抗核糖核酸酶抑制因子抗体的制备与纯化

目的 :制备并纯化抗核糖核酸酶抑制因子 (RI)的抗体。方法 :从人胎盘中提取RI,经亲和层析纯化后免疫家兔制备RI抗体。用rProteinASepharoseFastFlow层析对抗RI抗体进行纯化 ,并用SDS PAGE、ELISA及Westernblot等进行鉴定。结果 :制备并纯化了抗RI抗体 ,经SDS PAGE分析达到了电泳纯。结论 :获得了效价高、特异性强、稳定性好的抗RI抗体 。

槲皮素制备方法的改进

[目的]对槐花米中槲皮素传统的制备方法进行改进,从而提高槲皮素的产率和提取效率。[方法]利用碱提取-酸沉淀法从槐花米中提取芦丁粗品,采用:①间接酸水解法(传统方法),将粗制芦丁通过重结晶纯化得到精制芦丁,再用酸水解制得槲皮素;②直接酸水解法(改进方法),将粗制芦丁的重结晶滤液直接加酸水解制得槲皮素;并用HPLC等技术对两种方法所得产品与槲皮素标准品进行鉴定和分析。[结果]改进方法制备的槲皮素与传统方法相比,二者纯度均与标准品接近,但前者反应时间至少缩短120 min,产率却提高19.45%。[结论]改进方法显著地提高了槲皮素的提取产率和效率,为槲皮素的实验室制备和工业生产提供借鉴。

超声时间与药材粒度对超声法提取槐花米中芦丁的影响

[目的]研究超声时间及药材粉碎粒度对超声法提取芦丁产率的影响,从而提高芦丁的提取效率。[方法]将不同粉碎粒度的槐花米粉末溶于碱液,超声提取不同时间后,检测不同时间点及不同粉碎粒度药材的芦丁产率,探索超声时间及粉碎粒度对芦丁提取产率的影响。[结果]粉碎至不同粒度的槐花米粉末,超声提取后所得芦丁产率在一定时间范围内均与超声时间正相关,而后呈平台趋势,在本实验条件下,采用3号筛的槐花米粉末超声5m in后即达到较高提取产率16.46%。[结论]药材粉碎粒度及超声时间对芦丁提取效率有着明显影响,超声辅助提取法较传统的碱提酸沉法具有流程短、效率高及成本低等优点。

中性粒细胞在实验性小鼠肾毒性损伤中的变化及其意义

[目的]探讨大剂量顺铂(Cisplatin,DDP)诱发实验性小鼠急性肾毒性损伤中中性粒细胞的变化及意义。[方法]昆明种小鼠40只,雌雄各半,依体重随机分为DDP组(12 mg/kg DDP单次腹腔内注射)和生理盐水(NS)对照组(等量NS对照)。分别取对照组小鼠10只和DDP用药后6、24、48 h小鼠各10只,内眦静脉取血,行白细胞(WBC)计数和分类计数,并检测肾脏功能。取两侧肾脏,制备10%肾皮质匀浆,比色法测定血浆和肾组织中髓过氧化物酶(Peroxidase,MPO)活性。[结果]DDP用药后48 h,小鼠血尿素氮和肌酐含量明显升高,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01)。小鼠外周血WBC数量DDP用药后逐渐下降,24 h内外周血涂片中性粒细胞(poly-morphonuclear neutrophil,PMN)脱颗粒明显可见;用药后48 h血WBC计数最低,达(3.7±0.66)×109/L,与对照组(5.93±0.55)×109/L比较差异具有显著性意义(P<0.01)。小鼠外周血MPO含量DDP用药24 h内逐渐下降,用药后48 h升高,达(39.58±4.04)U/L,与对照组(19.44±5.87)U/L比较差异具有显著性意义(P<0.01)。小鼠肾皮质匀浆MPO含量DDP用药后6 h明显升高,用药后24 h最高达(0.34±0.11)U/g,与对照组(0.13±0.03)U/g比较差异均具有显著性意义(P<0.01);用药后48 h下降,与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。[结论]中性粒细胞的激活,特别是肾皮质中性粒细胞MPO的释放在大剂量DDP所致小鼠肾毒性损伤早期发挥重要作用。

吡咯烷二硫氨基甲酸对小鼠大剂量顺铂肾毒性损伤的防治作用

[目的]探讨抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对大剂量顺铂(cisplatin,DDP)所致肾毒性损伤的防治作用。[方法]昆明种小鼠100只,雌雄各半,依体重随机分为DDP组,DDP+PDTC组,生理盐水(NS)对照组。DDP 12 mg/kg单次腹腔内注射,PDTC 50 mg/kg每日皮下注射1次,连用3 d,等量NS对照。每组取10只小鼠,观察并记录其用药后的反应、体重变化及存活时间;分别取对照组小鼠和DDP用药后24、48、72h的DDP组和DDP+PDTC组小鼠各10只,内眦静脉取血检测肾脏功能,然后剖腹取两侧肾脏,称重并计算肾系数,统计学分析。[结果]DDP用药后24 h,DDP用药组小鼠体重下降、肾系数增高;用药后48 h,小鼠血尿素氮、肌酐含量明显升高;用药72 h 66%小鼠死亡,与对照组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01)。PDTC可明显减轻DDP所致小鼠的体重下降,并能有效预防DDP用药后小鼠血尿素氮和肌酐的升高,明显提高小鼠的生存率,与DDP用药组小鼠比较差异具有显著性意义(P<0.01)。[结论]PDTC可改善小鼠DDP用药的毒副作用,预防大剂量DDP所致的肾损伤。

微波辐射加热法合成乙亚胺

[目的]探讨微波辐射加热法合成乙亚胺的优越性。[方法]通过调整原料比例、微波功率和反应时间,确定最佳反应条件。然后,以传统方法合成乙亚胺,并将其结果与微波合成的结果相比较。[结果]微波辐射加热合成产物、传统方法合成产物、及标准品进行红外鉴定,确定它们为同一物质。在420 W的功率下,以甲酰胺∶乙二胺四乙酸(EDTA)=10.5∶1的比例反应12.5 min有最高产率,为75.6%。传统方法合成乙亚胺的产率为69.3%。相对于传统方法将反应时间缩短至原来的3.8%,并节约了46%的甲酰胺。[结论]微波合成乙亚胺相对于传统合成方法产率有所提高,并且大大缩短了反应时间,提高了原料甲酰胺的利用率。

炉甘石洗剂的稳定性试验及处方筛选

[目的 ]对 5种处方的炉甘石洗剂进行稳定性试验 ,筛选该洗剂的最佳处方。 [方法 ]测定 5种处方的沉降容积比并作重新分散试验。 [结果 ]1号处方的沉降容积比最大 ,稳定性最好。 [结论 ]炉甘石洗剂的最佳处方应是选择CMC -Na为稳定剂 ,才能在贮存和使用期间达到最佳效果。

血管活性肽P6A类似物的合成

[目的 ]合成抗血栓活性多肽P6A的结构类似物 ,以获得稳定性好生物利用度高的抗血栓药物。 [方法 ]以哌嗪为原料与氯化氢形成哌嗪二盐酸盐 ;二盐酸盐和间硝基氯苄反应生成 3-硝基苄基哌嗪盐酸盐 ;硝基物经铁粉还原成 3-氨基苄基哌嗪 ;γ -氨基丁酸经甲酰化生成N -甲酰基γ-氨基丁酸 ,后者与 3-氨基苄基哌嗪缩合得目标产物 1 - (4 -甲酰氨基 )丁酰基 - 4- [3- (4 -甲酰氨基 )丁酰基 ]苄基哌嗪。 [结果 ]终产物经H -NMR及MS证明结构正确 ,为目标化合物。 [结论 ]通过上述合成方法能够获得目标化合物。

微波技术合成恶丙嗪优点的探讨

[目的 ]比较微波技术和普通方法合成恶丙嗪的优缺点。 [方法 ]在反应瓶中利用普通方法合成恶丙嗪和在微波反应器中利用微波辐射合成恶丙嗪。 [结果 ]微波合成仅用 17min产率为 83% ,而普通合成用 5h产率为 6 5 %。 [结论 ]微波合成比普通合成所用时间短、能耗低、产率高。

大剂量顺铂所致大鼠急性肾功能衰竭过程中内毒素血症与革兰阴性菌感染的关系

[目的]利用大剂量顺铂(cisplatin,DDP)所致大鼠急性肾功能衰竭的动物模型,探讨大鼠内毒素血症与革兰阴性菌感染的相互关系。[方法]SD大鼠24只,雌雄各半,依体重随机分为DDP用药6、24、48 h组和NS对照组,每组6只。10 mg/kg DDP单次腹腔内注射,等量生理盐水对照。观察并记录DDP用药后大鼠的反应及体重变化;心室穿刺取血行细菌培养和内毒素检测,内眦静脉取血检测肾脏功能,剖腹取回盲部淋巴结细菌培养。[结果]大剂量DDP用药后6 h大鼠体重开始进行性下降,用药48 h后大鼠出现腹泻,用药3 d后腹泻大鼠全部死亡。DDP用药后6 h所有大鼠外周血内毒素含量都低于0.0218 Eu/mL最低检出限,明显低于对照组大鼠(0.3141±0.2945)Eu/mL;DDP用药48 h后大鼠外周血内毒素含量显著增高,超出最高检出限0.70 Eu/mL,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01)。DDP用药后6、24、48 h大鼠和对照组大鼠,其外周血细菌培养均无细菌生长。DDP用药后24 h,66%的大鼠回盲部淋巴结发现革兰阴性菌生长;DDP用药后48 h,83%的大鼠回盲部淋巴结有革兰阴性菌生长,而对照组大鼠则无细菌生长。[结论]大剂量顺铂所致大鼠急性肾功能衰竭过程中,大鼠内毒素血症与其回盲部淋巴结革兰阴性菌感染有关,而与革兰阴性菌败血症无关。

髓过氧化物酶与大剂量顺铂所致小鼠肝功能变化关系的探讨

目的利用大剂量顺铂(Cisplatin,DDP)诱发小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,了解大剂量DDP在引起肾损伤的同时对小鼠肝的毒性作用,探讨髓过氧化物酶(Peroxidase,MPO)与DDP所致小鼠肝功能变化的关系。方法 C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,依体重随机分为DDP用药组和生理盐水(NS)对照组。15 mg/kg DDP单次腹腔内注射,等量NS对照。分别取对照组小鼠和DDP用药后6、12、24和48 h小鼠各10只,称重后乙醚麻醉,内眦静脉取血检测肝、肾功能;剖腹取肝、称重、计算肝系数,并取少量肝组织行HE染色、形态学观察;检测血浆和肝组织匀浆中MPO活性,统计学分析。结果大剂量DDP用药后48 h,小鼠出现急性肾功能衰竭。DDP用药后6 h血清谷丙转氨酶(ALT)含量达(91.0±11.3)IU/L,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),随后血清ALT含量持续维持在高水平。DDP用药后各组小鼠肝系数明显升高,光镜下见肝细胞广泛变性水肿,肝小叶中可见点状坏死及炎细胞浸润。DDP用药后6 h,小鼠肝组织匀浆MPO含量显著升高,达(1.54±0.45)U/g,与对照组(0.58±0.28)U/g差异有统计学意义(P<0.01),随后MPO含量降至正常水平;DDP用药后小鼠外周血MPO含量缓慢增高,用药后48 h达(12.78±2.78)U/L,与对照组(8.06±1.89)U/L比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论大剂量DDP在诱发小鼠急性肾功能衰竭的同时还可引起小鼠急性肝细胞的破坏,其发生可能与肝组织内白细胞的激活及MPO的释放有关。

钾离子竞争性酸阻滞剂的研究进展

胃酸分泌过多可引起消化性溃疡、反流性食管炎及其他胃酸分泌相关疾病。抑制胃酸分泌是该类疾病的主要治疗方法。临床上常用的抑酸药物有组胺H2受体拮抗剂（H2～Ras）和质子泵抑制剂（proton pump inhibitors，PPI）。