雷帕霉素对人宫颈癌HeLa细胞增殖和HIF-1α及VEGF表达的影响

目的探讨不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测分别以不同浓度雷帕霉素处理的体外培养人宫颈癌HeLa细胞的抑制率,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测各组细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果不同浓度雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性;随雷帕霉素浓度增加细胞内HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达均呈下调趋势。结论雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞的生长有抑制作用并呈剂量依赖性,雷帕霉素具有明显下调HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达的作用。

胃粘膜异型增生和胃癌中Survivin基因的表达及相关性研究

目的 :探讨凋亡相关基因survivin在胃癌和胃粘膜异型增生组织中的表达 ,及其与bcl 2、p53和PCNA表达的相关性。方法 :利用免疫组织化学SP法检测 60例胃癌、3 0例胃粘膜异型增生和 8例正常胃粘膜中survivin、bcl 2、p53和PCNA的表达。 结果 :survivin在轻中重度异型增生和癌组织中阳性表达率分别是 10 %、13 %、80 %和 82 %。轻中重度异型增生survivin阳性表达率明显低于重度异型增生和癌 (P <0 0 1)而在重度异型增生与癌间无显著性差异 (P >0 0 5)。survivin阳性表达与胃癌组织学类型无关 (P >0 0 5) ,与浸润深度、淋巴结转移和生存期关系密切 (P <0 0 1、P <0 0 1、P <0 0 5)。survivin表达与bcl 2、p53和PCNAⅢ～Ⅳ级呈正相关 (P <0 0 1)。结论 :survivin基因在胃癌的发生、发展中起重要作用 ,检测survivin基因蛋白可对胃癌预后分析和进一步治疗提供有效依据 ,survivin与bcl 2和

雷帕霉素抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用及其机制

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人宫颈癌HeLa裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法裸鼠皮下接种HeLa细胞,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、RAPA低剂量组(1.5 mg/kg)、RAPA高剂量组(4.5 mg/kg)。RAPA治疗过程中,检测肿瘤的体积、质量,免疫组织化学法及RT-PCR法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 RAPA低剂量组、高剂量组肿瘤生长曲线均减缓;RAPA低剂量组及高剂量组裸鼠皮下移植瘤平均体积、重量与对照组比较显著减小(P<0.01);低剂量组与高剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA低剂量组及高剂量组VEGF蛋白、VEGF及HIF-1α含量、MVD与对照组比较显著减少(P均<0.01),低剂量与高剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAPA对裸鼠皮下移植瘤生长(体积、重量)具有明显的抑制作用,其可能机制是通过抑制HIF-1α的表达抑制VEGF的合成,进而抑制肿瘤组织的血管形成。

CD26/DPP Ⅳ基因表达对卵巢癌移植瘤生物行为的影响

目的探讨CD26/DPPⅣ基因过表达在体内、体外对卵巢癌细胞株恶性表型的影响。方法将重组的PcDAN3.1(+)-CD26/DPPⅣ基因和空载体PcDAN3.1(+)采用阳离子脂质体转染HO-8910PM母系细胞,通过G418筛选获得稳定表达CD26/DPP Ⅳ基因的HODPPⅣ细胞株和转染空载体的HOPcDNA细胞株,经RT-PCR和Western blot鉴定CD26/DPPⅣ基因表达。利用增殖曲线、黏附、侵袭和移动试验在体外进行三种细胞恶性行为比较;同时将包括母系HO-8910PM细胞在内的三种细胞株注射于裸鼠皮下研究它们在体内皮下成瘤性和远处转移能力的差异。结果建立了稳定表达CD26/DPPⅣ基因的细胞株HODPPⅣ。HODPPⅣ细胞株在体外的增殖速度、侵袭能力、迁移能力、黏附能力、皮下移植瘤体积和淋巴结转移率低于HO-8910PM和HOPcDNA细胞株(P均<0.05)。结论 CD26/DPP Ⅳ基因过表达抑制卵巢癌细胞体内、体外生长和远处转移,有望成为治疗卵巢癌的一种新手段。