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亚硝酸盐对东北酸菜细菌菌群丰度及理化指标的影响 被引量:1
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作者 张庆芳 魏振勇 +4 位作者 于爽 王严 周姝静 迟乃玉 刘春莹 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第3期67-77,共11页
为探究亚硝酸盐对东北酸菜发酵过程中优势细菌属及理化指标的动态变化,设计自然发酵体系(S)和添加亚硝酸盐发酵体系(YS),监测发酵过程中东北酸菜理化指标及OD600nm值的变化,采用16S rDNA技术对理化指标变化明显时期的酸菜样本进行细菌... 为探究亚硝酸盐对东北酸菜发酵过程中优势细菌属及理化指标的动态变化,设计自然发酵体系(S)和添加亚硝酸盐发酵体系(YS),监测发酵过程中东北酸菜理化指标及OD600nm值的变化,采用16S rDNA技术对理化指标变化明显时期的酸菜样本进行细菌属组成分析。结果表明,东北酸菜中的uncultured_bacterium_f_Enterobacteriaceae、Serratia等有害菌属大量繁殖,导致亚硝酸盐大量积累,而积累的亚硝酸盐对uncultured_bacterium_f_Enterobacteriaceae、Serratia和Enterococcus等有害菌的生长繁殖又起到抑制作用,其中对Serratia的抑制作用最强;乳酸菌能够降解亚硝酸盐,但亚硝酸盐对Lactococcus与Leuconostoc的生长代谢具有促进作用,对Lactobacillus具有抑制作用,随着亚硝酸盐被大量降解,其对Lactobacillus的抑制作用会解除。亚硝酸盐通过影响菌属结构及丰度,进而影响发酵体系的理化指标及OD600nm值的变化。 展开更多
关键词 东北酸菜 亚硝酸盐 高通量测序 菌群结构
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东北酸菜发酵过程中细菌菌群与亚硝酸盐长消变化关系
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作者 张庆芳 袁文涛 +4 位作者 孙溪 魏振勇 周姝静 迟乃玉 于爽 《中国调味品》 CAS 北大核心 2024年第6期50-63,共14页
为探究东北酸菜发酵过程中细菌菌群与亚硝酸盐长消变化关系,实验设立了两种封闭发酵系统,即未添加亚硝酸盐(自然发酵组)、添加亚硝酸盐(对照组),结合主要理化指标(亚硝酸盐、pH值等)对两个系统内不同发酵阶段的酸菜发酵液(相对丰度排名... 为探究东北酸菜发酵过程中细菌菌群与亚硝酸盐长消变化关系,实验设立了两种封闭发酵系统,即未添加亚硝酸盐(自然发酵组)、添加亚硝酸盐(对照组),结合主要理化指标(亚硝酸盐、pH值等)对两个系统内不同发酵阶段的酸菜发酵液(相对丰度排名前30)中的菌属进行比对分析。实验研究了不同发酵阶段有、无添加亚硝酸盐样品的菌群变化,结果表明,添加亚硝酸盐对整个发酵周期中细菌的生长都具有影响,亚硝酸盐使优势乳酸菌菌属(Lactococcus、Leuconostoc、Lactobacillus)、α-变形菌菌属(Allorhizobium-Neorhizobium-Pararhizobium-Rhizobium、Aureimonas、Brevundimonas、Methylobacterium、Sphingomonas)、β-变形菌菌属(Acidovorax、Aquabacterium、Comamonas、Delftia、Herbaspirillum、Methylophilus、Methylovorus)、CFB类菌属(Dyadobacter、Pedobacter、Sphingobacterium)和未培养菌属(Brassica_napus_rape、uncultured_bacterium_f_Chitinophagaceae、uncultured_bacterium_f_env.OPS_17、uncultured_bacterium_o_Chloroplast)在发酵初期相对丰度增加;使致病菌菌属(Acinetobacter、Alkanindiges、Chryseobacterium、Enterococcus、Serratia、uncultured_bacterium_f_Burkholderiaceae、uncultured_bacterium_f_Enterobacteriaceae、uncultured_bacterium_f_Xanthobacteraceae)相对丰度始终处于低水平状态。在S系统内,发酵前期为亚硝酸盐积累阶段,此时Lactococcus、Leuconostoc为优势乳酸菌菌属,而达到发酵中后期时Lactobacillus成为绝对优势乳酸菌菌属;在发酵初期,Acinetobacter、Enterococcus、Serratia、uncultured_bacterium_f_Enterobacteriaceae等致病菌大量繁殖,导致亚硝酸盐大量积累,而积累的亚硝酸盐使这些致病菌的相对丰度始终处于低水平状态,其中对Serratia的生长影响最显著。 展开更多
关键词 东北酸菜 亚硝酸盐 细菌菌群 优势乳酸菌 致病菌
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日粮不同能量和蛋白质水平对生长期牦牛瘤胃发酵参数及瘤胃菌群的影响
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作者 姜南 李学威 +4 位作者 张楠 李锐 朱红娇 洛桑顿珠 巴桑旺堆 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第2期18-26,共9页
为研究日粮不同能量和蛋白质水平对生长期牦牛瘤胃发酵参数及瘤胃菌群的影响,选取体重、体况相近且健康的1.5周岁娘亚牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按不同综合净能(7.63、8.25、8.88 MJ/kg)和蛋白质(10.84%、12.82%)水平随机分... 为研究日粮不同能量和蛋白质水平对生长期牦牛瘤胃发酵参数及瘤胃菌群的影响,选取体重、体况相近且健康的1.5周岁娘亚牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按不同综合净能(7.63、8.25、8.88 MJ/kg)和蛋白质(10.84%、12.82%)水平随机分为6组,每组8个重复(公母各半),每个重复1头牛。预试期15 d,正试期60 d。结果表明:(1)瘤胃液中,高能量组的乙酸摩尔百分比显著高于中能量组(P <0.05),中能量组的丙酸摩尔百分比显著低于高、低能量组(P <0.05),而丁酸摩尔百分比显著高于高、低能量组(P <0.05);高蛋白质组的异丁酸和异戊酸摩尔百分比显著高于低蛋白质组(P <0.05);日粮能量与蛋白质水平的交互作用对异丁酸、异戊酸和戊酸摩尔百分比有显著影响(P <0.05)。(2)瘤胃菌群中,低能量和中能量组的Chao1和Shannon指数显著高于高能量组(P <0.05);低蛋白质组的Chao1和Shannon指数显著高于高蛋白质组(P <0.05);日粮能量与蛋白质水平的交互作用对Chao1和Shannon指数有显著影响(P <0.05)。(3)中能量组鸢尾花菌门(Kiritimatiellaeota)的相对丰度显著高于低能量组(P <0.05);日粮能量与蛋白质水平的交互作用对厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidete)、互养菌门(Synergistetes)和变形菌门(Proteobacteria)相对丰度有显著影响(P <0.05)。高能量组细菌F082的相对丰度显著高于低能量组和中能量组(P <0.05),中能量组理研菌科RC9肠道群(Rikenellaceae_RC9_gut_group)的相对丰度显著高于高能量组(P <0.05);高蛋白质组细菌F082的相对丰度显著高于低蛋白质组(P <0.05),拟杆菌目RF16群(Bacteroidales_RF16_group)的相对丰度显著低于低蛋白质组(P <0.05);日粮能量与蛋白质水平的交互作用对克里斯滕森菌科R-7群(Christensenellaceae_R-7_group)、细菌F082和瘤胃球菌科NK4A214群(Ruminococcaceae_NK4A214_group)的相对丰度有显著影响(P <0.05)。综上所述,当生长期牦牛的日粮综合净能为8.25 MJ/kg、蛋白质为12.82%时,更有利于促进瘤胃发酵,改善瘤胃菌群环境。 展开更多
关键词 牦牛 能量 蛋白质 瘤胃发酵 微生物区系
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酿酒酵母液泡电导1的抗原表位预测及抗原编码基因的克隆
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作者 董晓宇 邱宇 曹钧雄 《生物加工过程》 CAS 2024年第3期278-288,共11页
为了制备酵母菌液泡电导1(Yvc1)的抗原蛋白,本文首先通过生物信息学方法预测Yvc1抗原表位,并克隆其抗原编码基因。利用NCBI GenBank数据库、ORP Finder、EXPASY ProtScale、SOPMA、IEDB和NetMHCⅡpan等生物信息学工具对酿酒酵母S288c的Y... 为了制备酵母菌液泡电导1(Yvc1)的抗原蛋白,本文首先通过生物信息学方法预测Yvc1抗原表位,并克隆其抗原编码基因。利用NCBI GenBank数据库、ORP Finder、EXPASY ProtScale、SOPMA、IEDB和NetMHCⅡpan等生物信息学工具对酿酒酵母S288c的Yvc1抗原表位进行预测,并根据预测的结果设计引物并克隆其抗原编码基因。结果显示,YVC1基因全长2028 bp,有33个开放阅读框,最长一个被通读的序列,编码675个氨基酸。Yvc1分子量7.7937×10^(4),属于稳定、亲水性蛋白质;该蛋白含有4个膜外区域,亚细胞定位于液泡膜;二级结构中的无规则卷曲和β转角分别占29.48%和3.11%;分别含有5个B细胞优势抗原表位和2个Th优势表位区域;最终预测,优势抗原表位在1~236位氨基酸区域。扩增的酿酒酵母DL5168抗原编码基因序列与预测抗原的基因序列487707~489734 bp位点的相似性达到99%。本研究表明,生物信息学方法成功预测并克隆到Yvc1抗原编码基因,这为其抗原蛋白制备奠定基础。 展开更多
关键词 酿酒酵母 Yvc1 生物信息学 抗原表位 基因克隆
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甘蔗渣的碱催化甘油水溶液预处理
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作者 王晨 宋国杰 +4 位作者 孙海彦 闫俊书 宦海琳 窦少华 孙付保 《新能源进展》 CSCD 北大核心 2024年第2期209-215,共7页
建立了一种木质纤维素的碱催化甘油水溶液预处理方法以期选择性分离组分和提高底物的可酶解性。实验确定了碱催化甘油水溶液预处理甘蔗渣的条件为:温度180℃、NaOH添加量7%、反应时间45 min以及甘油水溶液浓度80%。在该条件下,甘蔗渣的... 建立了一种木质纤维素的碱催化甘油水溶液预处理方法以期选择性分离组分和提高底物的可酶解性。实验确定了碱催化甘油水溶液预处理甘蔗渣的条件为:温度180℃、NaOH添加量7%、反应时间45 min以及甘油水溶液浓度80%。在该条件下,甘蔗渣的纤维素和半纤维素保留率分别为93.0%和83.4%,而木质素脱除率接近80%,达到了理想的组分分离效果。预处理后底物(20 g/L)在CTec2酶载量10 FPU/g干基下水解72 h酶解率为79.6%,表明预处理后底物具有较好的可酶解性。利用现代分析技术解析了甘蔗渣预处理前后的组成结构演变规律,初步探明了碱催化甘油水溶液预处理有效提升生物质原料可酶解性的原因。 展开更多
关键词 木质纤维素生物质 甘油水溶液 组分分离 酶解糖化 可发酵性糖
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海洋细菌假交替单胞菌DL-6来源β-N-乙酰己糖胺酶异源表达及酶学表征
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作者 刘向歌 赵子琪 +3 位作者 吴家葳 于爽 迟乃玉 王晓辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第16期68-76,共9页
从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量... 从海洋细菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)DL-6中克隆β-N-乙酰己糖胺酶基因(PsHex),扩增至pET-28a(+),并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达,经镍-次氮基三乙酸亲和层析纯化得到纯蛋白。结果表明:PsHex编码876个氨基酸,分子质量约99.46 kDa,理论等电点5.65,序列对比分析表明,Ps Hex属于糖苷水解酶GH20家族;Ps Hex蛋白最适温度30℃,最适pH 8.5,比活力11.30 U/mg,且在20℃、pH 7.5时稳定性最高;重组蛋白可降解琼脂、葡聚糖、可溶性淀粉、卡拉胶等多种底物;Na^(+)、Mg^(2+)、Fe^(3+)、K^(+)、Ca^(2+)、二硫苏糖醇、吐温-80、乙二胺四乙酸、β-巯基乙醇对酶有激活作用;Ps Hex以对硝基苯基-β-D-乙酰氨基葡萄糖苷为底物的米氏常数(K_(m))为2.523 mol/L、转化效率(K_(cat))为79.035 min^(-1)、最大反应速率(v_(max))为2.081 U/mg、K_(cat)/K_(m)=31.326。该研究为酶法降解几丁质产生N-乙酰葡萄糖胺的生产应用提供了理论参考。 展开更多
关键词 β-N-乙酰己糖胺酶 假交替单胞菌 表达与纯化 酶学性质
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日粮能量和蛋白质水平对生长期牦牛生长性能、养分表观消化率及血液指标的影响
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作者 姜南 贡觉郎珍 +3 位作者 孙光明 洛桑顿珠 次旦央吉 巴桑旺堆 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期298-303,共6页
试验旨在研究日粮能量和蛋白质水平对生长期牦牛生长性能、养分表观消化率及血液指标的影响。选取体重(132.86±1.85)kg、体况相近且健康无病的1.5周岁牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按日粮综合净能[低:7.63 MJ/kg(LE);中:8.... 试验旨在研究日粮能量和蛋白质水平对生长期牦牛生长性能、养分表观消化率及血液指标的影响。选取体重(132.86±1.85)kg、体况相近且健康无病的1.5周岁牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按日粮综合净能[低:7.63 MJ/kg(LE);中:8.25 MJ/kg(ME);高:8.88 MJ/kg(HE)]和蛋白质[低:10.84%(LP);高:12.82%(HP))]水平随机分为6组,每组8个重复,每个重复1头牛。预试期15 d,正试期60 d。结果表明:LPHE组和HPME组平均日增重高于HPLE组和HPHE组;HPHE组干物质采食量高于LPME组和HPLE组(P<0.05);HPHE组耗料增重比最高,HPME组最低(P<0.05);中能量水平组平均日增重高于低、高能量水平组,耗料增重比最低(P<0.05);高蛋白质水平组耗料增重比高于低蛋白质水平组(P<0.05);日粮能量与蛋白质水平对牦牛干物质采食量、平均日增重和耗料增重比有交互作用(P<0.05);LPME组和HPME组干物质表观消化率高于LPLE组、HPLE组和HPHE组(P<0.05);中能量水平组干物质和粗蛋白质表观消化率高于低、高能量水平组(P<0.05),日粮能量与蛋白质水平对牦牛干物质表观消化率有交互作用(P<0.05);LPHE组、HPLE组和HPME组血浆白细胞含量高于HPHE组和LPLE组(P<0.05);高蛋白质水平组血浆碱性磷酸酶活性高于低蛋白质水平组(P<0.05),日粮能量与蛋白质水平对牦牛血浆白蛋白含量有交互作用(P<0.05);LPLE组、HPME组和HPHE组免疫球蛋白G含量高于LPME组(P<0.05),LPLE组和HPHE组总抗氧化能力高于HPLE、LPME组(P<0.05),HPHE组超氧化物歧化酶活性最高,HPLE组超氧化物歧化酶活性最低(P<0.05),LPME组、LPHE组和HPLE组丙二醛含量高于LPLE组和HPHE组(P<0.05);中能量水平组总抗氧化能力低于低、高能量水平组(P<0.05),高能量水平组超氧化物歧化酶活性高于低、中能量水平组(P<0.05);日粮能量与蛋白质水平对牦牛血浆免疫和抗氧化指标有交互作用(P<0.05)。研究表明,中能量水平日粮有助于促进牦牛生长,提升养分表观消化率,高蛋白质水平可改善部分血清生化指标;生长期牦牛的适宜日粮综合净能和蛋白质水平分别为8.25 MJ/kg和12.82%。 展开更多
关键词 能量 蛋白质 生长性能 养分表观消化率 血液指标 牦牛
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西藏牦牛瘤胃源产纤维素酶菌株筛选鉴定及产酶条件探究
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作者 姜南 李传博 +5 位作者 杨晓钰 孙光明 洛桑顿珠 次旦央吉 石汇 窦少华 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第3期88-94,共7页
为提高纤维素的利用率,寻找到安全性能好、产酶效率高的菌株添加剂添加到饲料中,以提升动物对饲料的利用率,从牦牛瘤胃中分离高产纤维素酶菌株,进行16S rDNA的鉴定,并探究其在不同温度、pH、接种量和发酵阶段产内切型-β-葡聚糖酶、外切... 为提高纤维素的利用率,寻找到安全性能好、产酶效率高的菌株添加剂添加到饲料中,以提升动物对饲料的利用率,从牦牛瘤胃中分离高产纤维素酶菌株,进行16S rDNA的鉴定,并探究其在不同温度、pH、接种量和发酵阶段产内切型-β-葡聚糖酶、外切型-β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶的特性。结果表明:通过形态学鉴定以及16S rDNA基因序列测定,最终确定高产菌株M1为克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)。M1产内切型-β-葡聚糖酶活性大于外切型-β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶;M1在35℃、pH为7、接种量为2%的条件下产内切型-β-葡聚糖酶的效率最高,在30℃、pH为6、接种量为2%的条件下产外切型-β-葡聚糖酶的效率最高,在30℃、pH为6、接种量为1%条件下产β-葡萄糖苷酶的效率最高;在M1生长过程中,先产生了β-葡萄糖苷酶,其次是外切型-β-葡聚糖酶、内切型-β-葡聚糖酶,并且外切酶活性远远大于内切酶和β-葡萄糖苷酶活性。 展开更多
关键词 高原牦牛 瘤胃源 菌株筛选 纤维素酶 产酶条件 饲料添加
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大蒜汁对东北酸菜发酵中细菌菌群结构的影响
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作者 孙全敏 王严 +4 位作者 王晓辉 贾倩雯 李田田 迟乃玉 张庆芳 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第4期153-162,共10页
为研究大蒜汁对酸菜发酵中细菌菌群结构的影响,首先对不同浓度蒜汁的抑菌性及对L.pentosus DY2-7生长的影响进行研究,确定酸菜发酵的蒜汁添加量,然后以自然发酵酸菜为对照添加蒜汁发酵,对发酵过程中的理化指标(pH、总酸、亚硝酸盐)进行... 为研究大蒜汁对酸菜发酵中细菌菌群结构的影响,首先对不同浓度蒜汁的抑菌性及对L.pentosus DY2-7生长的影响进行研究,确定酸菜发酵的蒜汁添加量,然后以自然发酵酸菜为对照添加蒜汁发酵,对发酵过程中的理化指标(pH、总酸、亚硝酸盐)进行监测;利用16S rRNA高通量测序技术对发酵后期酸菜样品中细菌菌群结构进行分析。结果表明:蒜汁的抑菌性随蒜汁浓度增大而增强,0.3%左右蒜汁可能对L.pentosus DY2-7的生长有益,0.6%有显著抑制作用;添加0.3%蒜汁发酵能抑制高“亚硝峰”出现,提高微生物物种丰富度和多样性,显著增加Lactiplantibacillus、Leuconostoc的丰度,显著降低Lactococcus、Pseudomonas的丰度,不会对发酵酸菜中微生物的功能造成显著影响。 展开更多
关键词 大蒜汁 酸菜 亚硝酸盐 菌群结构
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基于转录因子生物传感器在环境分析中的应用
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作者 张迪 鞠睿 +3 位作者 李丽梅 王煜倩 陈瑞 王新一 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期114-125,共12页
转录因子是一类在细胞中通过引导RNA聚合酶与特定DNA序列结合调控基因表达的蛋白质。转录因子是生物体适应自然环境过程中的一类重要调节性蛋白,可专一性的感知环境介质中的配体分子。利用转录因子作为识别元件构建生物传感体系并与不... 转录因子是一类在细胞中通过引导RNA聚合酶与特定DNA序列结合调控基因表达的蛋白质。转录因子是生物体适应自然环境过程中的一类重要调节性蛋白,可专一性的感知环境介质中的配体分子。利用转录因子作为识别元件构建生物传感体系并与不同的信号转导和放大系统耦合,可在细胞、无细胞和体外等不同反应体系构建信号输出形式灵活多样的传感策略。基于转录因子构建的生物传感器(TFBBs),因其灵敏度高、体积小、价格低廉以及可应用于现场监测等优势,在环境分析领域显示出巨大应用潜力。文中着重介绍了TFBBs的传感体系类型、核心元件组成和工作原理,列举了其在重金属离子、芳香族化合物及抗生素等环境污染物检测中的应用进展,在此基础上讨论了TFBBs在环境污染物检测中可能面临的机遇和挑战,并对其发展趋势进行了展望,指出合成生物学、人工智能等多学科新兴技术的高速发展将促进TFBBs人工设计和传感性能提升,使其应用于更广泛的领域。 展开更多
关键词 转录因子 生物传感 环境分析 重金属离子 芳香族化合物 抗生素
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不同能量和蛋白质水平饲粮对育肥期牦牛生长性能、养分表观消化率及血浆指标的影响
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作者 姜南 贡觉郎珍 +3 位作者 孙光明 洛桑顿珠 次旦央吉 巴桑旺堆 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第14期7-12,共6页
试验旨在研究饲粮不同能量和蛋白质水平对育肥期牦牛生长性能、养分表观消化率及血浆指标的影响。选取体重、体况相近且健康无病的2.5周岁牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按不同能量(高、中、低)和蛋白质(高、低)水平随机分为6组... 试验旨在研究饲粮不同能量和蛋白质水平对育肥期牦牛生长性能、养分表观消化率及血浆指标的影响。选取体重、体况相近且健康无病的2.5周岁牦牛48头,采用3×2双因素试验设计,按不同能量(高、中、低)和蛋白质(高、低)水平随机分为6组,每组8个重复,每个重复1头牛。预试期15 d,正式试验期60 d。结果表明:高能量组末重(FBW)和总增重显著高于低能量组(P<0.05);高蛋白组FBW和总增重显著高于低蛋白组(P<0.05);能量与蛋白质的交互作用对总增重有显著影响(P<0.05)。高能量组干物质(DM)和粗蛋白(CP)表观消化率最高,低能量组DM和CP表观消化率最低,各组间差异显著(P<0.05);高蛋白组DM和CP表观消化率显著高于低蛋白组(P<0.05);能量与蛋白质的交互作用对DM和CP表观消化率有显著影响(P<0.05)。高能量组血浆总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著高于低能量组(P<0.05),低能量组血浆碱性磷酸酶(ALP)活性显著高于中能量组(P<0.05);能量与蛋白质的交互作用对ALB和ALP水平有显著影响(P<0.05)。血浆免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性随能量和蛋白质水平的升高而升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量随能量和蛋白质水平的升高而降低(P<0.05),能量与蛋白质的交互作用对T-AOC、SOD活性以及IgA、IgG、MDA含量有显著影响(P<0.05)。研究表明,高能高蛋白饲粮能够促进育肥期牦牛生长,改善血浆生化指标,增强机体抗氧化和免疫功能;推荐育肥期牦牛的适宜饲粮能量和蛋白质水平分别为8.88MJ/kg和12.82%。 展开更多
关键词 牦牛 能量 蛋白质 生长性能 养分表观消化率 血浆指标
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带电短肽T_(7)+、T_(6)-对α-淀粉酶活性和构象的影响
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作者 杨晓钰 李传博 +2 位作者 刘春莹 孙付保 窦少华 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期14-23,共10页
利用带不同电荷的短肽T_(7)+、T_(6)-,探讨正电荷短肽T_(7)+和负电荷短肽T_(6)-对α-淀粉酶的活性和构象的影响。将短肽加入α-淀粉酶体系后,测定其相对酶活、米氏常数(Km)、活化能、Zeta电位等指标。为了更清晰地观察不同带电量的短肽... 利用带不同电荷的短肽T_(7)+、T_(6)-,探讨正电荷短肽T_(7)+和负电荷短肽T_(6)-对α-淀粉酶的活性和构象的影响。将短肽加入α-淀粉酶体系后,测定其相对酶活、米氏常数(Km)、活化能、Zeta电位等指标。为了更清晰地观察不同带电量的短肽对α-淀粉酶构象的影响,通过紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色光谱进一步考察α-淀粉酶构象的变化。结果表明,将带电短肽加入α-淀粉酶的酶促反应中,正电荷短肽T7+抑制α-淀粉酶酶活,当短肽质量浓度为10^(-7)g/mL时,α-淀粉酶相对酶活降低2.40%,同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力降低,活化能升高,Zeta电位增加。负电荷短肽T_(6)-促进α-淀粉酶酶活,当短肽质量浓度为10^(-7)g/mL时,α-淀粉酶相对酶活升高1.40%,同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力升高,活化能降低,Zeta电位增加。光谱分析表明,不同带电短肽使α-淀粉酶的紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及二级结构发生不同程度的改变。这表明不同带电短肽可以发挥与电场相似的作用,即电场在作用于蛋白质时,产生的电场力促使蛋白质构象发生改变,人工设计合成短肽所带的表面电荷影响酶表面电荷的分布,进而导致酶的活性和构象发生改变。 展开更多
关键词 Α-淀粉酶 带电短肽 相对酶活 构象
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笃斯越橘E3连接酶基因VuARI2的克隆及其抗寒功能分析
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作者 张润梅 乌凤章 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1420-1432,共13页
【目的】通过克隆笃斯越橘E3泛素连接酶基因VuARI2及分析其在拟南芥中异源表达,探索笃斯越橘VuARI2基因在低温胁迫响应中的功能。【方法】以笃斯越橘为材料,用RT-PCR和RACE技术从茎中克隆获得VuARI2基因,并对其进行系统生物信息学分析;... 【目的】通过克隆笃斯越橘E3泛素连接酶基因VuARI2及分析其在拟南芥中异源表达,探索笃斯越橘VuARI2基因在低温胁迫响应中的功能。【方法】以笃斯越橘为材料,用RT-PCR和RACE技术从茎中克隆获得VuARI2基因,并对其进行系统生物信息学分析;用qRT-PCR技术分析该基因在不同组织中及低温胁迫处理下的表达模式;在拟南芥中异源表达VuARI2并对其进行冷驯化后表达水平、生理指标及冰冻处理后的抗寒性分析。【结果】VuARI2基因编码区长1770 bp,编码589个氨基酸。泛素连接酶VuARI2与野山茶、咖啡树、葡萄和河岸葡萄ARI2蛋白的氨基酸序列同源关系较近。qRT-PCR结果显示,VuARI2基因表达具有组织特异性,在叶和花芽中VuARI2的表达量显著高于根和茎中;茎和花芽VuARI2表达受低温诱导较显著。转基因植物的VuARI2基因表达量在冷驯化后显著高于野生型;总叶绿素含量降幅显著低于野生型;脯氨酸和可溶性糖含量显著高于野生型;超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性均显著高于野生型,而相对电导率和丙二醛含量显著低于野生型。冷驯化后转基因植物在冰冻低温下存活率显著高于野生型,相对电导率显著低于野生型,提高了植物抗寒性。【结论】克隆获得了笃斯越橘VuARI2基因,过表达VuARI2基因可以提高植物抗寒性。 展开更多
关键词 笃斯越橘 泛素连接酶基因VuARI2 基因克隆 冷驯化 功能分析 抗寒性
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黄嘌呤氧化酶靶向小分子抑制剂的虚拟筛选
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作者 陈明雪 温泽宇 +1 位作者 宋佳 史丽颖 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期42-49,共8页
为了挖掘生物活性高、靶点明确的新型抗痛风药物先导化合物,以黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)为靶标虚拟筛选小分子抑制剂.从PDB数据库下载XOD蛋白晶体结构,经Schrodinger 2018中的“Protein prepara-tion wizard”模块预处理,基于... 为了挖掘生物活性高、靶点明确的新型抗痛风药物先导化合物,以黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)为靶标虚拟筛选小分子抑制剂.从PDB数据库下载XOD蛋白晶体结构,经Schrodinger 2018中的“Protein prepara-tion wizard”模块预处理,基于XOD活性口袋与小分子配体作用方式特征构建了3个药效团,对FDA数据库和Chemdiv数据库进行分子对接筛选.结果发现:以非布索坦与XOD对接分数-35.790 kJ/mol为阈值,筛选得到低于该分数的化合物共206个.通过类药五原则以及ADMET分析,发现有8个化合物具有较好的成药性.将此8个化合物进行结合自由能计算,其中氟芬那酸、罗索沙星、化合物6(CAS:400076-03-1,苯并吡唑类化合物)和化合物7(CAS:866050-17-1,酞嗪类化合物)与阳性对照组非布索坦的作用方式相似,能与黄嘌呤氧化酶形成稳定性较强的复合物,可作为潜在的黄嘌呤氧化酶抑制剂. 展开更多
关键词 黄嘌呤氧化酶 痛风 药效团 分子对接 虚拟筛选
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二甲双胍联合热疗诱导U937细胞凋亡及其机制研究
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作者 乔晋宇 付思雨 +3 位作者 陈明雪 贾子贤 于大永 史丽颖 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第3期87-96,共10页
探讨二甲双胍(Met)联合热疗(HT)诱导人白血病U937细胞凋亡及其可能的作用机制.MTT法检测二甲双胍联合温热(HT+Met)处理对U937细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色观察U937细胞形态变化;流式细胞术检测U937细胞凋亡、周期、活性氧以及线粒... 探讨二甲双胍(Met)联合热疗(HT)诱导人白血病U937细胞凋亡及其可能的作用机制.MTT法检测二甲双胍联合温热(HT+Met)处理对U937细胞增殖的影响;Hoechst 33342染色观察U937细胞形态变化;流式细胞术检测U937细胞凋亡、周期、活性氧以及线粒体膜电位的变化情况;Western Blot检测U937细胞中凋亡相关蛋白的表达情况.通过细胞计数及活力实验确定Met 10 mmol/L和HT 44℃、15 min为化疗联合热疗的实验条件.Hoechst 33342荧光染色及Annexin V-FITC/PI流式细胞术分析表明,与Met或HT单独处理相比,HT+Met诱导U937细胞凋亡作用增强、活性氧(ROS)产生增加、线粒体膜电位(MMP)降低及G2/M期阻滞.Western Blot结果表明,与Met或HT单独处理相比,HT+Met组Bax/Bcl-2蛋白表达上调,Caspase-3和Caspase-8蛋白表达下调,周期蛋白依赖性激酶CDK1和周期蛋白Cyclin B1表达下调,p-P38/P38水平显著升高,加入NAC(一种ROS清除剂)后可显著恢复HT+Met组诱导的p-P38蛋白和Caspase-3蛋白表达.二甲双胍联合热疗能够诱导U937细胞凋亡,其可能的作用机制为通过死亡受体(外源性)途径、ROS介导调节线粒体(内源性)途径以及P38 MAPK信号通路诱导人白血病U937细胞凋亡. 展开更多
关键词 二甲双胍 热疗 细胞凋亡 P38 MAPK 信号通路
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米曲霉培养物对冷季泌乳牦牛产奶量、乳成分、血浆生化及免疫指标的影响
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作者 姜南 修雨荷 +4 位作者 邵婷婷 贡觉郎珍 孙光明 洛桑顿珠 巴桑旺堆 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第13期7-10,共4页
试验研究在冷季泌乳牦牛补饲的基础上,添加米曲霉培养物对产奶量、乳成分、血浆生化及免疫指标的影响。采用单因素试验设计,选择胎次相同、产犊日期和体重相近的泌乳牦牛16头,随机分为两组,每组8个重复,每个重复1头牦牛。对照组补饲,米... 试验研究在冷季泌乳牦牛补饲的基础上,添加米曲霉培养物对产奶量、乳成分、血浆生化及免疫指标的影响。采用单因素试验设计,选择胎次相同、产犊日期和体重相近的泌乳牦牛16头,随机分为两组,每组8个重复,每个重复1头牦牛。对照组补饲,米曲霉培养物组补饲时添加100 g/(头·d)米曲霉培养物。预试期1w,正式试验期5 w。结果显示:与对照组相比,米曲霉培养物组能够显著提高试验第18 d的乳脂率及第18 d、35 d的乳蛋白率和乳糖率(P<0.05);试验第35 d,米曲霉培养物组血浆中白蛋白(ALB)含量极显著升高(P<0.01),葡萄糖(GLU)和甘油三酯(TG)含量显著升高(P<0.05),尿素氮(BUN)含量极显著降低(P<0.01);试验第18 d和35 d,米曲霉培养物组血浆中免疫球蛋白A(IgA)含量显著升高(P<0.05),免疫球蛋白M(IgM)含量极显著升高(P<0.01),试验第18 d,米曲霉培养物组免疫球蛋白G(IgG)含量极显著升高(P<0.01)。研究表明,米曲霉培养物能够提高冷季牦牛乳品质、机体免疫功能及饲粮能量与蛋白质的利用率。 展开更多
关键词 米曲霉培养物 泌乳牦牛 冷季 产奶量 乳成分 血浆生化指标 免疫指标
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猪源病毒细胞毒性T淋巴细胞表位研究进展
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作者 鲜钰涵 冯宏盛 +7 位作者 高永宇 李海洋 杨思宇 桑辰君 曹玉蝶 唐越 李子彬 高凤山 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3086-3099,共14页
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T ly... 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子,也称为猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)Ⅰ类分子,在机体抗原递呈、器官移植、细胞免疫应答和调控等方面起重要作用。细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位是抗原经抗原递呈细胞加工后,与SLA-Ⅰ类分子结合并递呈的线性肽段,具有高度特异性,在机体抗原识别递呈和细胞免疫抵抗病毒感染方面发挥着关键作用。CTL表位能够刺激CTLs发挥细胞杀伤作用,主要表现为杀伤病毒。作者将对口蹄疫病毒、非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等几种重要的猪源病毒的CTL表位研究现状进行综述,并利用生物信息学手段分析SLA-Ⅰ与CTL表位结合基序特征,以期为今后相关猪源病毒CTL表位的研究和多表位疫苗的设计提供参考。 展开更多
关键词 细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位 猪口蹄疫病毒 非洲猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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不同发酵工艺对刺梨果酒抗氧化活性的影响
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作者 刘祯珍 谢丹丹 +1 位作者 迟乃玉 张书东 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第1期194-202,共9页
为更好利用刺梨果酒抗氧化活性物质,本研究通过检测6种发酵工艺加工的刺梨果酒的各项指标和体外抗氧化活性,以及利用主成分分析构建的综合评价体系考察刺梨果酒的品质。结果表明,6种发酵工艺中刺梨果酒可溶性固形物无显著性差异;三种自... 为更好利用刺梨果酒抗氧化活性物质,本研究通过检测6种发酵工艺加工的刺梨果酒的各项指标和体外抗氧化活性,以及利用主成分分析构建的综合评价体系考察刺梨果酒的品质。结果表明,6种发酵工艺中刺梨果酒可溶性固形物无显著性差异;三种自然发酵工艺中酒精度、还原糖、甲醇、Vc无显著性差异;三种灭菌发酵工艺中pH、总酸、酒精度、总糖、Vc和总酚无显著性差异;自然原汁发酵的pH值(3.47)、SOD(66.12 U/mL)、总糖(241.75 mg/mL)、总酚(98.03 g/L)和总抗氧化能力(2.569 mg/mL)与其他发酵工艺存在显著性差异;灭菌冷浸渍发酵的还原糖(5.55 mg/mL)显著低于其他发酵工艺。主成分分析表明,自然带渣发酵工艺发酵刺梨果酒综合分数最高(1.050),是适合刺梨果酒酿造的发酵工艺。 展开更多
关键词 刺梨果酒 发酵工艺 抗氧化活性 主成分分析
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基因工程益生菌在炎症性肠病中的研究进展
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作者 赵菊阳 陈曦 +2 位作者 李丽梅 王新一 吕梦圆 《工业微生物》 CAS 2024年第4期22-24,共3页
炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一种慢性且易反复发作的肠道炎症性疾病。当前对其治疗方法存在临床缓解率低、复发率高和副作用明显等问题,因此,开发新型的高效治疗策略成为了该领域的全球性目标。工程益生菌疗法作为IB... 炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一种慢性且易反复发作的肠道炎症性疾病。当前对其治疗方法存在临床缓解率低、复发率高和副作用明显等问题,因此,开发新型的高效治疗策略成为了该领域的全球性目标。工程益生菌疗法作为IBD领域的前沿疗法之一,为突破IBD治疗瓶颈带来了新的可能。文章对设计与构建基因工程益生菌过程中涉及的基础问题进行了概述,并总结了工程益生菌在IBD诊断和临床治疗中的应用,以期为IBD临床诊疗提供新的视角和思路。 展开更多
关键词 益生菌 炎症性肠病 合成生物学 基因工程
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不同参龄、坡向及根际土壤微生物对林下园参皂苷积累的影响
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作者 杜欣 谢阿贵 +6 位作者 方新月 江荣鑫 熊涵 窦少华 王东明 肖永坤 刘春莹 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第2期88-97,共10页
本研究通过高效液相色谱法同时测定林下园参中33种皂苷含量,分析不同参龄、坡向林下园参中皂苷组成与分布差异;通过高通量测序技术,分析不同坡向林下园参根际土壤微生物多样性特征及其与皂苷积累的关系。结果表明,3~5年生林下园参中均... 本研究通过高效液相色谱法同时测定林下园参中33种皂苷含量,分析不同参龄、坡向林下园参中皂苷组成与分布差异;通过高通量测序技术,分析不同坡向林下园参根际土壤微生物多样性特征及其与皂苷积累的关系。结果表明,3~5年生林下园参中均含有皂苷Re、Rg1、Rf、Rb1、Rb2、Rc、Rb3、Rd、S,R-Rg2、R-Rh1、Rh4,皂苷含量随参龄增长而增加;阳坡5年生林下园参中人参皂苷Rg1、Rc、Rb2、Rb3、Rd质量分数高于阴坡,但Re、Rf、Rb1质量分数低于阴坡。阴坡林下园参根际土壤中细菌、真菌ACE、chao和Shannon值数值均高于阳坡,且PCA距离相差均大于阳坡,其根际微生物丰度更高,多样性更丰富。阳坡阴坡真菌属类最优势属均为被孢霉属,其余菌属种类与占比均存在较大差异;阳坡优势菌利于皂苷Rg1、Rc、Rb2、Rb3、Rd的积累,阴坡优势菌利于皂苷Re、Rf、Rb1的积累。 展开更多
关键词 林下园参 人参皂苷 根际微生物 HPLC 高通量测序
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