甲状腺癌细胞中分化相关蛋白的筛选分析

目的检测正常甲状腺细胞系、中分化甲状腺癌细胞系和低分化甲状腺癌细胞系蛋白质表达谱,寻找与甲状腺癌分化相关的生物标志物。方法应用液相色谱(liquid chromatogram,LC)与质谱(Mass Spectrum,MS)联用分析方法,找出正常甲状腺细胞与中、低分化甲状腺癌细胞系间的差异蛋白。利用生物信息学方法对差异蛋白进行分析,并利用Western blot检测THJ-16T、FTC133、Nthy-ori3-1等3个细胞系中I型胶原α1(collagen type Iα1,COL1A1)、I型胶原α2(collagen type Iα2,COL1A2)、内凹陷蛋白(caveolin-1,Cav-1)、纤维束蛋白同源物1(fascin 1,FSCN1)、硫氧化还原蛋白(thioredoxin,TRX)、高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1,HMGA1)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase,SOD2)、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rho-associated protein kinase 1,Rock-1)、角蛋白7(cytoskeletal 7,KRT7)、角蛋白8(cytoskeletal 8,KRT8)的表达,利用免疫细胞化学方法进一步验证,从而筛选出分化相关蛋白。结果通过分析获得中分化与低分化甲状腺癌细胞细胞系差异表达蛋白质178个。生物信息学研究表明,这些差异蛋白质主要参与细胞内吞信号、T-淋巴细胞介导的细胞凋亡、维生素C运输等通路,且通过Western blot检测发现COL1A1、Cav-1、TRX、Rock-1的表达与细胞的分化能力呈正相关,部分蛋白表达水平使用免疫细胞化学验证,与Western blot结果相符。结论COL1A1、Cav-1、TRX、Rock-1可能是分化相关的标记物,此为进行大样本的临床检测提供了线索。

Aurora-A激酶在肺癌中的表达

[目的]探讨Aurora-A基因在不同组织类型肺癌中的表达及其与临床的相关性。[方法]采用RT-PCR、Western-blot与免疫组化方法检测肺癌组织标本行Aurora-A的mRNA与蛋白表达。[结果]肺癌30例标本中RT-PCR检测Aurora-A mRNA的表达,19例(63%)肺癌表达水平高于相应癌旁组织,其中Western blot方法检测20例中,13例(65%)蛋白表达水平高于相应癌旁组织。免疫组化检测48例肺癌中32例高表达(66.67%)。肺癌Aurora-AmRNA的表达水平与肺癌患者的性别,吸烟史以及病理特征无明显相关性。肺鳞癌的Aurora-A的蛋白水平高表达程度与肿瘤转移有相关性。[结论]肺癌组织Aurora-A表达明显高于其癌旁组织,提示Aurora-A基因的过表达与肺癌的发生有相关性。

BRCA1基因在人食管癌中的表达

目的本研究利用组织芯片检测BRCA1基因在人食管癌中的表达与食管癌的生长、分化和转移等临床特征的关系,期望找到BRCA1与食管癌发生、发展的关系。方法收集48例食管癌患者标本,分别取其肿瘤组织、癌前病变组织及正常组织制成组织微阵列,免疫组织化学SP法检测BRCA1蛋白的表达,分析BRCA1在各种组织的表达特点及其与肿瘤的关系。选择其中10例患者的上述组织的新鲜标本,采用Western blot检测BRCA1蛋白的表达。结果免疫组织化学结果显示,BRCA1在肿瘤组织阳性占70.50%,癌前组织阳性占43.10%,正常组织阳性占39.00%,食管癌组织与癌前病变组织、食管癌组织与正常组织相比BRCA1的表达均存在显著差异(P<0.01)。BRCA1的表达与食管癌的病理分化有统计学上的差异(P<0.05)。Western blot显示,BRCA1在食管癌肿瘤组织、癌前病变组织及正常组织中表达量依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05);BRCA1在高、中、低分化程度的食管癌组织中表达量依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论BRCA1与食管癌发生发展有关,BRCA1的表达与食管癌的分化呈正相关。