骨髓间充质干细胞源外泌体保护顺铂相关急性肾损伤作用及机制研究

目的:探索骨髓间充质干细胞源外泌体(BMSC-exos)保护顺铂(CDDP)诱导急性肾损伤(AKI)作用及机制。方法:48只C57BL/6小鼠随机分4组:对照(CN)组、顺铂诱导AKI模型(CDDP)组、CDDP+BMSC-exos(CDDP+EXO)组、CDDP+BMSC-exos+PI3K抑制剂(LY294002)(CDDP+EXO+LY294002)组。分别腹腔、尾静脉注射生理盐水、顺铂、顺铂+BMSC-exos及顺铂+BMSC-exos+LY294002。留取血液测肌酐(SCr)和尿素氮(BUN);取肾组织进行病理分析;TUNEL观察肾小管上皮细胞(RTEC)凋亡;免疫组化染色检测活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP-78)、半胱氨酸蛋白酶12(caspase-12)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达定位;Western Blot法测定Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12、CHOP、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达。结果:在CDDP诱导AKI模型中,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显增多(P<0.05),免疫组化免疫Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著增加(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著上调(P<0.05),p-AKT表达水平显著下调(P<0.05)。经BMSC-exos治疗,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显减少(P<0.05),免疫组化染色Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著减少(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著下调(P<0.05),p-AKT表达水平显著上调(P<0.05)。BMSC-exos治疗前应用LY294002治疗,肾组织TUNEL阳性细胞数目明显增多(P<0.05),免疫组化免疫Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12和CHOP阳性面积显著增加(P<0.05),Western Blot法证实,Cleaved caspase-3、GRP-78、caspase-12及CHOP表达水平显著上调(P<0.05),p-AKT表达水平显著下调(P<0.05)。结论:BMSC-exos保护CDDP-AKI作用机制可能是通过抑制内质网应激及激活PI3K/AKT信号通路。

不同分期非透析慢性肾脏病患者自主神经功能变化及其影响因素分析

目的探讨不同分期非透析慢性肾脏病(CKD)患者自主神经功能变化及其影响因素。方法选取2014—2019年于大连医科大学附属第一医院住院治疗并进行动态心电图检查的非透析CKD患者236例为研究对象,根据CKD分期将研究对象分为CKD1~5期组(各49、51、58、40、38例)。比较不同分期患者心率变异性(HRV)时域分析指标[24 h正常R-R间期的标准差(SDNN)、24 h内每5 min R-R间期平均值的标准差(SDANN)、24 h全程相邻R-R间期之差的均方根]、频域分析指标[低频功率(LF)、高频功率(HF)、LF/HF]水平及HRV下降情况;分析各临床指标与HRV的相关性;分析引起非透析CKD患者HRV下降的独立危险因素。结果CKD5期组患者SDNN水平明显低于CKD1~3期组患者,CKD1期组患者SDNN水平明显高于CKD3~4期组患者,CKD5期组患者SDANN水平明显低于CKD1~2期组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CKD5期组患者LF水平明显低于CKD1~2期组患者,LF/HF明显低于CKD1~4期组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CKD1~5期HRV下降患者所占比例分别为14.3%、37.3%、39.7%、60.0%、71.1%,差异有统计学意义(P<0.001)。SDNN与年龄、收缩压、24 h尿蛋白定量、甲状旁腺激素、磷、钾、同型半胱氨酸水平呈负相关(P<0.05),与预估肾小球滤过率(eGFR)、清蛋白、血红蛋白、钙、高密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄增长、合并糖尿病、eGFR下降是非透析CKD患者HRV下降的独立危险因素(P<0.05)。结论非透析CKD患者自主神经功能紊乱以交感神经活性增强为主,且随着疾病进展,自主神经功能紊乱发生率逐渐升高;临床应根据危险因素积极采取干预措施,以预防因自主神经功能紊乱导致的不良心血管事件。

黄葵胶囊治疗IgA肾病、糖尿病肾病及膜性肾病疗效比较

目的:评估黄葵胶囊治疗IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病的疗效差异。方法:基于多中心、前瞻性、单臂、开放式队列研究(NCT02231138)数据进行二次分析,倾向性评分匹配平衡基线差异后,比较IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病临床疗效。以尿蛋白下降率≥30%定义为治疗有效,尿蛋白下降率<30%定义为无效,分析影响黄葵胶囊降低尿蛋白的危险因素。结果:共纳入964例患者,其中IgA肾病患者745例,膜性肾病患者96例,糖尿病肾病患者123例。IgA肾病、膜性肾病和糖尿病肾病组黄葵胶囊治疗后尿蛋白水平均较基线显著降低,但6个月尿蛋白降低率和有效率3组间无明显差别;基线尿蛋白、体重指数、血肌酐和血清白蛋白是黄葵胶囊降低尿蛋白的独立危险因素,尿蛋白每增加100 mg,尿蛋白降低率增加3.6%;血清白蛋白每增加1 g/L,尿蛋白降低率增加5.9%;而血肌酐每增加1μmmol/L,尿蛋白降低率减少0.7%,体重指数每升高1 kg/m^(2),尿蛋白降低率减少6.7%。结论:黄葵胶囊治疗6个月,降低IgA肾病、膜性肾病和糖尿病肾病尿蛋白的疗效无明显差别;合理选择黄葵胶囊为治疗慢性肾脏病患者提供了参考。

中心静脉导管血栓的防治

我国成人慢性肾脏病(CKD)患病率为10.8%,终末期肾病(ESKD)患者约200余万人,血液透析(HD)是治疗ESKD最主要的肾脏替代治疗方式之一。中心静脉导管(CVC)是维持性血液透析(MHD)患者常用的血管通路,包括无隧道和涤纶套的透析导管(NCC),带隧道和涤纶套的透析导管(TCC)。导管相关血栓形成(CRT)是CVC留置过程中最为常见、危害性较大的主要并发症之一,与患者基础疾病、CVC材质及特性及术中操作等因素有关。CRT临床表现CRT是指CVC置管后,导管内或导管外鞘形成血凝块,引发导管功能障碍、机体出现血栓栓塞相关症状或体征。

重组人红细胞生成素每周1次给药法治疗肾性贫血

目的对比观察重组人红细胞生成素(益比奥)1万IU每周1次及3000IU每周3次皮下注射的疗效。方法将尿毒症合并肾性贫血26例患者(包括腹透、血透、保守治疗)分两组,益比奥1万IU试验组10例,3000IU对照组16例,观察治疗前、后贫血症状、血常规及其他生化指标变化。结果两组治疗有效率分别为90%,94%,无明显差异,均未发现明显副作用,血小板、白细胞、血脂及肝、肾功能治疗前后无明显变化。结论大剂量益比奥每周1次治疗肾性贫血安全有效。

组合型人工肾治疗老年维持性血液透析患者皮肤瘙痒的疗效

目的探讨组合型人工肾(血液灌流联合血液透析)对治疗老年维持性血液透析患者皮肤瘙痒临床疗效的评价。方法 54例老年维持性血液透析患者随机分为组合型人工肾治疗组30例和对照组24例(血液透析治疗),共治疗8 w,比较两组患者治疗后皮肤瘙痒缓解率及治疗前后血清β2-微球蛋白(β2-MG)、甲状旁腺激素(PTH)、血磷、血钙、血肌酐、血白蛋白的变化。结果治疗8 w后组合型人工肾治疗组总的皮肤瘙痒缓解率为73.3%(22/30),显著高于对照组〔20.8%(5/24),P<0.01〕;治疗8 w后组合型人工肾治疗组血清β2-MG、PTH水平明显低于对照组(P<0.05),而血磷、血钙、血肌酐、血白蛋白水平无显著差异(P>0.05);组合型人工肾治疗组血清β2-MG、PTH水平较治疗前明显下降(P<0.05),而在对照组中其治疗前后无显著变化(P>0.05)。结论组合型人工肾可以有效地清除血浆中β2-MG、PTH等中大分子毒素,是治疗老年维持性血液透析患者皮肤瘙痒的一种有效方法。

阿法骨化醇对大剂量糖皮质激素治疗肾小球疾病所致的骨质疏松的影响

目的:观察阿法骨化醇联合钙剂对肾脏病患者发生糖皮质激素性骨质疏松的预防作用。方法:28例病人随机分为治疗组16例,阿法骨化醇1μg日一次口服和碳酸钙750 mg日三次口服;对照组12例,碳酸钙750 mg日三次口服。治疗前及以后每3个月检查血清白蛋白、钙、磷、24小时尿蛋白定量、甲状旁腺素,腰椎和股骨颈骨密度,观察6个月。结果:两组患者腰椎和股骨颈骨密度均呈下降趋势,治疗6个月时,治疗组骨密度高于对照组(腰椎0.967±0.105,0.896±0.131,P<0.05;股骨颈1.078±0.124,0.925±0.107,P<0.05),对照组骨密度较治疗前明显下降。结论:阿法骨化醇合用钙剂对预防慢性肾脏病患者发生糖皮质激素性骨质疏松是安全有效的药物。

血清Cystatin C评价慢性肾脏病患者肾小球滤过功能的对照研究

目的:通过比较血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin C)与临床常用的测定肾小球滤过率(GFR)的方法,评估Cystatin C检测肾小球滤过功能的价值。方法:选取我科住院确诊的慢性肾脏病(CKD)病人196例,测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和血清Cystatin C,并分别利用MDRD方程、Cockcroft-Gault方程计算GFR,比较各种方法与99mTc-DTPA测得GFR之间的相关性,应用受试者工作特征曲线下面积(AUCROC)比较各种方法的准确性。结果:血清Cystatin C与GFR呈明显负相关(P<0.01)较CG方程计算值及Scr、BUN相关性好。MDRD方程、血清CystatinC及Cockcroft-Gault方程的受试者AUCROC分别为0.98、0.94、0.92,与Scr、BUN有统计学差异(P<0.01)。结论:血清Cystatin C是反映肾小球滤过功能比较敏感的指标,尤其在评价早期肾功能损害时的意义更大。

促纤溶治疗对IgA肾病患者肾脏保护的回顾性队列研究

目的:观察尿激酶或纤溶酶冲击治疗对IgA肾病患者的肾脏保护作用。方法:对84例IgA肾病患者资料进行回顾性分析,并根据是否使用促纤溶药物及使用药物的种类将患者分为对照组(n=23)、尿激酶组(n=32)和纤溶酶组(n=29),比较分析治疗6个月、1年3组患者的24 h尿蛋白定量、血生化、肾小球滤过率、凝血像。结果:3组患者24 h尿蛋白定量在治疗6个月和1年均较治疗前有统计学差异(P<0.01);组间比较:尿激酶组在治疗6个月及治疗1年时较对照组有统计学差异(P<0.01);纤溶酶组和对照组在治疗1年时有统计学差异(P<0.05)。在治疗1年时,尿激酶组肾小球滤过率改善,较对照组有统计学差异(P<0.05)。结论:在中重度IgA肾病患者,促纤溶治疗有独立于激素和免疫抑制剂之外的减少蛋白尿和肾脏保护作用。

原发性肾病综合征患者足细胞中糖皮质激素受体α和β的表达与激素敏感性的相关分析

目的探讨原发性肾病综合征患者足细胞中糖皮质激素受体(GR)α和β的表达与激素敏感性的相关性。方法 62例原发性肾病综合征患者进行常规肾活检,应用电镜观察足细胞形态,免疫组化检测足细胞计数的标志物WT-1和足细胞中糖皮质激素受体(GR)α及β的表达,同时选取因肾癌行肾切除的10例患者的肾脏病理切片作为对照组。足量激素治疗4周后,根据蛋白尿减少的程度分为激素敏感组(n=30)和激素不敏感组(n=32),分析糖皮质激素受体(GR)α及β的表达与激素敏感性的相关性。结果激素不敏感组单个肾小球足细胞计数较激素敏感组显著减少(P<0.05),且电镜下足细胞损伤较重。激素不敏感组的GRα阳性的足细胞计数和足细胞上GRα/β比例较激素敏感组显著降低,GRβ阳性的足细胞计数较激素敏感组显著增加(P<0.05)。GRα、GRβ阳性的足细胞计数及GRα/β比例的ROC曲线下面积分别为0.549、0.612和0.741,在GRα/βROC曲线上选择兼顾敏感性和特异性的最佳cutoff值为4.8。结论原发性肾病综合征患者足细胞损伤程度有助于预测激素的敏感性,足细胞中GRα/β比例低于4.8提示激素不敏感。

慢性肾脏病患者的人文关怀

慢性肾脏病发病率越来越高,由于其治疗时间长、病情反复的特点,很多患者存在生理、心理障碍。以患者为中心的人文关怀不但可以提高患者对治疗方案的信心,坚持配合治疗方案;而且可以促进医患关系的和谐发展;并提高医院的竞争力。医护人员对慢性肾脏病患者的人文关怀要注意提高自身素质、加强沟通交流、重视患者健康教育,发动社会资源,才能切实、有效地开展工作。

阿魏酸钠对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的观察阿魏酸钠对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法通过流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡,反转录PCR及免疫组化法分别检测bax、bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果 (1)25、50、100μmol/L顺铂组的各组间凋亡率比较有差异(P<0.05)。50μmol/L顺铂在4、8、12、24 h,组间凋亡率比较有差异(P<0.05);(2)50μmol/L顺铂作用24 h,其凋亡率均较空白对照组显著升高(P<0.05);而加入4种浓度的阿魏酸钠组的凋亡率显著低于50μmol/L顺铂组,其中流式细胞仪结果显示1 000μmol/L阿魏酸钠组的凋亡率降低最显著(P<0.05);(3)50μmol/L顺铂作用24 h,bax的mRNA及蛋白的表达上升(P<0.05),而bcl-2的mRNA和蛋白表达水平未见明显变化;而不同浓度的阿魏酸钠组的bax的mRNA与蛋白表达较顺铂组的表达下降,而bcl-2的mRNA和蛋白的表达上升(P<0.05)。结论顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡具有时间和剂量依赖性,阿魏酸钠可通过上调bcl-2以及下调bax的表达来抑制顺铂诱导的细胞凋亡,从而减少顺铂的肾毒性。

阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的间充质转化

目的:探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程的影响。方法:利用转化生长因子β1(TGF-β1)建立肾小管上皮HK-2细胞EMT的模型,应用RNAi技术沉默HK-2细胞的α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,光镜下观察FUT8基因沉默后细胞形态变化,免疫印迹及免疫细胞化学方法测定细胞表型标记物蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)的表达变化,流式细胞仪测定细胞凋亡。结果:TGF-β1孵育48 h后,HK-2细胞失去原有的上皮细胞形态,呈现纤维细胞形态,纤维细胞表型标记蛋白α-SMA、FSP-1及N-cad-herin表达明显升高,而上皮细胞表型标记蛋白E-cadherin表达明显下降,同时伴有FUT8基因表达上调,细胞凋亡增加,而提前转染FUT8 siRNA能明显减弱上述这些反应。结论:FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK-2细胞的EMT过程;阻断核心岩藻糖基化修饰,能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程。

组合型人工肾改善维持性血液透析患者失眠的疗效

目的:探讨组合型人工肾对改善维持性血液透析(MHD)患者失眠疗效的分析。方法:选取我院MHD失眠患者48例,随机分为组合型人工肾治疗组(血液透析联合血液灌流)和对照组(血液透析治疗),每组24例,共治疗12周,比较两组治疗前及治疗后失眠评分及缓解率、睡眠质量评分、生存质量评分及对血清β2-MG、PTH、hs-CRP等变化。结果 :治疗12周后,组合型人工肾治疗组失眠缓解率(58.3%)明确高于对照组(25.0%),失眠评分及睡眠质量评分明确低于对照组,组合型人工肾治疗组生存质量评分明显高于对照组,两组比较具有显著的统计学差异(P<0.01);同时组合型人工肾治疗12周后血清PTH、β2-MG、hsCRP水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:组合型人工肾可以有效清除血清中PTH、β2-MG、hs-CRP等中大分子毒素及炎症因子,并明显改善MHD患者失眠状况,提高患者睡眠质量及生存质量。

序贯性血液净化治疗毒蕈中毒致急性肾功能衰竭的疗效观察

目的 观察序贯性血液净化治疗毒蕈中毒致急性肾功能衰竭的临床疗效。方法 16例毒蕈中毒致急性肾功能衰竭患者 ,9例序贯性血液净化治疗 ,即先血液灌流 (HP) 2h ,后血液透析 (HD) 2～ 4h ;7例患者血液透析。结果 两组患者在治疗前及第 1次治疗后毒素、酶学水平、血小板无显著性差异 ;第 2次治疗后 ,HP +HD组的肌酐、谷草转氨酶、血小板低于HD组 ;第 3次治疗后 ,HP +HD组的毒素、酶学水平、血小板数均低于HD组。HP +HD组的肾功好转时间短于HD组 ,分别为 (9.6 7± 3.16 )d、(17.4 3± 3.74 )d ,P <0 .0 1。结论 序贯性血液净化治疗较单纯血液透析疗程短 ,恢复快 ,预后好。

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏岩藻糖基转移酶8的表达变化

目的:探讨岩藻糖基转移酶8(FUT8)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏中表达及意义。方法:90只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(control组)、假手术组(sham组)和UUO组,分别在术后1 d、3 d、7d、14 d和21 d处死,检测各组大鼠肾功能情况;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态学改变;RT-PCR和Western blotting检测各组大鼠肾组织不同时点FUT8 mRNA及蛋白的表达;免疫荧光检测大鼠肾组织不同时点FUT8和活化素受体样激酶5(ALK5)的分布以及表达;免疫组化检测大鼠肾脏纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(ColI)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果:与control组相比,UUO组大鼠血肌酐及尿素氮于术后3 d开始升高(P<0.05),第21 d升至最高(P<0.01);UUO3 d开始肾间质可见明显炎症细胞浸润,14 d出现明显肾小管萎缩,21 d可见明显肾间质纤维化。FUT8的mRNA表达与蛋白水平表达于术后3 d出现上升并随梗阻时间延长逐渐增加(P<0.05),分别于14 d及21 d达到最高峰(P<0.01);ALK5在肾小管的表达与FUT8一致,呈正相关(r=0.87,P<0.05),且两者分布一致,共表达区域随着肾纤维化进展逐渐增加。FN、Col I和α-SMA表达于术后第3 d出现上升并随梗阻时间延长逐渐增加(P<0.05),且与FUT8呈正相关(r=0.80,r=0.76,r=0.89,P<0.05)。结论:在肾间质纤维化的进展中,FUT8与ALK5表达呈时空一致性升高,可能与肾间质纤维化程度密切相关。

慢性肾脏病患者铁缺乏及铁代谢

慢性肾脏病患者常伴有不同程度的铁缺乏和铁代谢紊乱,铁调素、炎症、红细胞生成素、低氧诱导因子等参与上述过程。临床上将铁缺乏分为绝对性铁缺乏和功能性铁缺乏,铁调素、铁蛋白、转铁蛋白饱和度是评价和鉴别铁缺乏有效的指标。临床上合理选择和补充铁剂、降低铁调素水平、改善铁代谢紊乱对治疗慢性肾脏病铁缺乏非常重要。

单用他克莫司和联合五酯胶囊治疗免疫性肾小球疾病的单中心回顾性研究

对单用他克莫司和联合五酯胶囊治疗免疫性肾小球疾病疗效、安全性和药物-经济效益进行比较。回顾性分析大连医科大学附属第一医院2011年1月~2015年12月行肾活检证实为免疫性肾小球疾病并伴大量蛋白尿的患者60例,分为单用他克莫司组和联合五酯胶囊组。主要评价指标:蛋白尿缓解率、各个时间点蛋白尿缓解率等;次要评价指标:药物副作用、治疗费用及药物-经济学效益。随访第3个月、6个月,他克莫司联合五酯胶囊组蛋白尿缓解人数高于单用他克莫司组(P<0.05),两组副作用无差异(P<0.05),而治疗费用及成本-疗效比有统计学差异(P<0.05);他克莫司联合五酯胶囊可有效降低免疫性肾小球疾病蛋白尿,且具有较好药物经济学效益。

红细胞生成素治疗慢性肾脏病贫血的研究进展

内源性红细胞生成素缺乏是慢性肾脏病贫血的主要原因。重组人红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)是治疗慢性肾脏病贫血最为有效的药物,新一代长效红细胞生成素(erythropoietin,EPO)由于半衰期更长,稳定性高,临床更具有优势,由EPO治疗低反应性而高剂量EPO应用增加了患者的死亡风险。EPO主要受低氧诱导因子的调节,新近出现的低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(FG-4592)为治疗肾性贫血提供了新的途径。