肺癌癌前病变中的分子生物学异常事件

近二十年来,我国肺癌的发病率迅速上升,到目前为止,肺癌的发病率和死亡率已居肿瘤之首。早期诊断是提高肺癌5年生存率的关键。本文拟对肺癌发生中的早期遗传学事件加以概述,其中主要有p53的突变,p16启动子区的异常甲基化,3p、8p、9p、5q的杂合性缺失等,以期寻找肺癌发生中的生物标记,为肺癌的诊断和治疗提供理论参考。

β-榄香烯吗素抗肿瘤作用的实验研究

β-榄香烯吗素 (PIC- BE)是抗癌新药β-榄香烯的水溶性衍生物 ,本文观察了 PIC- BE对多药耐药 K5 6 2 / ADM细胞系及其敏感细胞 K5 6 2 的生长抑制和凋亡诱导作用。结果显示 ,(1 ) K5 6 2 / ADM细胞对 ADM具有明显的抗性 ,与 K5 6 2 细胞相比 ,抗性倍数约为 40倍 ,而两者对 PIC- BE的 IC5 0 接近 ,无显著差异 ;(2 ) PIC- BE (1 0 .0 - 30 .0μg/ ml)对 K5 6 2 和 K5 6 2 / ADM细胞不仅具有明显的生长抑制作用 ,而且显著地诱导细胞凋亡 ,其作用强度在一定的范围内呈相对浓度和时间的依赖性。以上结果提示 ,PIC- BE是一种有效的抗肿瘤化合物 ,且已产生 MDR的 K5 6 2 / ADM细胞对它不具耐药性。

PIC-BE诱导K562/ADM细胞凋亡及逆转其MDR的研究

β榄香烯吗素（ＰＩＣ－ＢＥ）是抗癌新药β榄香烯的水溶性衍生物．采用人红白血病的多药耐药性（ＭＤＲ）细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ作为实验模型，观察ＰＩＣ－ＢＥ对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞的生长抑制和凋亡诱导作用，并进而研究其对该细胞ＭＤＲ的可能影响．结果显示：（１）Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对ＡＤＭ具有明显的抗性，与Ｋ５６２细胞相比，抗性倍数约为４０倍，而两者对ＰＩＣ－ＢＥ的ＩＣ５０接近，无显著差异；（２）ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０～３０．０μｇ／ｍｌ）对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞具有明显的生长抑制和凋亡诱导作用，两种作用的强度在一定的范围内均具药物浓度和作用时间依赖性；（３）低毒剂量ＰＩＣ－ＢＥ（１０．０μｇ／ｍｌ）与ＡＤＭ（４．０μｇ／ｍｌ）联合应用，可显著增强ＡＤＭ对该细胞的生长抑制和凋亡诱导作用，升高细胞内ＡＤＭ的浓度，降低该细胞对ＡＤＭ的ＩＣ５０，使该细胞对ＡＤＭ的抗性有数倍逆转．上述结果提示，ＰＩＣ－ＢＥ不仅是一种有效的广谱抗肿瘤剂。

茵陈承气汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡及调控基因的影响

目的 :研究茵陈承气汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡及调控基因Bax表达水平的影响。 方法 :胰胆管内注射去氧胆酸钠制备大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型 ,随机分为对照组 ,模型组 ,中药 (茵陈承气汤 )治疗组 ,观察各组大鼠胰腺组织病理学、血清淀粉酶、IL - 6、IL - 8的变化 ,应用TUNEL法分析急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡情况 ,WesternBlotting检测凋亡调控基因 -Bax的表达情况。 结果 :中药组大鼠血清淀粉酶 ,IL - 6、IL - 8水平较模型组低 ,病情明显改善 ,两组差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;模型组凋亡指数为 2 34± 1 15 ,中药组为 11 5 2± 3 41,P <0 0 1;模型组Bax的表达水平为 96 8± 2 76 ,中药组为 1331± 112 ,P <0 0 1。 结论 :茵陈承气汤可能通过上调促凋亡基因Bax的表达水平 ,诱导已受损的腺泡细胞发生凋亡 ,减轻腺泡细胞坏死 ,减少胰酶及炎性介质的释放 。

介绍一种血小板整体黏附电镜样品制备方法

本文介绍制备黏附聚集的整体血小板电镜样品。将抗凝血直接铺在覆有Formvar(聚乙烯醇缩甲醛)的铜网上,然后依次对样品进行温育、冲洗、固定、再冲洗、空气自然干燥后电镜观察。这种方法制作简单而且省时,在电镜下可见各种形态完好的血小板,圆形、树突形、扩展形及聚集形。

mdr-1和bcl-2基因在K562/ADM多药耐药细胞中的共表达

为探讨肿瘤细胞多药耐药(MDR)形成的分子机理,本文观察了mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白在人红白血病细胞株K562/ADM中的可能共表达。结果显示,在K562/ADM细胞中,在以mdr-1及P-gp过度表达为 特征的MDR形成时,其bcl-2及产物Bcl-2也过度表达,其中Bcl-2的表达阳性率约为相应敏感株K562的11倍;而Bax在二种细胞中均呈阳性表达,但无显著差异(P>0.05),提示bcl-2基因在mRNA和蛋白水平上的过度表达可能是K562/ADM细胞MDR形成时细胞凋亡耐受的分子基础。

透射电镜超薄切片污染产生的原因及对策

目的分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法对样品制备及观察的每个环节逐一分析,对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法,严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果消除了污染,保证了超薄切片的质量,电镜下拍出高质量的照片。结论污染的原因是多方面、多因素的,只要工作中精益求精,基本上可以避免切片污染。

PIC-BE对K_(562)/ADM多药耐药细胞mdr-1和bcl-2基因表达的影响

本文以多药耐药(MDR)细胞株K_(562)/ADM作为实验模型,研究了β-榄香烯吗素(PIC-BE)对该细胞中mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白(P-gp、Bcl-2和Bax)表达的影响。结果显示,PIC-BE可显著抑制K_(562)/ADM细胞中mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达,并在一定的范围内呈现对浓度和时间的依赖性。相同条件下,PIC-BE对该细胞中Bax的表达虽有所促进,但统计学上无显著差异,提示PIC-BE对K_(562)/ADM细胞MDR的逆转作用可能是通过其直接或间接地影响到该细胞mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达或功能而实现。

维甲酸诱导大肠癌CCL-187细胞成熟分化的研究

以全反式维生素甲酸 (RA)处理大肠癌细胞系CCL 187,观察RA对CCL 187细胞生长状态、细胞表面形态、超微结构、分化标志酶碱性磷酸酶活性以及内质网标志酶葡萄糖 6 磷酸酶活性的影响。结果发现 5 μMRA可明显抑制CCL 187细胞的生长 ,扫描电镜显示RA处理后的细胞表面较处理前规则 ,丝状伪足消失 ,出现钝形突起 ,超薄切片经透射电镜观察显示线粒体、内质网等细胞器增多 ,酶活性检测显示内质网标志酶葡萄糖 6 磷酸酶活性增强 ;分化标志酶 -碱性磷酸酶的活性较处理前明显升高 ,第 8天时较对照细胞高 2 3 4%。结果提示RA可诱导大肠癌细胞成熟分化。