肉苁蓉属化学成分及生物活性研究进展

肉苁蓉为传统补益类中药,近年来被研究发现具有广泛的生物活性作用。参考近30年国内外相关文献,综述了肉苁蓉的化学成分及生物活性。肉苁蓉属含有苯苷类(苯乙醇苷类、苯甲醇苷类)、环烯醚萜及其苷类、木质素及其苷类等,具有神经保护、抗疲劳、防治脑缺血及脑缺血再灌注损伤等作用;其中,苯乙醇苷类作为肉苁蓉中的主要活性物质在神经保护作用中起主导作用。

接骨木的化学成分及生物活性研究进展

近年来国内外对接骨木Sambucus williamsii Hance的研究日趋深入,已开展了大量工作。笔者通过查阅近年来有关资料,对国内外研究发现的接骨木中酚酸类、黄酮类、三萜类等化学成分的结构进行总结,并对其促进骨折愈合、抗骨质疏松、抗菌、抗炎等主要生物活性进行综述,为进一步开发和研究接骨木提供依据。

桂枝化学成分系统化色谱分离方法研究

以中药桂枝为试材,采用TLC和HPLC分析法对桂枝化学成分系统性色谱分离的样品前处理、色谱分离条件和制备色谱参数进行了系统研究。在台阶梯度洗脱时,根据TLC数据中的Rf值,利用化合物的移动速率u=u0/(1+k),对各化合物色谱分离洗脱剂的保留体积可以进行较准确的计算与预测,避免色谱分离时的盲目性。结果表明:甲醇提取和正己烷萃取是富集桂枝主要化学成分的有效方法;研究建立的系统性TLC分析方法可以快速有效地选择桂枝主要成分色谱分离的填料、溶剂体系、比例及程序。桂枝主要成分的最佳色谱分离填料为硅胶,最佳洗脱体系为正己烷-乙酸乙酯。采用建立的条件经一次制备色谱分离,得到了8个纯化合物,5个化合物的HPLC纯度均在95%以上。该研究建立了桂枝化学成分有效的系统化色谱分离方法。

天然除虫菊酯化学成分制备分离及光稳定性研究

首次采用自动化真空液相色谱(AUTO-VLC)对天然除虫菊酯进行制备分离,并研究天然除虫菊酯的光稳定性及不同稳定剂对其稳定性影响。结果表明:AUTO-VLC对天然除虫菊酯有很好分离效果,实现了克级制备纯度90%以上目标物,100 g天然除虫菊酯在正己烷∶乙酸乙酯=96∶4(体积比)的分离条件下耗时16.5 h得到除虫菊酯Ⅰ(纯度93.5%)16.5 g、除虫菊酯Ⅱ(纯度>90%)13.05 g;天然除虫菊酯光降解符合一级动力学规律,光照初期除虫菊酯降解速率较高而后降解趋于平缓,太阳光下降解速率小于紫外光下且在紫外波长230 nm下更容易降解,添加稳定剂2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮且在摩尔比1∶1时光稳定效果好。研究结果为天然除虫菊酯农药大规模生产和在农田中持久高效利用提供参考。

海参中主要生物活性成分研究进展

海参作为传统珍贵的食品及名贵的海洋生物,其保健价值由古至今一直为人们所称道。本文对近20年来国内外研究中发现的海参主要活性成分:多糖、海参皂苷、脑苷脂、神经节苷脂的分子结构进行总结,并对其抗肿瘤、抗癌、提高免疫活性、抗菌等生物活性进行综述,为海参资源的合理开发利用提供科学依据。

肉桂抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究

为寻找肉桂中具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的化学成分,采用高效液相色谱结合体外抑制α-葡萄糖苷酶活性筛选模型的方法,进行活性成分的跟踪分离,并对活性化合物进行酶抑制动力学研究。结果显示,肉桂石油醚提取物(IC50=350.37μg/mL)的活性明显高于阳性对照阿卡波糖(IC50=1028.99μg/mL),从中分离出2个活性成分,分别鉴定为桂皮醛(IC50=277.89μg/mL)和肉桂酸(IC50=286.22μg/mL)。酶抑制动力学结果表明它们对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为非竞争性抑制,Ki值分别为178.07μg/mL和229.43μg/mL。

12味药食两用中药抑制α-葡萄糖苷酶作用研究

选择对糖尿病有治疗作用的12味药食两用中药,经正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、水5种溶剂系统提取获得60个提取部位,以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚,进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外筛选。结果表明,12味药食两用中药各提取部位均表现出不同程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,且抑制活性普遍高于常用降糖药物Acarbose。丁香和肉桂的所有提取部位均表现出较高的抑制活性;榧子的甲醇提取部位及丁香和肉桂的水提取部位活性显著,抑制率在95%以上。筛选工作为药食两用中药资源的开发利用提供了重要的活性数据参考。

自动真空液相色谱装置的研制及其在五味子成分分离中的应用

为满足天然产物高效分离的需求,本文研制了自动真空液相色谱（AUTO-VLC）装置并用于五味子石油醚萃取物的分离。该装置由自主设计的流动相储备系统、10通分流切换阀、3通切换阀、3个不同规格的动态轴向压缩色谱柱、10通馏分收集阀和馏分收集器组成,采用可编程逻辑控制器（PLC）S7-200实现了分离过程的不同比例流动相切换、不同规格色谱柱选择、分离时间设定及馏分收集的自动控制及监测。应用于五味子成分分离的结果表明：采用150 mm直径动态轴向压缩色谱柱的VLC,从100 g五味子石油醚萃取物中一次分离得到6个组成明显不同的样品（S1～S6）。建立了通过多次薄层色谱（TLC）展开筛选VLC分离条件的方法,并进行了分离验证。VLC分离条件选择方法：自动真空液相色谱的初始洗脱剂的比例以首次TLC展开时全部目标化合物的比移值（Rf）介于0～0.45时展开剂的组成为宜;梯度洗脱比例变化以k值（展开次数（n）与Rf的线性函数斜率）和TLC分离度为依据选择;不同Rf范围内洗脱次数由n≈ΔRf/k计算。采用选择的条件从样品S5中分离得到了13个组分和4个纯度在85%以上的化合物,仅耗时17 h。AUTO-VLC的研制对于中药成分的自动和系统性分离具有重要价值。

西青果三萜成分的分离纯化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性的研究

研究西青果中三萜类化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性，利用薄层色谱指导柱分离、高效液相色谱结合体外抑制α-葡萄糖苷酶筛选模型的方法进行活性研究。本实验从乙酸乙醅萃取物中分离得到3个三萜类化合物，经鉴定为adunicacid，arjunollcacid，arjungenin，其中arjunicacid（IC50=2．97umol／mL），arjunollc acid（IC50=0．82μmoVmL）具有抑制α-葡萄糖苷酶活性。

基于液相色谱信息的西青果化学成分抑制α-葡萄糖苷酶活性数学模型的构建

中药提取物是一个组成复杂、机理不明晰的混合物体系,其对靶标的作用是其中所有化合物的综合影响,如何表征和评价其生物活性值得深入研究。本文采用羟丙基葡聚糖凝胶色谱柱分离西青果乙醇提取物,得到29组成分连续变化的样品,采集样品的色谱信息(254 nm波长下)与活性信息,运用逐步回归法建立成分的峰面积(Vi,自变量)与活性(以对酶的抑制率(W)表示,因变量)之间的数学方程,确定对活性影响显著的成分。结果表明,29组样品包含55个峰,这些峰对应成分的峰面积(Vi,i=1,2,…,55)与W之间存在数学关系:W=V7×(-0.034±0.013)+V18×(-0.155±0.051)+V29×(-0.142±0.028)+V4×(0.079±0.020)+V11×(0.074±0.028)+V36×(-0.117±0.053)+85.669±4.476,复相关系数R=0.854,显著度=0.037,稳健性良好,对活性影响最显著的物质为第18、29、36、4、11和7号峰对应的化合物。该方法同样适用于不同中药资源的成分与多种不同活性等方面的研究,对于中药的研发具有重要意义。

不同热处理条件对工业大麻中主要大麻素含量的影响

目的研究不同热处理条件对工业大麻中大麻二酚、四氢大麻酚、大麻酚含量的影响。方法采用HPLC⁃DAD法测定不同温度、时间、空气下热处理后大麻二酚、四氢大麻酚、大麻酚含量的变化。结果在100~260℃氮气环境下热处理30 min时,工业大麻中大麻二酚、四氢大麻酚含量随着温度的升高先增加后下降,在160~180℃时达到最高;在180℃氮气环境下热处理时,大麻二酚、四氢大麻酚含量在20~30 min时达到最大值后开始下降;高温环境下接触空气会急剧加速大麻二酚、四氢大麻酚降解,同时四氢大麻酚降解产物大麻酚的含量显著升高。结论在氮气环境中热处理工业大麻时,大麻二酚、四氢大麻酚含量最高。空气环境下高温会导致大麻二酚和四氢大麻酚降低,其中四氢大麻酚可以转化为大麻酚。合适的温度和空气量可获得高含量大麻二酚,并有效降低四氢大麻酚含量。

载银氨基硅胶柱分离EPA和DHA的研究

利用负载银离子的氨基硅胶为固定相,制备4.6 mm×250 mm载银氨基硅胶柱,系统评价EPA和DHA在正相体系中的色谱保留行为,考察了载银氨基硅胶的粒径和流动相对EPA和DHA分离的影响。结果表明:5μm粒径的载银氨基硅胶比10μm粒径的分离度好;随着流动相中正己烷比例的增大,EPA和DHA分离度增大;当选用5μm载银氨基硅胶、流动相为正己烷-异丁醇(体积比2 000∶1)、流速1 mL/min、紫外检测波长210 nm、进样量5μL时,EPA和DHA的分离度最佳,分离度为2.03。该方法简单、快速、重现性好,可用于EPA和DHA的分离。

肉桂提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚,对肉桂不同溶剂提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外评价,并与阳性对照药Acarbose进行比较。结果表明,肉桂正丁醇提取物的抑制活性最高,其IC50为83.10μg/mL,远小于阳性对照Acarbose(IC50=1 028.99μg/mL)。肉桂其他溶剂提取物均有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。对正丁醇部位的α-葡萄糖苷酶抑制动力学研究的结果表明,其作用类型为反竞争性抑制(Ki=53.75μg/mL)。

药食两用中药中α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选

目的:从72种药食两用中药中高通量筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法:采用α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外高通量筛选模型,以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,通过高效液相色谱分析水解产物中的对-硝基酚(PNP),进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果:在样品终浓度0.625mg/mL反应体系下,大多数的提取物对α-葡萄糖苷酶均具有一定的抑制作用,其中16个提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性达到100%。结论:所采用的筛选模型可实现α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选,并且某些药食两用中药能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,对糖尿病的防治具有重要意义。

5,7,4′-三羟基取代黄酮化合物与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱法与紫外光谱法研究5,7,4′-三羟基取代类黄酮化合物芹菜素、柚皮素和染料木素与牛血清白蛋白(BSA)的结合,探讨了C环氢化及取代位置对其与BSA相互作用的影响。结果表明,3种化合物对BSA内源性荧光均有猝灭作用,且猝灭类型为静态猝灭;3种化合物与BSA的结合位点约为1,在295K条件下,与BSA结合由强到弱顺序为芹菜素、染料木素、柚皮素,结合常数分别为1.269×107、3.011×105和1.342×105 L/mol;芹菜素主要通过氢键与范德华力与BSA结合,柚皮素和染料木素主要通过静电作用与BSA结合;说明具有相同A环与B环结构的黄酮化合物,C环氢化后削弱其与BSA的作用,B环连接在C-2位置上与BSA的结合作用更强。3种化合物的加入均改变了BSA酪氨酸残基与色氨酸残基的微环境;同时也改变了蛋白质的二级结构与氨基酸残基,与BSA均形成了复合物。

正、反相色谱结合分离制备西洋参中的人参皂苷类物质

采用正相硅胶柱层析和反相SG-64制备色谱柱,建立了从西洋参总皂苷中分离、制备人参皂苷类物质的方法。硅胶柱色谱分离采用三氯甲烷-甲醇为流动相梯度洗脱,反相SG-64制备色谱纯化采用甲醇-水梯度洗脱。分离过程采用薄层层析法和高效液相色谱法对目标化合物定性检测。分离得到6个纯度超过95%的单体人参皂苷类物质,根据单体化合物的理化性质和波谱数据对其进行结构鉴定,分别鉴定为人参皂苷Rg1、人参皂苷La、人参皂苷Rg2、人参皂苷Re、拟人参皂苷P-F11、人参皂苷Rd。结果表明,该方法操作简便,可用于西洋参皂苷化合物的分离纯化。

紫杉醇分子印迹聚合物的制备及其吸附性能

采用分子印迹技术,以紫杉醇为模板分子,2-乙烯基吡啶(2-VP)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,在氯仿中制备了紫杉醇分子印迹聚合物。用紫外光谱法对紫杉醇和功能单体的相互作用进行了分析,通过平衡结合法和Scatchard模型评价了印迹聚合物的吸附特性。结果表明,紫杉醇与2-VP在氯仿中形成了稳定的1∶2主客体配合物,该印迹聚合物对紫杉醇呈现出高特异性吸附。Scatchard分析表明,印迹聚合物中形成了一类等价的结合位点,结合位点的平衡离解常数和最大表观结合量分别为29.89 mg/L和5.66 mg/g。

超临界流体萃取-色谱法提纯鱼油乙酯中EPA-EE和DHA-EE

基于自主研发的超临界流体萃取-色谱一体装备,将超临界流体精馏技术和超临界流体色谱技术相结合,对乙酯化鱼油原料在超临界CO2中的溶解情况进行了系统研究,经多种单因素考察,探索了二十碳五烯酸乙酯、二十二碳六烯酸乙酯的分离纯化工艺,并探讨其影响因素。结果表明,鱼油乙酯中的EPA-EE和DHA-EE的最佳分离纯化条件:萃取温度梯度40~90℃,萃取压力14 MPa,CO2体积流量100mL/min,鱼油进样速率2 mL/min,以硅胶为色谱柱填料,色谱分离温度40℃,色谱分离压力14 MPa。在此条件下,鱼油乙酯中EPA-EE和DHA-EE质量分数由30%提升到87%。

丹酚酸A对牛血清白蛋白的荧光猝灭作用

采用荧光光谱法研究了在模拟人体生理环境条件下,pH 7.40的Tris-HCl缓冲体系中,丹酚酸A(Sal A)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,丹酚酸A对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用。用Stern-Volmer和Lineweaver-Burk方程处理数据,推断其猝灭机理为丹酚酸A与牛血清白蛋白形成复合物的静态猝灭,并获得了25、30、35℃下丹酚酸A与牛血清白蛋白作用的结合常数分别为1.49×105、1.19×105、8.24×104 L/mol。根据Van't Hoff方程计算得出ΔH=-56.55kJ/mol,根据所得热力学参数推断丹酚酸A与牛血清白蛋白之间的主要作用力为氢键与范德华力。在25℃时,计算获得丹酚酸A与牛血清白蛋白的结合位点数为1.158。

紫杉醇硅胶表面分子印迹纳米颗粒的制备

以紫杉醇为模板分子,紫杉醇上的羟基与异氰酸酯丙基三乙氧基硅烷(IPTS)反应形成共价复合物,然后和交联剂正硅酸乙酯(TEOS)通过溶胶-凝胶的方法涂覆在纳米硅胶表面上,以热裂解的方式去除模板分子后形成紫杉醇硅胶表面分子印迹纳米颗粒。通过吸附实验分析研究了紫杉醇硅胶表面分子印迹纳米颗粒的亲和性能,结果表明印迹纳米颗粒对紫杉醇有良好的亲和性。