CDKL3表达异常对神经元树突形态发育的影响

目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3表达异常对神经元树突形态发育的影响,揭示CDKL3失活与该病的内在联系。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为敲减1组、敲减2组、过表达组、敲减拯救组和对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组神经元中CDKL3基因表达,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因干扰质粒的效率,采用细胞免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组神经元树突分支形态;将小鼠胚胎随机分为敲减1组、敲减2组、过表达组、敲减拯救组和对照组,采用质粒胚胎电转法干扰各组活体神经元中CDKL3基因表达,采用细胞免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组神经元树突分支形态。结果敲减神经元中的CDKL3可致树突分支数量和总长度显著减少,上调CDKL3则引起相反结果,且敲减CDKL3对树突形态的影响可被转染入神经元的RNA干扰质粒对应的拯救质粒所拯救。结论 CDLK3的表达和活动对神经元树突的生长及分支形成至关重要,CDKL3失活引起神经元树突形态发育异常可能是该基因相关精神发育迟滞的重要病理机制。

探讨新型冠状病毒流行对大连市急性缺血性卒中患者静脉溶栓治疗的影响

目的探讨2020年大连市急性缺血性卒中(AIS)患者静脉溶栓治疗数量、来院方式、出现症状至到达医院的时间(ODT)、到达医院至开始静脉溶栓治疗时间(DNT)、出现症状至开始用药时间(ONT)以及溶栓前后美国国立卫生研究院神经功能缺损评分(NIHSS)是否受到新型冠状病毒疫情流行的影响。方法对大连市13家卒中急救地图参与医院进行回顾描述性研究,选取2020年8-12月于13家医院行静脉溶栓治疗的AIS患者:ODT、DNT、ONT、到达医院的运输方式、到达医院时NIHSS评分及溶栓后即刻NIHSS评分等。数据采集工作2020年8月1日-12月31日,并与2019年同期基线数据进行对比。结果采用SPSS 22.0软件及Excel的分析工具库对获取数据进行统计分析,使用Student t检验进行数据分析:2020年接受静脉溶栓治疗的AIS患者例数增加(681例比416例),DNT中位数延长[50比45(P=0.01)];2020年83.55%的患者选择自行前往医院就诊的交通方式;2020年NIHSS<15分自行就诊的卒中患者静脉溶栓前及溶栓后即刻NIHSS评分不变及减少的患者为多数(95%),且NIHSS评分减少程度比较差异有统计学意义(562分比535分,P<0.001),NIHSS评分≥15分的卒中患者更愿意呼叫救护车到医院就诊。结论2020年新型冠状病毒流行期间,接受静脉溶栓治疗的AIS患者数量增加,但DNT中位数延长;NIHSS评分<15分患者更多自行来院就诊,且从静脉溶栓中获益,NIHSS≥15分卒中患者更愿意呼叫救护车到医院就诊。

TCD发泡试验对偏头痛合并卵圆孔未闭患者的筛查及封堵治疗后评价的意义

目的观察TCD发泡试验(c-TCD)对偏头痛患者筛查卵圆孔未闭(PFO)的价值及封堵PFO后的疗效。方法偏头痛患者126例,男45例,女81例,平均年龄42.3±3.6岁,其中先兆偏头痛(MA)78例,非先兆偏头痛(MO)48例。所有患者均行c-TCD、食道超声心动图(TEE)及头部CT检查。对诊断为卵圆孔未闭且同意封堵治疗的患者进行经皮穿刺介入封堵治疗,并在封堵术后1m、3m行c-TCD及常规经胸心脏超声心动图(TTE)检查,在术后6m行TTE联合TCD声学造影及头部CT检查。结果 126例偏头痛患者中,46例(36.5%)c-TCD提示心脏存在右向左分流且TEE证实存在卵圆孔未闭,其中MA 32例,MO 14例;12例(MA 8例,MO 4例)接受介入封堵治疗,其中10例封堵术后偏头痛症状消失,2例封堵术后患者偏头痛症状明显改善;4例封堵术后3m内c-TCD提示存在右向左分流,较术前明显减少,其中2例仅在Valsalva动作后出现。封堵术后6m c-TCD联合TTE声学造影检查,2例(均为术后3m常规c-TCD阳性)患者仍存在右向左分流,所有头部CT无新发梗死病灶。结论 c-TCD对PFO的筛查及介入封堵术后随访具有重要指导价值;介入封堵治疗可明显改善合并PFO患者的偏头痛症状;封堵治疗6m后仍有部分患者存在残余右向左分流。

Guillain-Barré综合征患者临床及脑脊液细胞学特点

目的探讨Guillain-Barré综合征(GBS)患者临床及CSF细胞学特点。方法回顾性分析37例GBS患者的临床资料。结果本组患者急性起病33例,亚急性起病4例。临床表现为四肢无力18例(48.6%),双下肢无力16例(43.2%),四肢麻木21例(56.8%),双侧面神经麻痹12例(32.4%),其他颅神经损害5例(13.5%),呼吸肌麻痹3例(8.1%),全自主神经功能障碍及Fisher综合征各1例(5.4%);变异型GBS 6例(16.2%)。腰穿CSF检查示4例(10.8%)患者压力高,11例(29.7%)细胞计数升高,29例(78.4%)蛋白升高,7例(18.9%)免疫球蛋白升高。34例(91.9%)CSF细胞学检查异常,22例(64.7%)患者表现为激活的淋巴细胞反应,12例(35.3%)以激活的单核细胞反应为主。感觉或运动神经传导异常25例(67.6%),F波或H反射异常33例(89.2%)。32例患者给予丙种球蛋白或血浆置换治疗,5例给予糖皮质激素治疗,均有效。结论 GBS多数表现为四肢对称性麻木、无力,部分为变异型。F波、H反射电生理检查早期异常率高。CSF细胞学检查早期以淋巴细胞反应为主,后期以单核细胞反应为主。

低分子肝素联合氟桂利嗪对频发性TIA患者脑梗死的预防效应

目的:评估频发性短暂脑缺血发作(TIA)患者联合应用低分子肝素与氟桂利嗪,对预防发生脑梗死的临床价值。方法:选取132例频发性TIA患者,按治疗方案不同分为:对照组65例,予以低分子肝素治疗;研究组67例,予以低分子肝素联合氟桂利嗪治疗。两组均予以抗血小板、调脂等基础治疗,疗程均为2周。比较两组患者的血液流变学指标、凝血系统指标的差异。随访3月,比较两组TIA复发率和脑梗死发生率的差异及各种不良反应发生率的差异。结果:研究组总有效率、显效率明显高于对照组(P<0.05),两组治疗后全血黏度(低切)、全血黏度(高切)、血浆黏度、凝血酶原时间(PT)、凝血酶原时间国际标准化比值(INR)、纤维蛋白原含量较治疗前明显改善(P<0.05),治疗后研究组较对照组改善更明显(P<0.05)。研究组的TIA复发率和脑梗死发生率低于对照组(P<0.05)。研究组各种不良反应较发生率与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:低分子肝素与氟桂利嗪联合应用能显著降低频发性TIA发作频率并减少脑梗死发生几率。

阿替普酶静脉溶栓治疗75例超早期脑梗死临床分析

目的研究重组组织型纤溶酶原激活剂(rtPA)静脉溶栓治疗发病4.5 h内的急性脑梗死患者,分析病因分型、评价静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效及不良反应,为rtPA静脉溶栓治疗超早期缺血性脑卒中的合理应用提供依据和临床经验。方法根据急性缺血性脑卒中rtPA静脉溶栓入选病例标准选择治疗病例,按照静脉溶栓治疗规范行rtPA静脉溶栓治疗,描述病因分型;分析溶栓后不良反应。结果大血管动脉粥样硬化和心源性栓塞为脑梗死主要病因,分别占41.4%,29.3%;临床疗效好者占37.3%;症状性颅内出血5例,占6.67%。结论脑梗死病因分型比例与CISS分型比例一致;急性脑梗死时间窗内rtPA静脉溶栓,可改善急性期脑梗死神经功能及临床预后;溶栓后影响预后的主要不良反应为症状性颅内出血。

我国Sturge-Weber综合征癫痫病例临床特点分析

目的：研究我国Sturge-Weber综合征癫痫病例临床表现、神经影像、脑电图、诊断及治疗特点,并探讨与之相关的可能的发病机制,提高对该病的认识,减少误诊。方法通过分析1994~2012年我国报道的398例Sturge-Weber综合征病例临床、神经影像、脑电图及治疗资料并复习国内外文献,总结分析该病癫痫患者的临床特点。结果该病我国华北地区报道的病例最多118例；癫痫334例,有确切发病年龄病例144例,小于3岁81例,全身强直阵挛发作30例,有脑电图检查的病例69例,47例有癫痫波,难治性癫痫手术治疗42例；头CT及MR检查,钙化病灶242例,枕叶106例,顶叶99例；脑萎缩、软脑膜、脉络丛、深静脉血管病变56例,血管畸形36例；误诊5例。结论本文统计数据进一步阐明我国Sturge-Weber综合征癫痫病例临床特点,大部分数据与该病国外研究报道比较,具有一致性。

自体骨髓造血干细胞移植治疗脑炎后癫痫1例

我国癫痫的患患者数约500万－600万，每年新发的患者约65万-70万，其中约25％为难治性癫痫，药物治疗效果不佳，部分患者选择性手术切除可取得疗效，但手术本身存在一定风险，可造成神经功能损害。近年来人们对神经干细胞移植治疗脊髓损伤，肌萎缩侧索硬化，帕金森病，亨廷顿病，多发性硬化，中风，脑外伤和癫痫等做了大量探讨。近期我科通过自体骨髓遣血干细胞移植治疗了1例单纯疤疹病毒脑炎后遗难治性癫痫患者，在控制癫痫发作方面取得一定疗效，现报道如下。

不同年龄急性脑梗死患者阿替普酶静脉溶栓疗效及安全性分析

目的评估不同年龄急性脑梗死患者接受阿替普酶静脉溶栓的疗效及安全性。方法选择急诊收治的发病4.5h内缺血性脑卒中行阿替普酶静脉溶栓治疗患者132例,根据年龄分为<60岁组37例,60~79岁组63例,≥80岁组32例。溶栓后24h复查头颅CT,如无出血给予抗血小板或抗凝治疗。应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评价溶栓后2、24h,7、14d疗效,统计平均有效时间,绘制生存曲线,比较3组静脉溶栓治疗的有效性。结果 3组年龄、心房颤动、缺血性心脏病、吸烟、饮酒、NIHSS>15分比例比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。所有患者平均有效时间为7.207d(95%CI:6.169~8.245)。<60岁组平均有效时间为5.303d(95%CI:3.428~7.179),60~79岁组平均有效时间为7.635d(95%CI:6.135~9.134),≥80岁组平均有效时间为8.467d(95%CI:6.331~10.603)。3组有效性生存曲线比较,差异有统计学意义(χ2=13.746,P=0.001)。结论不同年龄急性脑梗死患者阿替普酶静脉溶栓治疗均有效,并且相对安全。

SolitaireAB支架取栓治疗心房颤动患者急性脑梗死疗效及转归不良因素分析

目的评价SolitaireAB支架取栓治疗心房颤动(房颤)脑梗死疗效及转归不良的影响因素.方法选择超早期脑梗死患者78例,根据病因分为房颤取栓组(A组)47例和大动脉粥样硬化取栓组(B组)31例.2组均行SolitaireAB支架取栓治疗,用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评定神经功能,用改良Rankin量表评价预后.比较2组取栓治疗的有效性、安全性;绘制生存曲线,评价3及6个月患者神经功能恢复情况,分析影响患者转归的因素.结果 A组症状性颅内出血和病死率虽高于B组,但差异无统计学意义(21.3% vs 6.5%,19.1% vs 12.9%,P>0.05).B组预后明显好于A组,差异有统计学意义(P<0.01);2组3和6个月的预后良好率均有统计学差异(P<0.05).年龄、房颤、基线NIHSS评分、术前Qureshi分级、闭塞动脉部位为影响预后的因素,基线NIHSS评分是影响转归的保护性因素,房颤为转归不良的独立危险因素.结论 SolitaireAB支架取栓治疗房颤脑梗死急性期疗效肯定,远期预后较大动脉粥样硬化取栓患者差;房颤是转归不良的独立危险因素.

偏头痛脑白质病变的相关因素

目的分析偏头痛脑白质病变(WML)的相关因素。方法收集135例偏头痛患者(偏头痛组)及118名健康对照者(正常对照组)的临床资料。对入组者进行头颅MRI检查,并采用Fazekas量表评分评价WML情况;采用TCD声学造影检查右向左分流(RLS)情况。结果偏头痛组WML发生率及深部WML(DWML)发生率显著高于正常对照组(χ^(2)=62.75,P<0.001;χ^(2)=4.888,P=0.027),两组间脑室周围WML(PWML)发生率差异无统计学意义(P=0.534)。偏头痛WML亚组年龄及RLS发生率显著高于无WML亚组(均P<0.05),而性别、偏头痛病程、先兆情况差异无统计学意义(均P>0.05)。二元Logistic回归分析显示,年龄大、合并RLS、RLS大分流量是偏头痛WML的危险因素(均P<0.01)。散点图显示,偏头痛患者WML评分与RLS分流量呈正相关。结论偏头痛患者WML发生率明显高于正常人。年龄大、合并RLS、大分流量RLS是偏头痛患者WML的危险因素。偏头痛患者WML程度越严重,RLS分流量越大。

小鼠神经细胞粘附分子胞内段原核表达载体构建及表达

[目的]构建小鼠神经细胞粘附分子胞内段(NCAM ICD)原核表达载体,诱导蛋白表达,并进一步对蛋白进行纯化和鉴定。[方法]以小鼠脑c DNA文库为模板,采用PCR技术分别扩增NCAM跨膜亚型NCAM140及NCAM180的胞内片段,连接p JET1.2克隆载体。经DNA测序正确后,构建pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导目的蛋白的表达,经Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化,以Western blot和质谱的方法鉴定表达的蛋白。[结果]成功构建了pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达质粒,并用Western blot及质谱法证实NCAM140 ICD及NCAM180 ICD蛋白的表达,分子量分别约为25 kDa及80 k Da。[结论]该方法成功构建小鼠pET29b-NCAM140 ICD及pET29b-NCAM180 ICD原核表达载体,实现了其蛋白表达,为进一步研究NCAM ICD的功能奠定了基础。

精神发育迟滞相关基因CDKL3失活对侧脑室旁区细胞增殖的影响

目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3失活对侧脑室旁区细胞增殖的影响,揭示CDKL3相关精神发育迟滞的病理机制。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为细胞敲减1组、细胞敲减2组、细胞敲减3组和细胞对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组神经元中CDKL3基因表达,采用Western blot法验证基因干扰质粒的效率。将小鼠胚胎随机分为胚胎敲减1组、胚胎敲减2组、胚胎敲减3组和胚胎对照组,采用质粒胚胎电转法干扰各组活体小鼠侧脑室旁区细胞中CDKL3基因表达,采用免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组侧脑室旁区脑组织单位体积中增殖细胞/总细胞的百分比。结果敲减侧脑室旁区细胞中的CDKL3可导致侧脑室旁区的GFP-Brd U-Hoechst共标细胞/GFP阳性细胞百分比显著下降。结论 CDLK3失活可抑制富含神经前体细胞的侧脑室旁区的细胞增殖,影响皮质神经元的数量,参与非特异性精神发育迟滞的病理过程。

伴卵圆孔未闭偏头痛的影响因素分析

目的探讨伴卵圆孔未闭(PFO)偏头痛患者头痛程度的影响因素。方法回顾性分析2013年1月至2019年6月大连医科大学附属大连市中心医院124例伴PFO偏头痛患者的临床资料。经颅多普勒超声发泡试验(c-TCD)检查评估PFO右向左分流量;经食管超声心动图(TEE)检测PFO直径、PFO隧道长度及是否伴有房间隔膨出瘤(ASA);采用头痛影响测定-6(HIT-6)量表评估偏头痛程度。PFO右向左分流量和PFO直径与偏头痛程度比较采用Goodman-Kruskalγ检验;PFO隧道长度和ASA与偏头痛程度比较采用Spearman秩相关分析。结果124例PFO伴偏头痛患者中,c-TCD检测结果显示,小分流量20例,中分流量31例,大分流量73例。TEE检测结果显示,小卵圆孔76例,中卵圆孔47例,大卵圆孔1例;长隧道57例,短隧道67例;无ASA 91例,伴有ASA 33例。HIT-6评分结果显示,一定影响9例,明显影响22例,严重影响93例。Goodman-Kruskalγ检验结果显示,PFO右向左分流量和PFO直径与偏头痛程度呈正相关(γ=0.66,P<0.01;γ=0.38,P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,伴有ASA与偏头痛程度呈正相关(r=0.18,P<0.05),PFO隧道长度与偏头痛程度呈负相关(r=-0.23,P<0.05)。结论PFO右向左分流量、PFO直径、伴有ASA与偏头痛程度呈正相关,PFO隧道长度与偏头痛程度呈负相关。

缺血性脑卒中患者介入治疗后并发相关性肺炎的病原菌分布及药敏分析

目的:探讨缺血性脑卒中患者介入治疗后并发相关性肺炎的病原菌分布情况及其耐药性,为临床合理选择抗菌药物进行抗感染治疗提供参考。方法:选择2016年5月-2018年6月大连医科大学附属大连市中心医院神经内一科收治的182例缺血性脑卒中介入治疗后并发相关性肺炎患者,对患者痰标本进行细菌培养和鉴定,并对培养阳性的病原菌进行药物敏感性试验。结果:182例患者共送检痰标本并进行细菌培养276次,其中阳性检出199次,阳性检出率为72.10%,检出病原菌215株,革兰阴性杆菌153株,占71.16%,其中鲍氏不动杆菌是主要病原菌,占24.19%,其次为肺炎克雷伯菌,占20.93%;革兰阳性球菌62株,占28.84%,其中金黄色葡萄球菌为主要的病原菌,占11.16%,其次为溶血葡萄球菌,占7.91%。革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌中的主要病原菌对抗菌药物的耐药性较严重,且存在多药耐药性的现象。结论:缺血性脑卒中患者介入治疗后并发相关性肺炎的病原菌以革兰阴性杆菌为主,且存在多药耐药率高的现象,临床应合理选取抗菌药物进行治疗。