多媒体、PBL等相结合在神经内科实习中的应用

临床实习是医学生由课堂走向社会、由学生转变为医生的重要过渡阶段,而神经内科的实习又是临床实习的难点,如何提高医学生的神经内科临床实习效率是神经内科教学的重点之一。本教研室采用多媒体教学、以问题为基础的教学方法(Problem-based Learning,PBL)相结合,并引入了模拟人示教,有效地提高了学生的实践能力和临床思维能力,提高了教学质量,为神经内科临床实习教学探索了行之有效的途径。

金丝桃苷对高糖诱导海马HT22细胞氧化应激介导的神经元凋亡的保护作用研究

目的探讨金丝桃苷(hyperoside,Hyp)对高糖(HG)诱导HT22海马神经元氧化应激及凋亡的保护作用及其可能的机制。方法采用CCK8法观察Hyp对HG诱导的HT22海马神经元增殖活力的影响;通过DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)水平;免疫荧光染色测定细胞线粒体膜电位(JC-1);Hoechst 33342染色和AV/PI凋亡试剂盒检测细胞凋亡;Western Blot测定p-Akt、p-GSK-3β、Caspase-3蛋白表达。结果Hyp在0~100μmol/L对细胞增殖活力没有影响,确定了100μmol/L以内是安全浓度范围,Hyp200μmol/L对细胞有损伤作用,低浓度25μmol/LHyp对HG损伤后细胞活力没有作用,50~100μmol/LHyp可明显提高细胞增殖活力;Hyp较HG组可明显抑制ROS产生,增加JC-1表达,而抑制剂TCBN组能阻断Hyp的作用;此外,Hoechst 33342染色和AV/PI凋亡检测结果显示,Hyp较HG组显著减少细胞凋亡,抑制剂TCBN组能阻断Hyp的作用,细胞凋亡增多;WB结果显示,Hyp较HG组显著增加p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达、降低Caspase-3蛋白表达,抑制剂TCBN组阻断了这种作用。结论Hyp能够抑制高糖诱导的HT22细胞氧化应激反应及凋亡,其作用可能与通过激活Akt/GSK-3β信号通路有关。

大鼠视神经少突胶质细胞培养方法的改良

目的改良既往新生大鼠视神经组织块培养法体外培养少突胶质细胞. 方法新生2 d SD 大鼠.无菌条件下取双侧视神经.置于预先涂有多聚赖胺酸的培养皿中（直径3..5 cm）.加入基础培养液约400μL.培养第4 天时.更换为含0. 5%胎牛血清化学限定培养液约400 μL.约第10 天时.更换为无胎牛血清化学限定培养液约600 μL.第11 天行髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein.MBP）细胞免疫化学鉴定.计算阳性细胞百分率. 重复培养3 次.方差分析方法的稳定性. 结果视神经培养至第11 天.每皿细胞数可达（6-8）×105个.90%以上为MBP 阳性细胞.3 次培养细胞的MBP 免疫细胞化学染色阳性细胞百分率差异无统计学意义（P〉0.05）. 结论本实验方法所得成熟少突胶质细胞纯度高.数量足够-般细胞生物学实验使用.且方法简便、稳定.

芍药苷通过抑制氧化应激及凋亡保护高糖诱导大鼠皮质神经元损伤

目的探讨芍药苷对高糖诱导大鼠皮质神经元氧化应激及凋亡的保护作用。方法从新生SD乳鼠大脑皮质分离和培养神经元,4 d后分为对照组、高糖组(50 mmol/L高糖)、低、中和高浓度组(2.5、5.0、10.0μmol/L芍药苷预处理再加50 mmol/L高糖)。采用细胞增殖活力检测试剂观察细胞活力,用吸光度(A)值表示;检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;通过2',7'-二氢二氯荧光素二乙酸酯荧光探针检测活性氧水平;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;免疫荧光染色测定细胞线粒体膜电位(MMP);Western blot测定Bcl-2、Bax、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase3)蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组A值明显降低(0.452±0.505 vs 0.985±1.010,P<0.01)。与高糖组比较,低浓度组A值无明显变化(P>0.05),中和高浓度组A值增高(0.648±0.714和0.782±0.805 vs 0.452±0.505,P<0.05,P<0.01);SOD、CAT活性增加,活性氧水平降低,MMP表达增加;凋亡细胞减少;且中和高浓度组Bcl-2蛋白(0.506±0.601和0.742±0.803 vs 0.107±0.137)表达显著增加、Bax(0.748±0.659和0.411±0.355 vs 1.488±1.359)、cleaved-Caspase3(1.274±1.438和1.036±0.853 vs 2.137±2.601)蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论芍药苷能够抑制高糖诱导的乳鼠皮质神经元细胞氧化应激反应及凋亡,其作用可能与调节凋亡相关蛋白有关。

结核性脑膜炎实验室诊断方法研究进展

结核性脑膜炎（TBM）是结核杆菌引起的脑膜非化脓性炎性疾病。在结核杆菌感染疾病中,TBM表现形式最严重,死亡率、致残率均较高,其预后与及时有效的治疗密切相关。但由于TBM早期临床表现缺乏特异性,易被误诊从而延误治疗,所以建立敏感度高、特异性强并适合临床推广的实验室早期诊断方法是有效治疗、改善预后的关键所在。本文将TBM实验室诊断方法的研究进展作一综述如下。

急性缺血性脑卒中静脉溶栓治疗的最新进展

静脉溶栓治疗是急性缺血性脑卒中超早期治疗的首选方法,阿替普酶是目前经美国食品和药品管理局批准的唯一溶栓试剂,溶栓时间窗为0~3小时,有望将时间窗延长至4.5小时,甚至更长。新型溶栓剂包括替奈普酶和去氨普酶,去氨普酶对于大脑中动脉闭塞或血管狭窄程度较重患者的效果较好;替奈普酶比阿替普酶有更好的血管再灌注和改善神经功能作用。随着多模式影像技术的发展和联合治疗方法的探索,希望溶栓治疗能给更多患者带来获益。

血尿酸及其他血清学指标与帕金森病的相关性

目的探讨血尿酸及其他血清学指标与帕金森病(PD)的关系。方法选择54例PD患者为病例组,113例非PD患者为对照组,检测两组血糖、血脂、尿酸、同型半胱氨酸、胱抑素C等血清学指标并进行比较。结果病例组的高密度脂蛋白水平高于对照组,而血糖、甘油三酯、尿酸值均低于对照组(P<0.05)。将差异有统计学意义的血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白和尿酸以四分位间距原则分为四个水平,对不同水平进行多因素Logistic回归分析,结果发现不同尿酸水平与PD有关,低水平尿酸是PD的危险因素,高水平尿酸是其保护因素(OR=0.611,95%CI=0.428~0.871)。结论低水平尿酸是PD的危险因素和生物标志物,但尿酸与PD患者的性别、病程无关。

CNS表面含铁血黄素沉积症的临床及CSF细胞学特点(附2例报告)

目的探讨CNS表面含铁血黄素沉积症(SSCNS)的临床和CSF细胞学特点。方法回顾性分析2例SSCNS患者的临床资料。结果本组2例患者均为慢性病程,进行性加重,均有听力下降,双侧病理征(+),例2有左侧肢体共济失调,Romberg征(+)。增强头颅MRI示T2WI/Flair脑表面均见弥漫,线状低信号影覆盖伴线性强化。CSF细胞学检查均有异常,均发现红细胞吞噬细胞及含铁血黄素吞噬细胞。结论SSCNS临床表现为感音性耳聋、锥体束征及小脑性共济失调等。头颅MRI在T2WI上有特征性改变。CSF细胞学检查可见红细胞吞噬细胞及含铁血黄素吞噬细胞。

延髓背外侧综合征的临床特征与影像学分析

目的通过延髓背外侧综合征(LMS)的临床及影像学特征,探讨其病因及发病机制。方法回顾性分析17例临床诊断为延髓背外侧综合征患者的临床资料。结果本组患者均急性或亚急性起病,以眩晕、恶心、呕吐为最常见主诉,查体多见水平眼震、感觉障碍和共济失调,MRI检查有助于明确责任病灶及可能的病因。结论典型的LMS临床少见,大部分表现为部分性或不典型的LMS,其诊断主要依据临床特征及MRI表现,大部分预后较好,少数合并大面积小脑梗死或累及呼吸、循环中枢者预后差。

双侧甲状腺切除加双侧颈部淋巴结清扫术后引发吉兰-巴雷综合征一例报告并文献复习

双侧甲状腺切除加双侧颈部淋巴结清扫术后并发吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)的病例在临床上较为少见,且GBS发病早期易被漏诊。本文报道了1例甲状腺癌伴甲状旁腺腺瘤患者,行双侧甲状腺切除加双侧颈部淋巴结清扫术后并发GBS的临床诊治经过,并复习相关文献。提示外科手术可以为GBS的诱因,临床医生应警惕术后GBS的发生,避免漏诊和误诊。

丁苯酞干预APP/PS1转基因小鼠(阿尔茨海默病模型)的认知功能

背景:β淀粉样蛋白被认为是阿尔茨海默病发病的关键因素,抗脑缺血药物丁苯酞(NBP)是治疗血管性痴呆的一种关键药物。目的:分析丁苯酞治疗APP/PS1转基因小鼠是否参与STEP-ERK-CREB信号通路的机制。方法:SPF级雄性APP/PS1转基因小鼠(阿尔茨海默病模型小鼠)30只,12月龄,购自北京华阜康生物科技股份有限公司;SPF级C57BL/6野生型小鼠10只,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。动物分4组,每组10只:C57BL/6野生型小鼠组;APP/PS1组;丁苯酞10 mg/kg组和30 mg/kg组(分别每日灌胃丁苯酞10 mg/kg和丁苯酞30 mg/kg);野生型小鼠组和APP/PS1组小鼠每日灌胃等量植物油。连续灌胃17 d,第9-16天进行行为学实验,在水迷宫训练前40 min给予丁苯酞;第17天处死小鼠,Western-blot检测小鼠皮质STEP61、p ERK1/2、pCREB的蛋白表达。结果与结论:①连续给予10和30 mg/kg丁苯酞药物治疗16 d:可明显改善APP/PS1转基因小鼠Morris水迷宫任务中的空间学习缺陷,减轻其工作记忆障碍;②Western-blot检测显示:丁苯酞部分降低了活化的STEP61蛋白水平,抑制ERK和CREB的磷酸化;③结果说明:丁苯酞对APP/PS1转基因小鼠具有抗β淀粉样蛋白诱导的神经变性和认知功能减退的保护作用,其可能具有治疗阿尔茨海默病的潜力。

经颅超声中缝核显像诊断卒中后抑郁

目的观察经颅超声(TCS)中缝核显像诊断卒中后抑郁(PSD)的价值。方法前瞻性纳入195例疑诊PSD的缺血性脑卒中患者,因声窗条件较差排除21例,将纳入的174例依据临床系统评估及量表评分分为PSD组(n=141)和非PSD组(n=33),比较组间基本资料及临床量表评分差异;根据组间中缝核回声改变情况,分析TCS诊断PSD的效能,评价PSD组患者汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分与中缝核回声分级的相关性。结果组间患者性别、HAMD和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分差异均有统计学意义(P均<0.05)。PSD组中缝核回声异常比例明显高于非PSD组(75.89%vs.9.09%,P<0.01)。根据中缝核回声异常诊断PSD的敏感度、特异度及准确率分别为75.89%、90.91%及78.74%。PSD组患者HAMD评分等级与中缝核回声分级呈负相关(R=-0.58,P<0.01)。结论TCS可定性和半定量评估并辅助诊断PSD。

依达拉奉联合硫酸氢氯吡格雷治疗脑梗死的临床效果

目的探讨依达拉奉联合硫酸氢氯吡格雷治疗脑梗死的临床效果。方法选取2017年1～12月我院神经内科收治的38例脑梗死患者作为研究对象,根据患者入院病历号采用随机数字表法将其分为观察组(20例)和对照组(18例)。对照组患者采用常规治疗,即应用阿司匹林、降脂药、营养神经药;观察组患者采用依达拉奉联合硫酸氢氯吡格雷进行治疗。7 d为1个疗程,治疗2个疗程。比较两组患者的临床治疗总有效率、治疗前后神经功能缺损评分(NIHSS)、生活能力评分(BI)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)水平。结果观察组患者的临床治疗总有效率为90.00%,高于对照组的61.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前的NIHSS、BI评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后的NIHSS评分均低于治疗前,BI评分均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的NIHSS评分低于对照组,BI评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前的SOD、MAD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后的SOD水平均高于治疗前,MAD水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的SOD水平高于对照组,MAD水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉联合硫酸氢氯吡格雷治疗脑梗死患者的效果更好,能够有效恢复患者的神经功能,调节SOD、MAD水平,增强机体抗氧化能力,提高患者的生活能力。

帕金森病非运动症状与血清铁代谢相关蛋白关系的研究

目的研究帕金森病(PD)非运动症状与血清铁代谢相关蛋白之间的关系。方法(1)连续收集2016年9月-2019年5月就诊于大连市中心医院的60例PD患者,同时纳入60例健康对照组,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、PD改良淡漠量表(MAES)、快动眼睡眠行为障碍筛查量表(RBDSQ)、国际不宁腿综合征评定量表(IRLSRS)、阿根廷嗅觉减退评定量表(AHRS)评估PD患者的非运动症状;(2)在停用治疗PD药物10~12 h后于空腹下采集采取4 ml静脉血;(3)采用酶联免疫吸附法检测PD患者及对照组血清铁、铁蛋白、转铁蛋白的水平;(4)对PD不同非运动症状患者血液中上述指标的结果进行对比分析。结果PD组血清中转铁蛋白水平明显高于健康对照组(P<0.05),PD组铁蛋白水平明显低于对照组(P<0.05);PD-抑郁组铁蛋白水平明显低于PD-非抑郁组,PD-淡漠组铁蛋白水平明显低于PD-非淡漠组,PD-RBD组的转铁蛋白水平明显高于PD-NRBD组(P<0.05)。结论外周铁代谢紊乱可能参与了PD非运动症状中快动眼睡眠行为障碍、淡漠及抑郁的发生、发展,铁蛋白、转铁蛋白可能是帕金森病快动眼睡眠行为障碍、淡漠及抑郁发生的外周血指标。

C-TCD与TEE在筛选卵圆孔未闭相关性隐源性卒中中的诊断价值

目的探究经颅多普勒发泡实验(C-TCD)和经食道超声心动图(TEE)在筛查卵圆孔未闭(PFO)相关性隐源性卒中(CS)中的诊断价值。方法收集2018年10月至2019年9月于我院神经内科收治的CS患者105例,均行C-TCD与TEE检查。分析两种方式对PFO的检出情况。结果105例CS患者中,经C-TCD平静呼吸时PFO检出率为35%(阳性37例,阴性68例);经TEE的PFO检出率为42%(阳性44例,阴性61例)。两种方法对PFO的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。C-TCD行Valsalva动作后的PFO检出率为56%(阳性59例,阴性46例),与TEE的检出率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论C-TCD与TEE对PFO均有较高的检出率,Valsalva动作可提高检出率,C-TCD可作为临床工作中筛选PFO的首选方法。

胶原凝胶构建神经组织工程支架的实验研究

目的研究胶原凝胶支架对大鼠BMSCs增殖和分化的影响,探讨其作为神经组织工程支架的可行性。方法利用Ⅰ型胶原制备胶原凝胶支架。采用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs,取第5代细胞制备胶原凝胶-BMSCs复合体。采用扫描电镜、HE染色观察胶原凝胶支架的形态结构及复合培养后细胞形态;MTT检测该支架对BMSCs增殖的影响。取绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性(GFP^+)BMSCs于胶原凝胶支架中培养24 h,通过激光共聚焦显微镜及活细胞工作站观察细胞生长及与材料的黏附情况。结果激光共聚焦显微镜及活细胞工作站观察示,GFP^+BMSCs均匀分布于胶原凝胶支架内,大部分GFP^+BMSCs呈梭形,部分细胞伸出突起,部分细胞间形成连接,提示BMSCs在三维空间中生长良好。扫描电镜示胶原凝胶支架为多孔纤维网状结构,BMSCs可黏附于该支架材料上,细胞形态良好。MTT检测示,BMSCs于胶原凝胶支架中培养后3、5、7 d的吸光度(A)值均高于单纯BMSCs培养,其中5、7 d时组间差异有统计学意义(t=4.472,P=0.011;t=4.819,P=0.009)。HE染色示,胶原凝胶支架呈均质淡粉染细丝样物质。BMSCs在胶原凝胶内培养24 h后均匀分布其中;7 d时BMSCs形态多样,部分细胞伸出细长突起,具有体外培养的神经元样形态。结论胶原凝胶支架制备简便,具有良好的生物相容性,可作为神经组织工程支架材料。

小鼠神经胶质瘤单次高剂量放射治疗脑损伤评估

目的神经胶质瘤是最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,对现有治疗方法反应不佳,预后差。本研究探讨单次高剂量放疗对神经胶质瘤的疗效和对神经组织的损伤情况。方法 12只健康重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠按随机数表法分为9L胶质母细胞瘤模型组(n=6)和颅窗模型组(n=6),均接受单次高剂量放疗(60Gy)。利用MR监测肿瘤生长及放疗引起的脑组织结构改变,通过钙指示剂和双光子显微镜观察放疗前后小鼠清醒状态下的神经活动,采用免疫荧光染色及HE染色明确放疗后脑组织病理学改变。结果小鼠颅内9L胶质瘤于T2加权像(T2weighted image,T2WI)和增强T1加权像(T1weighted image,T1WI)上呈现高信号。放疗后1周,MR示胶质瘤体积显著缩小,2周后肿瘤不再显影。6周后,T2WI及增强T1WI均未见脑实质内异常信号,放疗侧和对侧脑组织T2WI信号强度分别为0.933±0.057和0.870±0.078,差异无统计学意义,t=1.333,P=0.240;放疗侧和对侧脑组织T1WI-Gd增强成像信号强度分别为1.113±0.108和1.217±0.072,差异无统计学意义,t=1.735,P=0.143。但放疗侧脑室(0.367±0.027)较对侧(0.937±0.043)缩小,差异有统计学意义,t=24.680,P<0.001。双光子显微镜下发现,放疗前及放疗后6周照射脑区的神经元均具有神经活动。HE染色未见脑组织形态学改变。免疫荧光染色显示,双侧皮层神经元形态正常,放疗侧和健侧神经元数目分别为199.3±11.860和197.7±9.374,差异无统计学意义,t=0.387,P=0.715;但放疗侧活化的星胶质细胞数(43.33±9.245)高于对侧(10.00±1.673),差异有统计学意义,t=8.537,P<0.001。结论单次高剂量放疗可根治小鼠神经胶质母细胞瘤,肿瘤根除后4周出现星形胶质细胞增生及脑室缩小等放射性损伤,在此前具有较长的干预时间窗以阻止神经损伤的进程。

胶原支架在骨髓间充质干细胞治疗中枢神经系统疾病中的应用

骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)已被证明能够改善中枢神经系统疾病的预后,但单独移植的BMSCs很难在损伤部位长期存活并分化为神经细胞。新近研究发现,胶原支架能够促进BMSCs的增殖、存活与分化,进而增强其修复缺损组织、重建神经功能的作用。现就BMSCs治疗中枢神经系统疾病的研究现状、胶原支架的应用和改性方式及其复合BMSCs治疗中枢神经系统疾病的研究进展进行综述。

阿托伐他汀钙联合依达拉奉对脑梗死患者血清脑源性神经生长因子、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子水平影响研究

目的探讨阿托伐他汀钙联合依达拉奉对脑梗死患者血清脑源性神经生长因子、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子水平影响。方法收集大连市中心医院以脑梗死收住院患者78例,分为试验组和对照组。两组患者均予对症治疗和阿托伐他汀;试验组在此基础上加用依达拉奉。于两组患者治疗前、治疗第7天、第14天各进行1次血清BDNF、VEGF、MMP-9及TNF水平测定,对两组患者治疗前及治疗后两周进行NIHSS评分及ADL,判断疗效。结果(1)治疗后两组患者血清BDNF呈现持续上升趋势,VEGF、MMP-9及TNF-α水平均出现第7天上升、第14天下降,与对照组比较,试验组上升及下降均更为明显,差异均有统计学意义(均P<0.05);(2)治疗后两组患者NIHSS评分均下降、ADL评分均上升,与对照组相比,试验组NIHSS评分指标[(4.96±1.18)分比(6.44±1.57)分],ADL评分[(71.74±14.26)分比(64.45±13.78)分]均改善更显著,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阿托伐他汀钙联合依达拉奉可更显著改善脑梗死患者血清BDNF、VEGF、MMP-9及TNF-α水平,对脑梗死的治疗、预后改善及提高患者生活质量有重要意义。

阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中的疗效及神经功能缺损与时间窗的关系研究

目的:探讨阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中的疗效及神经功能缺损与时间窗的关系。方法:选取大连医科大学附属大连市中心医院于2016年3月~2018年10月间收治的急性缺血性卒中患者117例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=58,阿替普酶治疗)和研究组(n=59,阿替普酶联合依达拉奉治疗),比较两组患者临床疗效、神经功能缺损情况、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白介素-6(IL-6)水平、头颅CT梗死面积,观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果:研究组的总有效率为84.75%(50/59),高于对照组的63.79%(37/58)(P<0.05)。两组患者治疗2周后MMP-9、IL-6、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均较治疗前降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。研究组治疗24h、48h、72h的头颅CT梗死面积小于对照组(P<0.05)。治疗后研究组发病72h内、发病48h内患者NIHSS评分、头颅CT梗死面积高于发病24h内,且发病72h内高于发病48h内(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较无差异(P>0.05)。结论:阿替普酶联合依达拉奉治疗急性缺血性卒中,疗效确切,可有效改善患者过氧化损伤,降低细胞因子水平,且越早的时间窗内接受治疗的患者,其神经功能缺损、脑梗死面积改善效果越好。