耐核苷(酸)类药物慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清HBV基因型和P区耐药突变位点分析

目的了解慢性乙型肝炎和肝硬化患者HBV基因型分布和P区耐药突变位点的变异模式。方法选择39例经核苷(酸)类似物(NAs)治疗后存在耐药或疑似耐药的慢性乙型肝炎和肝硬化患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR法测定血清HBV DNA,将PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,鉴定和回收纯化后,交由上海生工生物工程(北京)有限公司进行测序,与HBVseq数据库比对,观察HBV基因型分布和耐药位点变化情况。结果 34例(87.2%)患者能检出HBV基因型,其中C基因型有32例(82.1%),B基因型有2例(5.1%);27例(69.2%)患者存在RT区序列突变,其中点变异12例(30.8%),rt M204I/V/S、rt A181V/T、rt I169T突变分别占15.4%、5.1%、10.3%,组合变异15例(38.4%);23例患者存在对NAs耐药,其中8例患者对阿德福韦酯耐药(1例为B基因型,7例为C基因型),耐药位点为rt A181V/T/S、rt V214A/E和rt N236T;11例患者对拉米夫定和替比夫定同时耐药,均为C基因型,其共同耐药位点为rt M204I/V/S和rt L180M;3例患者存在对LAM、LDT和恩替卡韦同时耐药,均为C基因型;1例C基因型患者对LAM、LDT和ADV同时耐药,其变异模式为rt M204I/V/S+rt A181V/T/S+rt L180M。结论多数对NAs耐药患者可在HBV P区检出基因突变,且突变形式多样,其中以rt M204I/V/S突变为主,不同核苷(酸)类似物中存在共同耐药位点。

CA/PEI亲和膜去除肝硬化腹水中内毒素的研究

目的观察CA/PEI亲和膜对肝硬化腹水中内毒素的去除效果。方法以醋酸纤维素(CA)为亲和基质,交联聚乙烯基亚胺(PEI),制备CA/PEI亲和膜;采用动态吸附法,比较吸附前后肝硬化患者腹水中内毒素、白蛋白、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及离子(K+、Na+、Cl-)浓度的变化。结果CA/PEI亲和膜吸附后腹水中的内毒素浓度显著降低(P<0.01);腹水中的白蛋白、免疫球蛋白、电解质浓度过膜前后无明显变化。结论CA/PEI亲和膜能有效吸附肝硬化腹水中的内毒素,对腹水中的白蛋白、免疫球蛋白、电解质无明显截留,可应用于肝硬化自体腹水回输的治疗。