine induced killer cell)过继性免疫治疗联合化疗对转移性结直肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)的疗效及安全性。方法:选取2010年11月至2011年11月在大连市中心医院治疗的80例mCRC患者,40例行DC-CIK治疗联合化疗(联合组),40例行单纯化疗(化疗组),评价两组患者治疗后免疫功能、疗效、毒副反应和生活质量(quality of life,QOL)。结果:共完成了160周期DC-CIK治疗,联合组治疗前后外周血T细胞亚群无显著变化(P>0.05),化疗组治疗后外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD56+细胞比例较治疗前显著下降,且明显低于联合组(P<0.05);联合组3周期治疗后CD4+T细胞中IFN-γ水平较治疗前显著升高(P<0.05),化疗组治疗后IFN-γ、IL-2、TNF-α水平著下降,且明显低于联合组(P<0.05)。联合组和化疗组总有效率(response rate,RR)未见明显差异(37.5%vs 22.5%,P>0.05);联合组疾病控制率(disease control rate,DCR)明显高于化疗组(77.5%vs 50.0%,P<0.05)。联合组Ⅲ～Ⅳ度白细胞减少及Ⅲ～Ⅳ度迟发性腹泻的发生率明显低于化疗组(17.5%vs 42.5%,5.0%vs 25.0;均P<0.05),其他相关不良反应无显著性差异,而且对症治疗后均可缓解。联合组患者的中位无进展生存(progression-free survival,PFS)较化疗组患者长(6.5个月vs 4.5个月,P<0.05),联合组和化疗组患者的总生存(overall survival,OS)比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组在躯体功能、情绪方面较治疗前明显改善,而且明显好于化疗组(P<0.05)。结论:DC-CIK过继性免疫治疗联合化疗可以明显改善mCRC患者的免疫功能,提高总体疗效,减轻化疗不良反应,延长无进展生存,改善mCRC患者生活质量。

苦参碱逆转人白血病K562/ADM细胞对阿霉素耐药性的研究

[目的 ]探讨苦参碱对人白血病K5 6 2 /ADM细胞对阿霉素耐药性的逆转作用。 [方法 ]MTT法测定苦参碱的细胞毒性及其对K5 6 2 /ADM细胞药敏性的影响 ,荧光分光光度法检测细胞内药物浓度的改变 ,流式细胞术检测耐药细胞凋亡百分率的变化。 [结果 ]苦参碱的非细胞毒性剂量为 5 0μg/mL ,低细胞毒性剂量为 12 5 μg/mL。 5 0 μg/mL苦参碱可增加K5 6 2 /ADM细胞内阿霉素(ADM )浓度和K5 6 2 /ADM细胞凋亡百分率 ,使K5 6 2 /ADM细胞的IC50 由原来的 35 .2 μg/mL降低至 15 .8μg/mL ,其逆转倍数为 2 .2倍。[结论 ]苦参碱可部分逆转人白血病K5 6 2 /ADM细胞对阿霉素的耐药性 ,其逆转机制与增加细胞内药物积累有关。

双歧杆菌对人大肠癌细胞粘附作用的初步探讨

双歧杆菌是人肠道的正常菌群之一。为探讨双歧杆菌对肠道粘膜上皮细胞的粘附机制，本文观察了双岐杆菌ＤＭ９２２７对培养的大肠癌细胞系ＣＣＬ－１８７细胞的粘附作用以及影响粘附的因素，初步建立了体外双歧杆的的粘附模型。结果还发现：在粘附近程中，孵育培养基的环境ｐＨ值在６．０－７．０左右时，钙离子浓度在２．０ｍｍｏｌ／Ｌ时，双歧杆菌ＤＭ９２２７对大肠癌ＣＣＬ一１８７细胞的粘附效果达到最佳。

长链非编码RNA HOTTIP通过调控细胞凋亡水平促进非小细胞肺癌增殖

背景与目的:探索非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)有效的早期诊断及预后标志物具有重要的科学意义和临床价值。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤中的作用逐渐引起研究者的关注。本研究拟分析lncRNA HOTTIP在NSCLC中的表达情况及对NSCLC细胞增殖水平的影响和机制。方法:采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测方法检测54例NSCLC组织及其对应癌旁组织的HOTTIP表达情况,分析NSCLC组织HOTTIP表达与临床病理参数的相关性;MTT方法检测肺癌细胞增殖水平,流式细胞术检测凋亡率的改变;蛋白[质]印迹法(Western blot)检测目的基因的蛋白表达变化。结果:与癌旁组织比较,HOTTIP在肺癌组织中的表达率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。HOTTIP表达与患者淋巴结转移和TNM分期相关。转染HOTTIP siRNA至A549肺癌细胞后,结果显示,与未转染组和阴性质粒转染组相比,转染siRNA-HOTTIP的A549细胞HOTTIP表达明显降低;HOTTIP表达下调后细胞增殖速度减慢,凋亡率增加,凋亡相关蛋白Bax的表达增加,Bcl-2表达减少。结论:HOTTIP是一种新的NSCLC生物标志物,可作为潜在的治疗新靶点。

榄香烯对多药耐药人红白血病细胞株的影响

[目的]探讨抗肿瘤药β-榄香烯对多药耐药细胞系的影响。[方法]利用MTT，荧光染料Hoechst33342染色、透射电镜的方法观察β-榄香烯对多药耐药性（mdr）人红白血病细胞株K562／ADM细胞的生长和凋亡的影响。[结果]β-榄香烯对K562／ADM细胞的抑制作用在5—40μg／mL的药物浓度范围内呈上升趋势，加药组24—72h范围内细胞凋亡率不断增加，浓度40μg／mL72h时达高峰62．73％±，二者呈现药物浓度和作用时间依赖性（P〈0．05或P〈0．01）。[结论]诱导细胞凋亡是β一榄香烯抗肿瘤细胞作用机制之一。

蝙蝠葛碱逆转K562/ADM细胞多耐药性的研究

目的 :研究具有钙拮抗作用的中药蝙蝠葛碱对多耐药性的逆转作用。方法 :选用异搏定作阳性对照 ,观察其对多药耐药细胞株K5 6 2 /ADM多药耐药性的逆转作用。结果 :蝙蝠葛碱在非细胞毒性剂量下能使K5 6 2 /ADM对阿霉素的浓度升高 ,但对细胞表面的糖蛋白P - 170却没有影响。结论 :蝙蝠葛碱具有逆转白血病细胞株K5 6 2